Лямблии у детей симптомы и лечение фото: Лямблиоз у детей — причины, симптомы, диагностика и лечение лямблиоза у детей в Москве в детской клинике «СМ-Доктор»

0

Содержание

Лямблиоз у детей: симптомы, лечение

Лямблиоз – это кишечная инфекция, которая в острой форме протекает соответственно своему определению, то есть с повышением температуры до 37.5 – 38.5 градусов, тошнотой, рвотой, болями в животе и жидким стулом – поносом.

В домашних условиях лямблиоз чаще всего родители заболевшего ребенка, а также и участковый врач педиатр примут за обычную кишечную, читай – ротавирусную инфекцию, частота и распространенность которой действительно выше, чем лямблиоза.

Собственно говоря, редкий доктор назначит температурящему и поносящему ребенку копрологию, а если и назначит, то редкий родитель потащится утром перед работой с детскими фекалиями в лабораторию, ведь проще истребовать с лечащего доктора какой-нибудь кишечный препарат, который снимет все симптомы за 2 – 3 дня. А если будет выявлен лямблиоз, то это – экстренное извещение в Роспотребнадзор, и ребенок зависнет дома еще недели на 2, пока не будет получен трехкратный отрицательный результат.

Так что диагноз лямблиоз в обычной практике – это «случайная» находка во время госпитализации в инфекционное отделение.

Лямблиоз у детей – течение хронического заболевания

Установлено, что у большинства лиц, зараженных лямблиями, наблюдаетсяили малосимптомное течение лямблиоза, или вообще практически скрытное, без клинических проявлений. Отсюда и сложности в диагностике.

Хронический лямблиоз чаще поражает детей дошкольного и раннего школьного возраста, при этом у заболевшего ребенка может наблюдаться целый «букет» малоспецифичных жалоб:

— на боли в животе

— быструю утомляемость

— плохой аппетит

— сухость кожи, трещины губ, особенно в углах рта, плохой запах изо рта, налет на языке и т.д.

Из явных признаков поражения желудочно-кишечного тракта можно выделить повышенное газообразование и вздутие живота, периодические боли в животе, чередование нарушений стула от поноса к запорам.

Тем не менее, есть куча других заболеваний, о которых сначала подумает доктор при наличии указанных жалоб, прежде чем речь зайдет о лямблиозе.

Кстати говоря, еще одним обстоятельством, которое может и должно заставить лечащего врача подумать о хроническом лямблиозе, является неожиданно возникшая у ребенка на «пустом месте» аллергия. Конечно я утрирую, пустого места никогда не бывает, но если у ребенка в 13 лет, который никогда раньше не страдал никакой аллергией, вдруг появится острая распространенная крапивница, да еще с отеком Квинке, и которая будет очень долго и нудно уходить даже под воздействием сильнодействующих гормональных препаратов, есть очень твердый повод обследовать ребенка на лямблиоз.

Хронический лямблиоз у детей, диагностика

Основным, хотя и далеко не самым эффективным методом диагностики лямблиоза является обычная копрология, то есть исследование кала под микроскопом.

В реальной клинической практике только копрология в сочетании с анализом крови методом ИФА на антитела к лямблиям может помочь в выявлении этой весьма неприятной проблемы.

Золотым же стандартом в диагностике хронического лямблиоза является гастродуоденоеюноскопия (тот самый «шланг, который глотает пациент») с биопсией слизистой оболочки тонкой кишки и забором на анализ желчи из желчного пузыря.

Таким образом, однократный анализ кала на копрограмму может и не дать никакого результата, если процедура совпала со стадией заболевания, когда не происходит выделение цист возбудителя в просвет кишки, поэтому при получении отрицательного результата при исследовании кала нужно назначить повторно еще 3 или 4 исследования с интервалом в 1 неделю.

Лечение лямблиоза – это довольно длительный процесс, причем запомните, что нельзя вылечить лямблиоз одним препаратом, кто бы и что Вам не говорил. Для гарантированного излечения от лямблиоза требуется комбинация препаратов, действующих как на половозрелые особи лямблий, так и на цисты и споры – спящую и самую трудноизлечимую форму этого паразита. С учетом довольно серьезных побочных эффектов от препаратов, используемых при лечении лямблиоза у детей, крайне желательно добиться получения близкого к 100% подтвержденного диагноза хронического лямблиоза перед тем, как начинать с ним бороться, а кроме этого, также необходимо обследовать всех членов семьи больного ребенка, чтобы избежать впоследствии повторного инфицирования.

ЛЯМБЛИОЗ У ДЕТЕЙ | #04/04

Лямблиоз распространен повсеместно, причем зараженность детей лямблиями, особенно в раннем и школьном возрасте, в несколько раз превышает соответствующие показатели у взрослых. Среди детей, посещающих детские коллективы (ясли, сады, школы), пораженность лямблиями составляет, по данным различных авторов, до 33%.

Клиническая симптоматика лямблиоза складывается из нескольких симптомокомплексов: синдрома поражения желудочно-кишечного тракта и нарушений питания, синдрома интоксикации, в том числе поражение центральной нервной и вегетативной нервной системы, аллергического синдрома (поражение кожи и респираторных органов).

Гастроинтестинальный синдром. Основные клинические симптомы лямблиоза диагностируются со стороны желудочно-кишечного тракта, так как лямблии паразитируют в кишечнике человека. В клинической картине заболевания преобладают энтеральные расстройства, проявления которых в значительной степени зависят от возраста ребенка. Так как местом локализации лямблий является тонкая кишка, где происходит всасывание питательных веществ, у некоторых детей развивается синдром мальабсорбции в виде белково-энергетической и полигиповитаминозной недостаточности.

Симптомы интоксикации имеют прямую зависимость от массивности инвазии, тяжести заболевания, его продолжительности. Интоксикация при лямблиозе может проявляться гепатолиенальным синдромом и увеличением периферических лимфатических узлов, миндалин и аденоидов. Длительная интоксикация при лямблиозе может также привести к появлению таких неврологических симптомов, как скрип зубами (бруксизм), тики. Действие продуктов жизнедеятельности лямблий может оказывать угнетающее действие на центральную нервную систему и служить причиной быстрой утомляемости, снижения работоспособности, эмоционального тонуса. Недаром первооткрыватель этого патогенного простейшего Д.
Ф. Лямбль назвал его «паразит тоски и печали».

Аллергические проявления на коже, а также со стороны респираторного, желудочно-кишечного тракта и крови могут проявляться при любой форме лямблиоза вне зависимости от тяжести и остроты процесса. Давно известно, что в ответ на внедрение паразита повышается уровень IgE и уровень эозинофилов в периферической крови [3, 4, 7] — гиперпродукция IgE и эозинофилия являются древнейшими филогенетическими способами антипаразитарной защиты. Именно этим можно объяснить хорошо известный клиницистам факт, что паразитозы усиливают аллергические признаки у детей с атопией и другими формами аллергических проявлений.

Следует отметить, что диагностика лямблиоза затруднена в связи с отсутствием патогномоничной симптоматики, а сам лямблиоз либо наслаивается на другие заболевания, либо все клинические проявления этой паразитарной инфекции объясняются прочими разными причинами [4].

Обследование на лямблиоз показано при следующих состояниях (Н. П. Шабалов, Ю. И. Староверов, 1998) [5]: наличие заболеваний пищеварительного тракта, тенденция к их хроническому течению с частыми, но умеренно выраженными обострениями; нейроциркуляторная дисфункция, особенно в сочетании с желудочно-кишечными нарушениями; стойкая эозинофилия крови; аллергические проявления.

По данным литературы, иммунологические методы, например определение антител к лямблиям в сыворотке крови, обладают высокой чувствительностью и специфичностью.

Выявление специфических IgM и IgG к антигенам лямблий методом иммунофлюоресцентного анализа (ИФА) возможно с 12–14-го дня заболевания.

После санации IgM быстро исчезают. Их выявление свидетельствует о заболевании лямблиозом, IgG сохраняются до 2 мес после санации.

Однако пока патогенные свойства паразита недостаточно изучены, в частности не идентифицированы лямблиозные токсины, представляется преждевременным полагаться в диагностике лямблиоза только на результаты иммунологического исследования.

По нашим наблюдениям, у детей с упорным, длительно текущим лямблиозом антитела к лямблиям в сыворотке крови могут не определяться. И. В. Куимова и Т. Н. Ткаченко (2002) также обнаружили антитела менее чем у половины инфицированных лямблиями детей [2], что, по нашему мнению, может свидетельствовать о неэффективности механизмов гуморальной защиты.

Поэтому отсутствие специфических иммуноглобулинов у детей с повторным обнаружением цист лямблий является плохим прогностическим признаком и требует от врача применения индивидуальных схем лечения. Достаточно часто антитела к лямблиям не обнаруживаются у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом.

В современных условиях диагностика лямблиоза осуществляется рутинным методом микроскопии фекалий, однако этот метод в значительной степени субъективен, многое зависит от правильности проведения всех этапов исследования.

Не всегда образцы кала доставляются в лабораторию «теплыми», что объясняется особенностями работы с детским контингентом: ребенок не может опорожнять кишечник по приказу. Это препятствие может быть преодолено благодаря использованию консервирующих растворов, таких, как феноло-формалиновая смесь — реактив Борроуза.

Также большое значение имеет правильное приготовление препарата для микроскопии. Материал должен наноситься на стекло тонким, прозрачным слоем, иначе цисты лямблий очень трудно рассмотреть в толще детрита. Микроскопию следует осуществлять сразу же после приготовления препарата.

В условиях in vitro цисты могут изменить свою форму — «съежиться», оболочка их становится неровной, сливается с детритом, что значительно затрудняет идентификацию.

Существует еще одно «естественное» препятствие, затрудняющее диагностику лямблиоза, — «феномен прерывистого цистовыделения». Ребенок, зараженный лямблиозом, выделяет цисты не каждый день — интервал в выделении цист составляет 8–14 дней, для лабораторного подтверждения диагноза следует проявить определенную настойчивость. Рекомендуется повторная многократная микроскопия фекалий.

Известно, что создание неблагоприятных условий способствует цистированию и выделению цист. Было отмечено, что при назначении желчегонных и противолямблиозных препаратов цисты обнаруживаются значительно чаще.

В качестве средств «провокации» используются различные препараты с учетом возраста ребенка, выраженности клинических проявлений и наличия сопутствующих показаний: настой кукурузных рыльцев, гомеопатический препарат холевит, макмирор, фуразолидон, метронидазол. При однократном обследовании цисты лямблий были обнаружены у 92,5% детей, у которых клинически был заподозрен лямблиоз. Таким образом, выполнение простых правил позволяет улучшить диагностику лямблиоза.

Еще большей настойчивости требуется при лечении лямблиоза. При назначении антипротозойных препаратов следует помнить, что терапия этой инфекции преследует цель не столько полной эрадикации лямблий из кишечника, сколько уменьшения клинических проявлений интоксикационного, гастроинтестинального и аллергического синдромов.

Эффективность применения противолямблиозных препаратов для уменьшения клинических проявлений аллергического синдрома достаточно выражена. Используя в качестве стартовой терапии макмирор или метронидазол, мы отмечали клиническое улучшение в течение первых 7–10 дней. У 85% детей с атопическим дерматитом отмечалось ослабление кожных проявлений; явления бронхиальной обструкции исчезли или сократились у 86% детей: исчезли одышка и удлинение выдоха, смягчился кашель; явления аллергического конъюнктивита уменьшились у всех детей.

Положительный эффект наблюдался как при назначении макмирора, так и при назначении метронидазола. В отличие от метронидазола и фуразолидона, в элиминации которых участвует печень, макмирор практически полностью элиминируется почками, и при этом не затрагиваются дезинтоксикационные резервы печени.

Следует помнить, что при назначении медикаментозных препаратов, эффективных в отношении Lamblia intestinalis, таких, как метронидазол и фуразолидон, на второй-третий день лечения может наступить ухудшение самочувствия ребенка в виде тошноты, рвоты, зуда, высыпаний на коже. Под влиянием лечения продукты массивного распада паразита всасываются в кровь и становятся причиной усиления интоксикации и сенсибилизации организма. Накопление продуктов распада паразитов в кишечнике способствует изменению рН внутренней среды и развитию дисбактериоза. Эта реакция носит название реакции Яриш-Гейксгеймера, как правило, она, длится не дольше 5–7 дней. Для уменьшения ее проявлений в течение курса лечения 1-2 раза в неделю рекомендуется проводить тюбажи с осмотическими слабительными — 25–30% раствором сульфата магния, сорбитом, ксилитом у детей старше 5–7 лет. Осмотические слабительные препятствуют всасыванию продуктов распада паразитов и ослабляют реакцию Яриш-Гейксгеймера.

Из-за опасности усиления интоксикации в первые дни лечения нецелесообразно применять противолямблиозные препараты короткими курсами. Длительность приема противолямблиозных препаратов 5–7 дней не приводит к эрадикации паразита, после отмены препарата клинические проявления заболевания возобновляются, и в результате такой курс может не привести к клиническому улучшению.

Уменьшению проявлений реакции Яриш-Гейксгеймера также способствует назначение препаратов системной энзимотерапии, в частности вобэнзима, представляющего собой комплекс высокоактивных ферментов растительного и животного происхождения. Препарат обычно назначается по 3–5 драже 3 раза/сут за 40 мин до еды, начиная со второго 10-дневного курса лечения макмирором или метронидазолом, на весь период проведения основного и противорецидивного курсов.

Следует отметить, что, во-первых, в условиях углубляющегося микробиоценотического дисбаланса кишечника нарастающий эндо- и экзотоксикоз приводит к сенсибилизации организма и создает риск возникновения и развития пищевой аллергии (рис.). Прямое системное и местное участие полиферментных препаратов в метаболизме и всасывании токсинов и сенситинов существенно улучшает эту ситуацию.

Во-вторых, растительные компоненты препарата (папаин и бромелаин) активны в толстой кишке, где рН среды смещен в кислую сторону. Тем самым обеспечивается глубокий протеолиз белков и гликопротеидов, что, по-видимому, лишает условно-патогенные (и патогенные) микробы-ауксотрофы факторов роста и пищевых субстратов, в то время как неприхотливые компоненты нормальной, сбалансированной микробиоценотической системы кишечника (например, микробы-сахаролитики) не нуждаются в белках для своей жизнедеятельности.

В-третьих, иммуномодулирующие свойства полиферментного препарата, прежде всего стимуляция макрофагов, позволяют противостоять антигенной гиперстимуляции с последующим истощением местного иммунитета [8].

Обобщив опыт наблюдения более чем 400 больных с лямблиозом, мы считаем, что для получения максимального эффекта целесообразно назначать противолямблиозный препарат двумя 10-дневными курсами с 5-дневным перерывом между ними.

За это время мы наблюдали уменьшение клинических проявлений со стороны желудочно-кишечного тракта более чем у 95% детей и стойкое уменьшение аллергических проявлений (кожных, респираторных и т. д.) более чем у 80% детей.

Проведенный курс лечения не всегда приводит к эрадикации паразита, мы обнаруживали цисты лямблий в кале на 20–25-й день лечения макмирором и метронидазолом. В контрольных анализах цисты лямблий выявляются гораздо легче, чем до лечения, даже при полном клиническом благополучии. По всей видимости, этот феномен связан с тем, что в процессе лечения повышаются иммунологические свойства организма, что способствует «изгнанию» лямблий.

При излечении от лямблиоза сохраняется высокий риск повторного заражения, так как, во-первых, распространенность этой инфекции в популяции достаточно велика, во-вторых, все исследователи единодушно признают возможность повторного заражения. У многих пациентов мы наблюдали возврат клинических проявлений в течение ближайших недель и месяцев.

С другой стороны, отсутствие цист ляблий в кале не может служить критерием успешного лечения. Главный показатель выздоровления — исчезновение клинических симптомов: прекращение болей в животе, восстановление массы тела, очищение языка, ликвидация кожных проявлений, нормализация стула и размеров печени.

Увеличение размеров печени является одним из самых динамичных симптомов лямблиозной интоксикации. У подавляющего большинства больных безболезненный и эластичный край печени выступает из-под края реберной дуги на 1 — 4 см. На 5–7-й день от начала лечения размеры печени обычно нормализуются (т. е. край печени пальпируется по краю реберной дуги). Если в процессе лечения не удалось добиться эрадикации паразита, увеличение размеров печени происходит через 9–14 дней после окончания курса лечения. В этом случае показаны повторные противорецидивные курсы: однократный прием метронидазола в возрастной дозировке на ночь, утром тюбаж с осмотическим слабительным. Как правило, проводится не менее 4–6 противорецидивных курсов. За данный период времени удается добиться стойкого уменьшения аллергических проявлений более чем у 90% больных.

Дети, у которых методом копроскопии неоднократно обнаруживаются цисты лямблий, а иммунологическое исследование (ИФА) не выявляет антител к лямблиям (т. е. гуморальная защита против паразита неэффективна), составляют особую группу, нуждающуюся в проведении иммунокоррекции, которую мы осуществляли препаратом вобэнзим. Наш выбор был обусловлен еще и тем, что у многих больных лямблиозом — и детей, и взрослых — отмечались различные проявления синдрома мальдигестии — нарушения пищеварения в тонкой кишке.

Под нашим наблюдением находилось 27 детей в возрасте от 1 года. В клинической картине преобладали: синдром мальдигестии и мальабсорбции с отставанием в физическом развитии у всех детей, выраженный абдоминальный болевой синдром — у 23 детей. Все дети получили традиционные препараты макмирор и метронидазол двумя повторными курсами по 10 дней и противорецидивные курсы тинидазолом. Начиная со второго 10-дневного курса макмирора, 20 детям был назначен вобэнзим в течение 2-3 мес. Дети получали препарат из расчета 1 таблетка на 5 кг массы в сутки. В группе детей, получавших вобэнзим в течение 2-3 мес, восстановление массы тела произошло у 17 детей, абдоминальный болевой синдром уменьшился у 16 из 17. Количество противорецидивных курсов тинидазолом было сокращено до 2. В группе детей, получивших лечение только противолямблиозными препаратами за тот же период, болевой синдром уменьшился у 4 из 6, а полное восстановление массы тела произошло у 3 детей. В этой группе потребовалось провести 4 противорецидивных курса тинидазолом. Применение вобэнзима позволило быстрее достичь восстановления массы тела, уменьшения болевого синдрома и сократить количество противорецидивных курсов тинидазолом [1].

Для закрепления положительного эффекта лечения широко используются лекарственные травы с регенерирующим, эпителизирующим, противовоспалительным, желчегонным и обволакивающим действием. В летний период времени показана курортотерапия: морские купания, солнечные и воздушные ванны. При достижении клинической ремиссии заболевания дети продолжали находиться под наблюдением и при повторном появлении типичных симптомов заболевания получали противорецидивные курсы макмирора. Такой порядок ведения больных лямблиозом позволил удлинить клиническую ремиссию у детей до 6 лет с атопическим дерматитом и респираторными аллергозами.

По вопросам литературы обращайтесь в редакцию.

Т. Ю. Бандурина, кандидат медицинских наук, доцент
Г. Ю. Кнорринг, кандидат медицинских наук
МАПО, Санкт-Петербург

Лямблиоз: симптомы и лечение

Все сегодня обеспокоены ситуацией с коронавирусом, и это понятно и правильно. Но не стоит забывать и о других инфекциях — кишечных. Расскажем об одной из них — лямблиозе. Каждый год в России регистрируется более 140 тысяч случаев этого заболевания. Начинают фиксировать весной, в апреле и мае, а пик болезни приходится на лето. Лямблиоз опасен в первую очередь тем, что имеет бессимптомное течение, а клинические признаки не являются специфичными. Часто это заболевание скрывается под маской дискинезии желчных путей, под хроническим энтеритом и иными патологиями органов ЖКТ.

КАК ЗАРАЖАЮТСЯ

Лямблиоз — это распространённое инфекционное заболевание организма человека, вызванное кишечным одноклеточным паразитом лямблией.

Основной способ заражения — фекально-оральный. Цисты с фекалиями больного человека или животного попадают во внешнюю среду, прежде всего в воду. Здоровый человек заражается, когда пьёт такую воду или ест загрязнённые цистами продукты. В летний период можно заразиться, покупавшись в водоёме, заражённом цистами лямблий.

Животные наряду с человеком подвержены лямблиозу. Эта паразитарная инвазия обнаруживается у кроликов, собак, кошек, грызунов, крупного рогатого скота и у иных млекопитающих. Человек чаще всего заражается от другого человека, однако не исключена возможность заражения от животных и от мух и тараканов, которые переносят цисты лямблий.

Когда циста лямблии с водой или пищей попадает в желудок человека, то её защитная оболочка растворяется. В результате из цисты “вылупляется” вегетативная форма паразита. Чтобы у человека развился лямблиоз, достаточно всего десяти цист.

НА ЧТО ВЛИЯЮТ ЛЯМБЛИИ

Эти паразиты выделяют в организме человека множество токсинов, что отравляет его изнутри. Активность лямблий и скорость их размножения напрямую зависит от состояния органов пищеварения человека. Резко снижается количество особей во время голодания и при употреблении больным достаточного количества белковой пищи. При поступлении в организм углеводной пищи, напротив, стимулируется рост и размножение паразитов.

ФОРМЫ ЛЯМБЛИОЗА

Существует три формы заболевания.

1. Лямблионосительство, или бессимптомный лямблиоз, — признаков болезни нет, но при этом человек выделяет лямблии в окружающую среду. Бессимптомное течение заболевания наблюдается у 60 процентов пациентов.

2. Кишечная форма — признаки нарушения функций кишечника. Основные проявления: постоянные ноющие боли в области правого подреберья, болезненность в районе пупка, часто связанная с приёмами пищи; приступообразные боли с тошнотой и рвотой; чувство переполненного желудка, сопровождающееся вздутием живота; ухудшение аппетита; тошнота, отрыжка; стеаторея — большое количество жиров в кале; изжога; проблемы со стулом: диарея может сменяться запорами.

3. Гепатобилиарная форма — нарушение функций печени, желчевыводящих путей. Основные симптомы: боль в правом подреберье; ощущение горечи во рту; отрыжка с горьким привкусом; болезненность при дотрагивании до живота в области желчного пузыря; кожные проявления ограничиваются небольшой желтухой и зудом.

Характерны также общие симптомы: бледность кожи даже при нормальной концентрации гемоглобина в крови, слабость, раздражительность, синяки под глазами, заеды вокруг рта, аллергические проявления, повышенная утомляемость, головные боли.

Длительность острой фазы не дольше семи дней, после чего наступает либо выздоровление, либо течение болезни становится подострым или хроническим.

Признаки лямблиоза при хроническом течении:

— нарушение работы органов пищеварения. Стул больного становится неустойчивым, частые запоры сменяются такими же частыми диареями. Снижается аппетит, беспокоит вздутие и урчание в кишечнике

— часто беспокоят головные боли, появляется чрезмерная сонливость и раздражительность

— ухудшается цвет кожи, возможно развитие слабой желтухи

— кожные высыпания начинают беспокоить больного всё чаще, даже если раньше человек аллергией не страдал. Возможны проявления дерматита или крапивницы

— характерен фолликулярный кератоз с появлением на коже точечных припухлостей. Преимущественно страдает кожа плеч. Она покрывается шершавой коркой или белыми округлыми бляшками, склонными к повышенному шелушению

— страдает слизистая оболочка ротовой полости: часто возникает афтозный стоматит, в уголках рта появляются заеды, кайма губ воспаляется

Если лямблии паразитируют на протяжении длительного времени, то будут наблюдаться признаки угнетения иммунитета и симптомы интоксикации.

Ещё одним косвенным признаком лямблиоза у взрослых является непереносимость цельного коровьего молока.

Поставить диагноз лямблиоза невозможно без лабораторного подтверждения. Базовым методом диагностики является микроскопическое исследование кала. Его необходимо проводить не менее трёх раз. Желательно исследовать дуоденальное содержимое: цисты обнаруживают в просвете двенадциперстной кишки. Также проводится серологическая диагностика лямблиоза, когда специфические антитела обнаруживаются в крови через 2—4 недели после заражения.

КАК ЛЕЧАТ ЛЯМБЛИОЗ

Лечение лямблиоза должно проводиться только врачом — инфекционистом или гастроэнтерологом. Лечение довольно длительное. Для того чтобы уничтожить все лямблии, количество которых у взрослого человека может достигать нескольких миллионов, требуется несколько курсов противопаразитарных препаратов. Также необходимо восстановить микрофлору кишечника, провести детоксикацию. Лечение проводится поэтапно.

1. Подготовительный этап. Необходимо попытаться механическим путём убрать из кишечника максимальное количество лямблий, а также снять интоксикацию с организма.

Для этого больной должен полностью исключить из меню сладкое и углеводы, которые быстро усваиваются; употреблять продукты питания, богатые клетчаткой, и белковые продукты; отказаться от цельного молока, ограничить поступление жиров; перейти на дробное питание: 5-6 раз в день; пить больше жидкости, отдавая предпочтение кислым морсам и желчегонным отварам.

Дополнением диеты становится приём энтеросорбентов, желчегонных препаратов, антигистаминных средств и пищеварительных ферментов.

2. Применение антипаразитарных средств. Второй этап занимает 5—10 дней. Все лекарственные средства назначаются лечащим врачом. Одновременно с приёмом антипаразитарных препаратов больные принимают курс антигистаминных средств, ферментов и сорбентов.

3. Восстановление организма после лечения. Заключительный этап лечения направлен на повышение иммунитета пациента, нормализацию микрофлоры кишечника. Для этого ему назначают витаминно-минеральные комплексы, кишечные бактерии, ферментные препараты.

От лямблиоза нет вакцины, а иммунитет, который вырабатывается после перенесённой болезни, весьма нестойкий. Поэтому риск повторного заражения сохраняется на высоком уровне. Гораздо проще предотвратить инвазию, чем осуществлять последующее лечение лямблиоза.

Справка

Лямблии — одноклеточные микроскопические жгутиковые паразиты. Они существует в двух формах: в форме вегетаций — обычных клеток и цист. Вне человеческого тела вегетативные формы не способны к длительному существованию. Весь цикл жизнедеятельности паразита проходит в кишечнике человека или животного. Проникая в тонкий кишечник, лямблии прикрепляются к ворсинкам и начинают всасывать питательные вещества, образуя новые вегетации. Те вегетативные формы лямблий, которые не прикрепились к ворсинкам, опускаются в толстый кишечник, где становятся цистами, покрываясь защитной оболочкой. Из организма выходят вместе с каловыми массами больного. Цисты сохраняют свою жизнеспособность вне тела человека на протяжении 18 суток и более, если находятся в воде. А без достаточного увлажнения они погибают за несколько часов. При кипячении тоже гибнут. На продукты питания цисты попадают с водой: на фруктах и овощах цисты паразита способны сохранять жизнеспособность на протяжении шести часов, в молочных продуктах — до 12 суток.

Долгое время считалось, что лямблии способны паразитировать в желчевыводящих путях. Однако доказано, что желчь в высоких концентрациях для этих паразитов губительна.

Профилактика

Предупреждение инвазии лямблиями включает комплекс стандартных мер:

— не пить сырую (некипячёную или не очищенную иным способом) воду

— не глотать воду во время купания в открытых водоёмах

— тщательно мыть все подаваемые на стол фрукты и овощи, а также руки перед приёмом пищи

— не позволять домашним животным, кошкам, собакам, облизывать лицо и руки

Лямблиоз у детей — ЛОР клиника №1

Рейтинг статьи

(Проголосовало: )

В детском возрасте достаточно часто встречается такое заболевание, как лямблиоз, которое вызывается простейшими паразитами. Особенности детской иммунной системы, которая является незрелой, пониженная кислотность желудочного сока — вот некоторые причины, которые обуславливают восприимчивость детей к этой инфекции.

Во внешней среде лямблии обитают в водоемах, в загрязненных водостоках, местах выгула животных. Источником инфекции служит больной человек либо носитель. Опасными являются и загрязненные песочницы. В организм ребенка лямблии попадают, как правило, при несоблюдении правил личной гигиены: через грязные руки, игрушки, немытые фрукты и овощи, при купании в загрязненном водоеме, через привычки грызть карандаши, ногти. Таким образом, пути заражения сходны с путями заражения кишечными инфекциями, с той лишь разницей, что для лямблиоза более характерным является водный путь, а для кишечных инфекций — пищевой. Попадая в организм ребенка, паразиты начинают стремительно размножаться в тонкой кишке и в процессе своего движения могут попасть в желчный пузырь.

Проявления заболевания для каждого возрастного периода имеет свои отличия. В младшем детском возрасте чаще всего возникают аллергические реакции и поражение желудочно-кишечного тракта, сопровождающееся снижением аппетита, вздутием живота, диареей. В старшем возрасте присоединяется болевой и астеноневротический синдромы, а в 25% случаев может встречаться и бессимптомное носительство. Неопределенность клинической картины диктует необходимость проведения лабораторной диагностики для подтверждения диагноза. Объем и частоту обследования определяет только врач. 

Симптомы лямблиоза у детей

Лямблиоз называют «коварная болезнь», так как его проявления крайне разнообразны и могут быть характерны для других болезней. Если у ребенка бывают следующие симптомы, необходимо срочно обратиться к врачу:

  • необоснованные подъемы температуры в течение длительного времени,
  • расстройство желудочно-кишечного тракта, плохо поддающееся лечению,
  • кожные аллергические реакции,
  • нарушение сна,
  • увеличение лимфатических узлов,
  • эмоциональная неустойчивость,
  • частые респираторные заболевания, сопровождающиеся обструкциями.

Лечение лямблиоза

К сожалению, лямблиоз плохо поддается лечению, поэтому всегда существует угроза перехода заболевания в хроническую форму. Объясняется это тем, что при проведении лечебных мероприятий часть паразитов гибнет, а часть образует цисты, которые частично выделяются во внешнюю среду, а частично сохраняются в организме. Через некоторое время, цисты разрушаются, и происходит повторное заражение. Как правило, лечение проводится курсами всем членам семьи, под контролем данных лабораторных исследований, учитывая упорность течения заболевания и цикличность выделения паразитов. Через полгода лечение повторяют. 

Профилактика заключается, прежде всего, в соблюдении санитарно-гигиенических правил: 

  • мытье рук с мылом, особенно после посещения мест общего пользования; 
  • употребление в пищу только мытых овощей и фруктов, кипяченой воды; 
  • избегания купания в незнакомых водоемах. 

Чем раньше начато лечение, тем больше шансов предотвратить «хронизацию» процесса. Лечение должно проводиться только комплексно под контролем результатов лабораторных исследований. 

Что такое лямблии и чем они опасны для человека?

 Лямблии это одноклеточные гельминты, которые имеют микроскопические размеры. Обитают в организме у человека, млекопитающих, паразитируют в кишечнике, двенадцатипёрстной кишке, в жёлчном пузыре, в печени. Особенно опасны лямблии в печени. Есть 2 формы существования лямблий: Вегетативная – плоские паразиты грушевидной формы, размеры которых не превышают 0,02 мм. Паразитируют в тонком кишечнике и других органах пищеварения. Глисты активно передвигаются при помощи жгутиков, питаются остатками расщеплённой пищи и размножаются. Цисты – споровая форма, при которой активная жизнедеятельность паразитов приостанавливается. Она необходима, чтобы длительное время сохранять жизнь глистам в неблагоприятных условиях. Вегетативная форма превращается в цисту, когда гельминты попадают в толстый кишечник, откуда выводятся во внешнюю среду. За пределами организма в капсулированном виде они живут месяцами, пока не попадут в тело нового носителя. Несмотря на небольшие размеры, эти гельминты наносят большой вред здоровью. Результатом их паразитирования становятся: нарушение процесса усвоения питательных веществ. Продукты жизнедеятельности лямблий негативно сказываются на работе эндокринной, нервной, сердечнососудистой  системе, поскольку паразиты влияют на состав крови. Часто возникают дерматологические заболевания. Возрастает риск развития астмы, снижается иммунитет, происходит потеря веса из-за ухудшения аппетита.

 Заражение лямблиями происходит, когда цисты попадают в организм через рот. Это может произойти 3 путями:

1- водный – при употреблении некипяченой водопроводной воды либо из природных источников.

2- Пищевой – через немытые либо необработанные термически продукты, в частности, фрукты, овощи.

3- Контактно-бытовой – при  контакте человека с животным, страдающим от лямблиоза и предметами, на которых были цисты. Для развития болезни достаточно, чтобы в организм попало 10 цист. Особенно подвержены инфицированию люди с пониженной кислотностью желудка.

Первые симптомы заболевания проявляются после заражения спустя 1-2 недели, когда паразиты начинают активно размножаться и их количество быстро увеличивается. Общим признаком инвазии является снижение веса. Другие – зависят от формы протекания болезни. Она бывает острой и хронической. Головная боль может сигнализировать о появлении лямблий

Симптомы острого лямблиоза. Острая форма заболевания продолжается 5-7 дней, но может затянуться на месяцы. Проявляется она такими симптомами: Повышенная утомляемость, раздражительность. Головные боли. Нарушения стула (запоры, поносы), метеоризм. Тошнота, возможно рвота. Резкое повышение температуры до 38°С. Боли в животе, локализуются в районе пупка. Ухудшение аппетита, чувство перенасыщения. Стремительная потеря веса. Появление сыпи на коже. От острой формы болезни чаще страдают дети. Если не начать лечение, лямблиоз переходит в хроническую форму. Основные её признаки: Нарушения функционирования желудочно-кишечного тракта – вздутие живота, запоры либо поносы, метеоризм. Ухудшение цвета кожи, неравномерная её окраска, чрезмерная бледность лица. Высыпания на языке. Аллергические реакции, дерматиты. Чрезмерная сухость и шелушение каймы губ. Истощение нервной системы, нервозность, астения. Патологии жёлчевыводящих путей, застой жёлчи. Анорексия. Хронический лямблиоз сопровождается острой болью в животе. Люди могут быть носителями лямблий. В таких случаях их состояние здоровья не ухудшается, но для окружающих они являются источником заражения.

Симптомы лямблиоза у детей. Особенно опасен лямблиоз для детей. Самые характерные симптомы поражения у детей: отставание в физическом и интеллектуальном развитии, поскольку организм не получает нужные микроэлементы и витамины. Отказ от еды. Быстрое истощение. Повышенная температура до 37,5°С без других симптомов простуды, которая держится неделями. Постоянные поносы либо запоры. Скрежетание зубами во сне. Тянущие либо режущие боли в области живота. Постоянная вялость, пониженный тонус. Увеличенные лимфоузлы. Удушливый кашель. Лябмлии в организме приводят к ухудшению самочувствия и  нужно пройти диагностику, чтобы исключить инвазию лямблиями.

С целью подтверждения лямблиоза обязательно нужно провести лабораторный анализ. Курсы лечения назначаются строго врачом.

Профилактика.

Чтобы минимизировать риск заражения лямблиями, нужно соблюдать простые правила:

Тщательно мыть руки перед каждым приёмом пищи.

Пить лишь фильтрованную либо кипячёную воду.

Мыть фрукты, овощи.

Не купаться в водоёмах, где не предусмотрены пляжи.

Не грызть ногти.

Регулярно проводить антигельминтную профилактику домашним животным.

Необходимо приучать детей к соблюдению правил личной гигиены с раннего возраста.

При появлении признаков болезни  не заниматься самолечением, обращаться за медицинской помощью к врачу.

Помощник  энтомолога                                                       Куликовская Н.В.

причины, симптомы, диагностика, лечение, профилактика

Представляет паразитарную инвазию, возбудителями которой являются одноклеточные организмы – лямблии.

Причины

Возбудителем лямблиоза у детей и взрослых являются Lambliaintestinalis (Giardialamblia, Giardiaintestinales, Giardiaduodenalis), которые представляют собой одноклеточные жгутиковые микроорганизмы, которые паразитирует в кишечнике. В организме людей лямблии могут выявляться в двух формах – вегетативной, которая выявляется в верхних отделах тонкого кишечника, и споровой, цистной, обнаруживающейся в толстой кишке и откуда выделяющуюся с испражнениями во внешнюю среду. В вегетативной форме лямблии отличаются низкой устойчивостью во внешней среде и вне организма хозяина быстро погибают, цисты способны сохранять жизнеспособность до 70 дней во влажной среде и до 3 месяцев в водопроводной воде.

Лямблии могут паразитировать в кишечнике собак, кошек, грызунов, однако их патогенность для человека достоверно не доказана, в связи с этим принято считать, что основным резервуаром инфекции является инфицированный человек. Установлено, что ребенок, больной лямблиозом, в сутки выделяет примерно 900 миллионов цист паразита вместе с калом, между тем для заражения ребенка достаточно от 8 до 10 цист.

Заражение детей лямблиозом происходит фекально-орального путем, при проникновении цист паразитов в пищеварительный тракт ребенка с водой, пищей, при использовании общих игрушек, посуды и предметов гигиены, а также через грязные руки. Инфицирование новорожденных детей может происходить в родах при прорезывании головки. Если в семье один или несколько детей больны лямблиозом, то паразит имеется у всех остальных членов семьи.

Симптомы

У большинства детей, страдающих лямблиозом отмечается развитие абдоминального синдрома, характеризующегося приступообразной болью в животе, которая не связана с приемом пищи. Иногда интенсивность болевого синдрома у детей может быть настолько выражена, что патология ошибочно принимается за симптомы острого живота.

Диспепсические нарушения у детей с лямблиозом могут проявляться снижением аппетита, отрыжкой, изжогой, тошнотой, горечью во рту и вздутием живота. У ребенка возникает дисбиоз, на фоне которого отмечается учащение стула, при этом кал становится жидким, пенистым, зловонным. Иногда учащение дефекации может варьироваться от 3до 5 раз в сутки. При исследовании копрограммы обнаруживается стеаторея. Довольно часто у детей с данным заболеванием отмечается чередование запоров и диареи. В результате нарушения кишечного всасывания и расстройства стула происходит снижение массы тела и развивается гипотрофия.

Иногда у детей выявляются аллерго-дерматологические проявления лямблиоза. В этом случае на коже ребенка может отмечаться появление мелкоточечной розовой сыпи по типу крапивницы, выраженного кожного зуда, а у подростков возникает или усиливается юношеская угревая сыпь. Иногда отмечается развитие аллергического ринита, аллергического конъюнктивита, атопического дерматита, отека Квинке, бронхиальной астмы. Иногда у ребенка на фоне угнетения центральной нервной системы отмечается развитие астено-невротического синдрома, вследствие чего у малыша появляется повышенная утомляемость, снижение работоспособности и эмоционального тонуса, происходит появление раздражительности, плаксивости, головных болях, головокружений, бруксизма и тиков.

Диагностика

В связи с тем, что симптомы инфекции не являются специфичными, дети с лямблиозом в течении длительного времени могут безрезультатно проходить лечение у разных специалистов.

Самой доступной формой диагностики лямблиоза у детей является выявление цист лямблий в кале. Помимо этого, широко используется серологическая диагностика лямблиоза у детей, направленная на выявление специфических антител к антигенам лямблий в крови, а также высокочувствительное ПЦР-исследование кала и дуоденального содержимого.

Лечение

Лечение лямблиоза у детей направлено на эрадикацию паразита и устранение клинических проявлений. При выявлении лямблиоза у ребенка должно проводиться лечение всех членов семьи и домашних питомцев.

Для получения максимального эффекта необходимо соблюдение диеты, режима питания и устранение холестаза. С целью устранения эндогенной интоксикации рекомендуется прием энтеросорбентов, при синдроме мальдигестии и мальабсорбции назначаются ферменты на основе панкреатина. Также таким больным показан прием холекинетиков и проведение слепых тюбажей по Демьянову. При обнаружении дисбактериоза проводится соответствующая коррекция микробного пейзажа кишечника.

Этиотропная терапия лямблиоза у детей основана на проведении противолямблиозных препаратов, которые относятся к группе нитроимидазолов и производных нитрофуранов. Выбор препарата, схему и длительность лечения лямблиоза у детей подбирают индивидуально.

После завершения терапевтического курса рекомендовано повторное обследование ребенка на лямблиоз. При упорном течении патологии проводятся два цикла лечения разными препаратами.

Профилактика

Профилактика лямблиоза у детей основывается на выявлении и лечении бессимптомных паразитоносителей и цистовыделителей, привития детям гигиенических навыков и проведения противоэпидемических мероприятий в детских учреждениях.

Глисты и лямблии у детей: как распознать и вылечить

Самая популярная нынче тема для обсуждения у мамочек в нашем дворе – какую заразу можно подхватить в песочнице. В ней повадились ночевать бродячие собаки и есть подозрение, что делают они это давно и успешно.

Если подумать, каких-нибудь паразитов можно подцепить где угодно. Ехал ребенок в автобусе, потер грязной ручонкой рот – и готово! Или у бабушки летом на грядках клубнику трескал. Немытую. А бабушки грядки чем удобряют? Или навозом, или компостом – там кто только не водится…

Как защититься от паразитов? Об этом мы поговорили с опытным врачом Владимиром Качесовым.

Заражены почти все

— Я не хочу шокировать, но давайте посмотрим правде в глаза. У нас общество почти на сто процентов заражено глистами! — огорошил Владимир Качесов. — Заразиться можно везде, где угодно. Причем, не только на природе, как принято было считать раньше. В городе большое количество животных гуляет, бегает по детским площадкам, подъездам, лестницам и уберечься от этого практически невозможно. Ребенок ползает по тротуару, ездит на велосипеде, ходит в школу, везде берется за грязные поручни, какие-то предметы тащит в рот – заразиться легко.

– И в продуктах наверняка тоже есть глисты. На что нужно обращать внимание – сырая рыба, мясо?

— Я сам недавно читал в газете «Комсомольская правда» о большом количестве заражений глистными инвазиями через японские рестораны. Не потому, что японцы плохие, а потому что технология у нас в России допускает к продаже термически не обработанную сырую рыбу. У меня знакомые недавно ездили в Японию, они говорят: там нет такой сети ресторанов. Там подают обыкновенную, проваренную, термически обработанную рыбу. Я сам люблю суши. Но с тех пор, как прочитал в вашей газете о состоянии дел в японских ресторанах, сейчас туда не хожу, остерегаюсь.

– А на овощах и фруктах, на той же зелени могут быть глисты? Если хочется в салат положить чистую зелень, как обеззаразить ее, не разрушив витамины?

— Это делается очень просто. Для обработки от глистов достаточно кратковременно обдать зелень кипятком. Витамины от такой обработки не разрушатся. Люди постоянно заражаются глистами. Это нормально, от этого уберечься невозможно, поэтому зачем питать иллюзии и говорить, что давайте будем беречься и мы никогда не заразимся. Заразимся! Однако, падать в обморок сразу не стоит. В природе есть такое понятие, как симбиоз – содружественное существование паразитов как на растениях и животных, так и с человеком. Паразиты в своем роде берегут хозяина и даже защищают его. Например, глисты могут беречь хозяина от грибковых и бактериальных инфекций. И по большому счету, пока количество паразитов не превышает некую пороговую величину – люди даже не догадываются, что носят в себе паразитов.

— И что, уберечься невозможно? Какова вероятность, что можно подхватить паразитов?

— Сто процентов! Единственная страна в мире, которая дает меньше процент заражения глистами – это Япония. Но они столкнулись с другой проблемой. Ведь симбиоз – это содружество, сосуществование. Нарушается баланс, начинают проявляться другие заболевания. Без симбиоза мы не можем существовать, это сложилось исторически. Первобытный человек не мыл руки, но мы дожили до сегодняшних дней. Не так страшен черт, как его малюют!

Тошнота и боли в животе – повод для тревоги

— Когда родителям нужно беспокоиться, на какие симптомы обратить внимание?

— Это прежде всего непонятные приступообразные боли в животе, появление глистов в кале у ребенка, тошнота, непонятные головокружения, бледность, не связанная с другим заболеванием. Тут надо бить тревогу и сразу обращаться к врачу. Можно сдать обычный общий анализ крови. Если эозинофилов много – это повод для беспокойства.

— Кроме глистов в последнее время стало модным ставить диагноз «лямблиоз». Причем, его очень успешно ставят в частных клиниках, но никогда – в муниципальных. Это такой способ выкачивать деньги?

— Лямблиоз достаточно часто встречается у детей. Но нужно запомнить золотую истину: нет проблем, нет жалоб – нет заболевания. Лямблии – это существа, которые в норме не вызывают патологических проявлений у человека. Но если организм ослабевает и резко начинают размножаться эти лямблии, возникает заболевание. А так наличие самих по себе лямблий в кишечнике или в желудочном соке, в желчи не является признаком заболевания. Если просто так проводить исследования, можно найти все что угодно.

— Почему просто так? Есть желание содрать деньги с родителей за лечение того, что в норме может быть у ребенка.

— А зачем ребенка тащить в частную клинику? Если у него есть проблема, жалобы – тогда да. Но если жалоб нет, то и нечего туда ходить!

— Хорошо, на какие жалобы стоит обратить внимание?

— При лямблиозе чаще всего болит справа в подреберье. Правда, до 3-хлетнего возраста ребенок не может четко объяснить, в каком месте у него болит. Если есть боли в животе, нужно идти к врачу. Лямблиоз как заболевание чаще всего проявляется у детей в возрасте до 7 лет. У взрослых организм сам с ними борется успешно.

Современные препараты достаточно принимать один раз

— Как бороться с паразитами, если их нашли у ребенка?

— Осенью и весной наблюдается обострение различных заболеваний, в том числе и глистных. Я бы рекомендовал для профилактики всей семье, в том числе и животным, которые есть в семье, принимать профилактические противоглистные препараты (декарис, вермокс, пирантел). Современные лекарства принимаются однократно. Иногда при необходимости двукратно через три дня – и на этом лечение и профилактика заканчивается. Принимать раз в полгода всем членам семьи.

— Эти препараты не токсичны? Не вредны детям?

— В противоглистные препараты чаще всего входит одно-единственное вещество — пиперазин. Он содержится в тыквенных семечках. Поэтому в деревнях, где грызут тыквенные семечки, с глистами проблем меньше. Эти препараты можно принимать для профилактики, ничего страшного не будет. Кроме того, эти же препараты являются иммуномодуляторами — они одновременно улучшат иммунитет.

Лямблиоз (лямблиоз) — Симптомы и причины

Обзор

Лямблиозная инфекция — это кишечная инфекция, характеризующаяся спазмами желудка, вздутием живота, тошнотой и приступами водянистой диареи. Инфекция Giardia вызывается микроскопическим паразитом, который встречается во всем мире, особенно в районах с плохой санитарией и небезопасной водой.

Лямблиоз (лямблиоз) — одна из наиболее частых причин заболеваний, передающихся через воду в Соединенных Штатах.Паразиты обитают в отдаленных ручьях и озерах, а также в общественных системах водоснабжения, плавательных бассейнах, гидромассажных ваннах и колодцах. Инфекция лямблий может передаваться через пищу и при личном контакте.

Инфекции лямблий обычно проходят в течение нескольких недель. Но проблемы с кишечником могут возникнуть еще долго после того, как паразиты исчезнут. Некоторые препараты обычно эффективны против паразитов лямблии, но не все на них реагируют. Профилактика — ваша лучшая защита.

Продукты и услуги

Показать больше продуктов от Mayo Clinic

Симптомы

У некоторых людей с лямблиозом никогда не появляются признаки или симптомы, но они все еще переносят паразит и могут передать его другим через стул.У тех, кто действительно заболел, признаки и симптомы обычно появляются через одну-три недели после заражения и могут включать:

  • Водянистый понос, иногда с неприятным запахом, который может чередоваться с мягким жирным стулом
  • Усталость
  • Спазмы и вздутие живота
  • Газ
  • Тошнота
  • Похудание

Признаки и симптомы инфекции лямблии могут длиться от двух до шести недель, но у некоторых людей они сохраняются дольше или рецидивируют.

Когда обращаться к врачу

Позвоните своему врачу, если у вас жидкий стул, спазмы желудка и вздутие живота, а также тошнота, которая длится более недели, или если у вас наступило обезвоживание. Обязательно сообщите своему врачу, если вы подвержены риску заражения лямблиозом — то есть у вас есть ребенок, который находится в учреждении по уходу за ребенком, вы недавно ездили в район, где инфекция распространена, или вы глотали воду из озера. или поток.

Причины

Лямблии-паразиты обитают в кишечнике людей и животных.Прежде чем микроскопические паразиты попадают со стулом, они заключаются в твердые оболочки, называемые цистами, что позволяет им выживать за пределами кишечника в течение нескольких месяцев. Попав внутрь хозяина, цисты растворяются, и паразиты высвобождаются.

Заражение происходит при случайном проглатывании цисты паразита. Это может произойти при проглатывании небезопасной воды, употреблении инфицированной пищи или при личном контакте.

Проглатывание зараженной воды

Самый распространенный способ заражения лямблиозом — проглатывание небезопасной (зараженной) воды.Паразиты лямблии встречаются в озерах, прудах, реках и ручьях по всему миру, а также в общественных водопроводах, колодцах, цистернах, плавательных бассейнах, аквапарках и курортах. Грунтовые и поверхностные воды могут инфицироваться лямблиями из сельскохозяйственных стоков, сточных вод или фекалий животных. Дети в подгузниках и люди с диареей могут случайно заразить бассейны и спа.

Употребление в пищу зараженных пищевых продуктов

Паразиты лямблии могут передаваться через пищу — либо потому, что работники пищевых продуктов, инфицированные лямблиозом, не моют тщательно руки, либо потому, что сырые продукты орошаются или промываются небезопасной (зараженной) водой.Поскольку приготовление пищи убивает лямблии, пища является менее распространенным источником инфекции, чем вода, особенно в промышленно развитых странах.

Контакт между людьми

Вы можете заразиться лямблиозом, если ваши руки испачкаются фекалиями — родители, меняющие подгузники, особенно подвержены риску. То же самое и с работниками по уходу за детьми и детьми в детских учреждениях, где вспышки болезни становятся все более частыми. Паразиты лямблии также могут передаваться при анальном сексе.

Факторы риска

Паразиты лямблий — очень распространенные кишечные паразиты. Хотя паразитами лямблии может заразиться кто угодно, некоторые люди особенно подвержены риску:

  • Детский. Лямблии гораздо чаще встречаются у детей, чем у взрослых. Дети чаще контактируют с фекалиями, особенно если они носят подгузники, приучены к туалету или проводят время в детском саду. Люди, которые живут или работают с маленькими детьми, также подвержены более высокому риску развития инфекции лямблии.
  • Люди, не имеющие доступа к чистой питьевой воде. Инфекция лямблий широко распространена там, где неадекватны санитария или вода небезопасна для питья. Вы подвергаетесь риску, если путешествуете по местам, где распространена лямблиозная инфекция, особенно если вы не заботитесь о том, что вы едите и пьете. Риск наиболее высок в сельской местности или в дикой природе.
  • Мужчины, практикующие секс с мужчинами. Мужчины, вступающие в половые отношения с другими мужчинами без использования презерватива, подвергаются повышенному риску заражения лямблиозом, а также инфекций, передаваемых половым путем.

Осложнения

Лямблии почти никогда не заканчиваются смертельным исходом в промышленно развитых странах. Но это может вызвать затяжные симптомы и серьезные осложнения, особенно у младенцев и детей. К наиболее частым осложнениям относятся:

  • Обезвоживание. Часто в результате сильной диареи обезвоживание возникает, когда организму не хватает воды для выполнения своих обычных функций.
  • Неспособность развиваться. Хроническая диарея, вызванная лямблиозом, может привести к недоеданию и нанести вред физическому и умственному развитию детей.
  • Непереносимость лактозы. У многих людей с инфекцией лямблиоза развивается непереносимость лактозы — неспособность правильно переваривать молочный сахар. Проблема может сохраняться еще долго после того, как инфекция исчезнет.

Профилактика

Никакие лекарства или вакцины не могут предотвратить заражение лямблиозом. Но разумные меры предосторожности могут иметь большое значение для снижения шансов, что вы заразитесь или передадите инфекцию другим.

  • Вымойте руки. Это самый простой и лучший способ предотвратить большинство видов инфекций. Мойте руки водой с мылом в течение не менее 20 секунд после посещения туалета или смены подгузников, а также перед едой или приготовлением пищи. Когда мыло и вода недоступны, вы можете использовать дезинфицирующие средства на спиртовой основе. Однако дезинфицирующие средства на спиртовой основе неэффективны в уничтожении цистовой формы лямблии, которая выживает в окружающей среде.
  • Очистить воду из дикой природы. Избегайте пить неочищенную воду из неглубоких колодцев, озер, рек, источников, прудов и ручьев, если вы не отфильтруете ее или не кипятили в течение не менее 10 минут при 158 F (70 C).
  • Моющие средства. Вымойте сырые фрукты и овощи чистой чистой водой. Перед употреблением очистите плод. Не ешьте сырые фрукты или овощи, путешествуя по странам, где они могут контактировать с небезопасной водой.
  • Держите рот закрытым. Старайтесь не глотать воду при купании в бассейнах, озерах или ручьях.
  • Используйте воду в бутылках . Путешествуя в те части мира, где водоснабжение может быть небезопасным, пейте и чистите зубы бутилированной водой, которую вы открываете сами.Не используйте лед.
  • Практикуйте более безопасный секс. Если вы занимаетесь анальным сексом, используйте презерватив каждый раз. Избегайте орально-анального секса, если вы полностью не защищены.

17 ноября 2020 г.

Лямблиоз (инфекция лямблиозом): симптомы, причины, лечение

Что такое лямблиоз?

Лямблиоз, также известный как инфекция лямблиоза, представляет собой кишечное заболевание, характеризующееся диареей, спазмами, тошнотой и вздутием живота.Инфекцию вызывает крошечный паразит под названием Giardia Кишечник . Этот жук обитает по всему миру в местах, где нет чистой питьевой воды. Это частая причина заболеваний, передающихся через воду в США.

Симптомы лямблиоза

Симптомы обычно появляются через 1-3 недели после заражения. Наверное, хватит на 2-6 недель. К наиболее частым относятся:

  • Диарея
  • Газ или метеоризм
  • Жирный стул, который плавает
  • Спазмы желудка или брюшной полости
  • Расстройство желудка или тошнота
  • Обезвоживание
  • Потеря веса

Когда мне следует вызвать врача?

Если у вас есть какие-либо из этих симптомов более недели, позвоните своему врачу, чтобы узнать, нужно ли вам пройти обследование на лямблиоз.Инфекция лямблиоза может вылечиться сама по себе, но вам может потребоваться лечение.

Причины лямблиоза

Обычно инфекция лямблиозом возникает из стула инфицированного человека или животного. Перед тем, как испариться, паразиты вырастают твердую оболочку, называемую цистой. Это помогает им месяцами жить вне тела, в воде или на поверхности. Инфекция возникает после контакта с паразитом или кистой. Вы можете:

  • Вступить в тесный контакт с больным лямблиозом
  • Прикоснуться к загрязненным поверхностям, таким как ручки для ванной, пеленальные столики, ведра для пеленок или игрушки, а затем поесть, не мыть рук
  • Пейте воду или используйте лед, приготовленный из необработанного источник воды, например озеро, ручей или колодец, где обитают лямблии
  • Проглотите паразита во время плавания или игры в воде
  • Ешьте сырую пищу, содержащую лямблии
  • Путешествуйте в страны, где это распространено

Лямблиоз Факторы риска

Хотя лямблиозом может заразиться кто угодно, некоторые люди с большей вероятностью вступят в контакт с паразитом:

  • Родители и работники по уходу за детьми, меняющие подгузники
  • Дети в детских учреждениях
  • Люди, живущие в одном домохозяйстве как человек с лямблиозом
  • Те, кто пьет воду или использует лед, сделанный из неочищенной воды
  • Путешественники, туристы и туристы, которые d каток небезопасной воды или тех, кто не соблюдает правила гигиены (например, мыть руки) на тропе
  • Международные путешественники
  • Люди, занимающиеся анальным сексом

Диагноз лямблиоза

Чтобы узнать, есть ли у вас лямблиоз, вам необходимо: дайте врачу образец стула.Они отправят его в лабораторию для тестирования. Для достижения наилучших результатов вам может потребоваться сдать образцы на тестирование в течение нескольких дней.

Если у вас лямблиоз, вам нужно будет снова проверить стул, чтобы увидеть, исчезли ли паразиты.

Лечение лямблиоза

Многие люди поправляются без лечения. Но ваш врач может назначить вам лечение. Метронидазол (Flagyl), нитазоксанид (Alinia) и тинидазол (Tindamax) входят в число препаратов, используемых для лечения инфекций лямблии.

Осложнения лямблиоза

Лямблиоз может вызывать проблемы даже после того, как инфекция прошла. Они могут быть особенно серьезными у младенцев и детей.

  • Обезвоживание. Это когда вашему организму не хватает воды для нормальной работы. Часто это результат сильной диареи.
  • Неспособность развиваться. Длительная диарея может повлиять на умственное и физическое развитие ребенка.
  • Непереносимость лактозы. Многие люди, страдающие лямблиозом, обнаруживают, что не могут переваривать молочный сахар (лактозу) так, как раньше.Это может затруднить употребление молока, сыра и других молочных продуктов.

Профилактика лямблиоза

Вакцины для его предотвращения не существует, но есть шаги, которые вы можете предпринять:

  • Мойте руки после туалета, после смены подгузников и перед едой или приготовлением пищи.
  • Отфильтруйте или вскипятите воду, если вы находитесь на улице.
  • Старайтесь не глотать воду, когда плаваете в бассейне, озере или ручье.
  • Пейте воду в бутылках, когда вы путешествуете по местам с небезопасной водой.И не используйте кубики льда.
  • Используйте презерватив при анальном сексе.

Лямблии, дегельминтизация и WASH: комплексная картина

Новые данные показали, что Giardia инфекций оставались распространенными среди населения с низким уровнем дохода на протяжении регулярной программы дегельминтизации для борьбы с кишечными глистами. Полученные данные также проливают свет на сложности, связанные с улучшением системы водоснабжения, санитарии и гигиены с целью сокращения паразитарных заболеваний.

Наоми Кларк

Сканирующая электронная микрофотография (SEM) культуры Giardia lamblia in vitro. (Изображение CDC / доктора Стэна Эрландсена из библиотеки изображений общественного здравоохранения)

Лямблиоз и кишечные глисты: две забытые тропические болезни

Лямблиоз, вызываемый паразитом Giardia duodenalis (также известный как Giardia Кишечник или Giardia lamblia ), был связан с недоеданием и плохим ростом у маленьких детей.Это инфекционное заболевание, которое может вызывать острые или хронические желудочно-кишечные симптомы. Гельминты, передающиеся через почву, также известные как кишечные черви, также могут способствовать нарушению роста и развития у детей. И лямблиоз, и геминты, передаваемые через почву, поражают сотни миллионов людей во всем мире. И то и другое можно считать «забытыми тропическими болезнями», которые по своей природе непропорционально поражают людей, живущих в бедных условиях, способствуя и сохраняя цикл бедности.

Сложности в управлении

Инфекции, вызываемые кишечными глистами, обычно контролируются с помощью крупномасштабных программ дегельминтизации, в рамках которых препараты для дегельминтизации доставляются группам населения, подвергающимся риску, в районах, где болезнь носит эндемический характер. Интересно, что лекарства, поставляемые в рамках этих программ дегельминтизации, могут использоваться в более высоких дозах для лечения инфекций, вызванных Giardia . Однако ранее было очень мало известно о том, что происходит с Giardia инфекциями в контексте регулярной повторной дегельминтизации.

Новые результаты, недавно опубликованные в журнале Parasites & Vectors , показали, что в общинах в сельских районах Тимора-Лешти распространенность инфекций Giardia не изменилась в течение 2 лет программы дегельминтизации в масштабах общины, что позволяет предположить, что и лекарства не действуют. эффективен против Giardia в дозах, используемых при дегельминтизации, или повторное заражение Giardia происходило очень быстро после лечения.

Иллюстрация жизненного цикла лямблии лямблии (кишечник), возбудителя лямблиоза.(Изображение CDC / Александра Дж. Да Силва, доктора философии / Мелани Мозер, из библиотеки изображений общественного здравоохранения)

А как насчет WASH?

Вода, санитария и гигиена (WASH) имеют решающее значение для передачи как Giardia , так и кишечных червей, поскольку оба они передаются через контакт с человеческими фекалиями. Однако сокращение инфекций с помощью вмешательств WASH в сообществах с низкими доходами оказалось сложной задачей.

Действительно, результаты этого нового исследования показали, что Giardia, инфекций оставались высокими, несмотря на вмешательство WASH на уровне общины, вероятно, в результате продолжающейся «открытой дефекации» (дефекация на открытом воздухе в открытой среде), несмотря на вмешательство.Ключевыми факторами, способствующими передаче инфекции в исследуемой популяции, были контакт с маленькими детьми, переполненность домохозяйств, сезонность (инфекции чаще встречались в сезон дождей) и сочетанные инфекции гельминтами, при этом анкилостомоз защищал от инфекции Giardia .

Куда отсюда?

Эти новые результаты подчеркивают, что Giardia является важным паразитом, который следует учитывать в контексте широкомасштабных программ дегельминтизации в регионах с низким уровнем дохода.Такие программы могут дать медицинским работникам возможность рассказать местным сообществам о Giardia , о том, как они передаются и как обращаться за лечением. Необходимы дополнительные исследования для дальнейшего изучения взаимосвязи между Giardia и инфекциями кишечных глистов, а также влияния регулярной дегельминтизации на инфекции Giardia .

В секторе WASH также необходимы постоянные усилия по разработке новаторских, устойчивых, адаптированных к местным условиям подходов к улучшению условий WASH как средства сокращения паразитарных заболеваний.Опираясь на существующие знания и текущие исследования, ориентированные на сообщества, можно адаптировать меры борьбы с ними, чтобы получить максимальную пользу для сотен миллионов людей, инфицированных этими забытыми тропическими болезнями.

Симптомы, диагностика, лечение и многое другое

Лямблиоз, или бобровая лихорадка, представляет собой паразитарную инфекцию пищеварительной системы. Симптомы включают сильный дискомфорт в животе и диарею, но у некоторых людей симптомы отсутствуют.

Паразит, вызывающий его, представляет собой микроскопический одноклеточный организм под названием Giardia lamblia .

По данным Центров по контролю и профилактике заболеваний (CDC), лямблиоз является наиболее распространенным кишечным паразитарным заболеванием в США.

В 2012 году люди сообщили о 15 223 случаях заболевания в США.

Лямблиоз встречается во всем мире, но чаще встречается в районах с плохой санитарией. В развивающихся странах он может затронуть от 20 до 30 процентов населения одновременно. Кое-где им страдает 100 процентов населения.

Не у всех больных лямблиозом есть симптомы, но они могут распространять болезнь.

Симптомы могут появиться через 1–3 недели после заражения.

Они могут включать:

Стул обычно со временем становится жирным, но не содержит крови.

Диарея может привести к обезвоживанию. Если потеря воды серьезная, она может стать серьезной, особенно у младенцев. Важно употреблять много жидкости, желательно воды.

Симптомы обычно проходят в течение 2–6 недель, но это может занять больше времени. Лекарства могут ускорить выздоровление.

Есть два типа Лямблии .

Активная форма присутствует в кишечнике инфицированного человека или животного.

Неактивная форма цисты может оставаться бездействующей в окружающей среде в течение нескольких месяцев.

Паразиты могут покинуть тело своего хозяина при дефекации человека или животного.

Снаружи они образуют твердую защитную оболочку и превращаются в кисту Giardia . Киста может жить в окружающей среде несколько месяцев.

Порыв ветра может поднять цисты зараженного навоза на сельскохозяйственных угодьях и унести их в любом направлении.

Инфекция обычно распространяется, когда люди пьют воду, контактировавшую с инфицированными фекалиями, особенно в странах с плохой санитарией.

Передача может происходить следующими способами:

  • прикосновение ко рту после прикосновения к поверхностям, на которых присутствуют паразиты G iardia
  • через источники воды, например, употребление неправильно обработанной воды или льда, плавание или употребление промытой пищи в загрязненной воде или выращены в месте, где присутствуют лямблии
  • из-за плохого мытья рук после посещения туалета или при работе с пищевыми продуктами
  • прикосновением к анусу больного
  • при уходе за больным инфекцией

Младенец с лямблиозом в подгузниках в бассейне может загрязнить воду.Любой, кто там плавает, рискует заразиться.

В США лямблиоз чаще встречается летом, возможно, потому, что люди проводят больше времени, занимаясь активным отдыхом и путешествуя по дикой природе.

Люди могут заразиться им во время путешествий, но не замечают симптомов, пока не вернутся домой.

Существует небольшой риск заражения лямблиозом от домашнего животного, но животные обычно имеют другой вид, который не влияет на человека.

Поделиться на Pinterest Лямблиоз возникает, когда паразит вызывает проблемы с кишечником, особенно во время путешествий.

Врач возьмет образец стула и отправит его в лабораторию для проверки цист лямблий .

Иногда они просят несколько образцов, потому что человек не изгоняет кисты каждый раз, когда посещает туалет.

Если результаты не показывают лямблиоз, но у человека есть симптомы, которые могут указывать на лямблиоз, врач может провести дополнительные анализы.

Это может включать эндоскопию и, возможно, биопсию тонкой кишки.

Метронидазол (Флагил) — препарат, эффективный для лечения лямблиоза.Врач назначит препарат и посоветует дозировку.

Побочные эффекты редки, но они могут включать:

  • судороги
  • спутанность сознания
  • галлюцинации
  • сыпь
  • тошнота
  • темная или мутная моча
  • рвота
  • сонливость

Метронидазол может влиять на дегидрогеназу алкоголя. фермент, расщепляющий алкоголь. По этой причине человеку следует избегать употребления алкоголя во время лечения.

Другие возможные лекарства

Другие варианты включают:

  • Тинидазол (Fasigyn)
  • Нитазоксанид (Алиния)

Без лечения лямблии могут перейти в хроническую форму, но это случается редко.Это может длиться годами с повторяющимися приступами диареи, авитаминоза и усталостью.

Человек, который выздоравливает без лечения, может продолжать избавляться от паразита, хотя это не всегда происходит. Это зависит от защитного иммунитета человека.

Согласно обзору, опубликованному в 2013 году, лямблиоз у детей может приводить к недоеданию и связанным с этим состояниям, таким как проблемы с ростом и когнитивным развитием.

К другим осложнениям относятся:

  • долгосрочные неспецифические желудочно-кишечные проблемы
  • хроническая усталость

Исследования также показали, что это может привести к более высокому риску:

  • проблем с глазами
  • мышечных осложнений
  • симптомов аллергии, таких как крапивница

Некоторые отчеты связывают развитие рака to Giardia , но для подтверждения этого необходимы дополнительные исследования.

Поделиться на PinterestСваривайте или очищайте питьевую воду из колодца или другого неочищенного источника.

Лямблиоз широко распространен в Африке к югу от Сахары, Южной и Юго-Восточной Азии, Центральной Америке, западных частях Южной Америки, России, Турции, Румынии и Болгарии.

Статистика показывает, что около 200 миллионов человек в Африке, Азии и Латинской Америке имеют лямблии с симптомами, а многие другие не знают, что у них они есть, потому что у них нет никаких симптомов.

По этим причинам путешественникам важно знать о признаках лямблиоза и принимать определенные меры предосторожности:

Мытье рук : Мойте руки после посещения туалета или смены подгузника, а также перед едой или обращением с едой. .

Питьевая вода : берегитесь воды в реках и озерах. Во время кемпинга люди должны брать с собой собственный водопровод или какие-либо средства для его кипячения или очистки.

Продукты питания : Избегайте употребления сырых продуктов и продуктов, промытых водой, которые могут быть заражены.

Чистка зубов : используйте очищенную воду.

Лямблиоз — распространенное паразитарное заболевание, поражающее кишечник. Хотя это заболевание чаще всего встречается в странах с плохой санитарией, оно также затрагивает жителей США.S.

Врач может предоставить лекарства для лечения инфекции.

Люди должны использовать очищенную, кипяченую или очищенную воду для питья и мытья пищи, особенно во время кемпинга или посещения стран, где Giardia являются обычным явлением.

Хорошая практика мытья рук может снизить риск.

Q:

Я скоро собираюсь в двухмесячный поход в Южную Америку. Некоторые из моих друзей посоветовали мне взять с собой Флагила на всякий случай.Следует ли мне попросить врача дать мне немного?

A:

Врачи обычно не назначают Flagyl при инфекции Giardia , потому что у большинства людей симптомы отсутствуют. Польза бессимптомного лечения лямблиоза неясна, и большинство людей, у которых развиваются симптомы, быстро выздоравливают.

Соблюдение вышеуказанных мер предосторожности при обращении с пищей и водой может предотвратить заражение этим паразитом.

Daniel Murrell, MD Ответы отражают мнение наших медицинских экспертов.Весь контент носит исключительно информационный характер и не может рассматриваться как медицинский совет.

Лечение лямблиоза

При оценке клинической эффективности препаратов, используемых против Giardia , трудно сравнивать исследования. Они различаются по методологии включения (была ли проведена рандомизация и было ли лечение слепым или открытым), изученной популяции (дети, взрослые, пациенты с симптомами и / или бессимптомно), критериям исхода (клиническая эффективность и / или отрицательный стул) и продолжительности лечения. следовать за.Тем не менее, можно сделать выводы из исследований, если рассматривать их в целом, и сделать выводы об относительной эффективности агентов.

Классы агентов и клинические свойства

Нитроимидазолы.

Класс нитроимидазолов, используемых для лечения инфекции, вызванной G. lamblia , включает метронидазол, тинидазол, орнидазол и секнидазол. Этот класс был открыт в 1955 году и оказался очень эффективным против нескольких простейших инфекций 240.Метронидазол [1- (β-гидроксиэтил) -2-метил-5-нитроимидазол; Flagyl] был признан терапевтическим против Trichomonas vaginalis и Entamoeba histolytica после его открытия в конце 1950-х годов 67, а в 1962 году Darbon et al. сообщили, что его можно использовать для лечения лямблиоза 57. С момента этого открытия метронидазол и другие нитроимидазолы использовались клиницистами в качестве основы терапии лямблиоза.

Из нитроимидазолов наиболее тщательно изучен механизм уничтожения Giardia метронидазолом.Метронидазол использует анаэробные метаболические пути, присутствующие в Giardia . Лекарство попадает в трофозоит, и как только он попадает в клетку, ферредоксины белка переноса электронов от паразита отдают электроны нитрогруппе лекарства 223, 238, 244. Лекарство становится «активированным» за счет восстановления этой нитрогруппы 223, 238, 240, и с помощью этой реакции восстановления устанавливается градиент, благоприятствующий внутриклеточному транспорту метронидазола. Восстановленный метронидазол служит концевым акцептором электронов, который ковалентно связывается с макромолекулами ДНК 72, 177.Это приводит к повреждению ДНК в виде потери спиральной структуры, нарушения функции матрицы и разрыва цепи с последующей гибелью трофозоитов 95. Помимо этого эффекта, метронидазол ингибирует дыхание трофозоитов 81, 189. Восстановительная активация метронидазола также может приводить к к токсическим радикалам, которые вступают в реакцию с основными клеточными компонентами 244. Трофозоиты в кистах могут быть менее подвержены действию нитроимидазолов, возможно, из-за плохого проникновения лекарственного средства через стенку кисты 236.Резистентность к метронидазолу была индуцирована in vitro 29. Это коррелирует со снижением активности паразита пирувата: ферредоксин оксидоредуктазы, которая необходима для восстановительной активации нитроимидазолов 239, 247.

Метронидазол быстро и полностью абсорбируется после перорального приема и проникает в ткани организма и секреции, такие как слюна, грудное молоко, сперма и вагинальные выделения 240. Препарат метаболизируется в основном в печени и выводится с мочой 147.

Тесты на чувствительность к нитроимидазолу in vitro были выполнены с G.lamblia с 1980 г. 112. Используя микроскопическую оценку морфологии и подвижности паразита, Jokipii и Jokipii впервые продемонстрировали эффективность метронидазола и тинидазола 129. Впоследствии морфология 13, 166, 175, ингибирование роста 56, 69, 94, 116, 160, 225 Использовались анализы включения [ 3 H] тимидина 32, 117, 164, уничтожения сыворотки 114, исключения витального красителя 114, 235, ингибирования приверженности 21, 55, 79, 166, 192, метаболического 228 и колориметрического 133. для измерения реакции препарата на многие терапевтические агенты in vitro.Однако, как показывает разнообразие используемых анализов, не существует стандарта для тестирования in vitro, что затрудняет сравнение результатов и применение результатов in vitro в клинических условиях.

Из нитроимидазолов тинидазол и метронидазол неизменно демонстрируют наибольшую активность in vitro; Тинидазол обладает небольшим преимуществом 30, 32, 55, 101. Более высокозамещенные нитроимидазолы, такие как миконазол, клотримазол, итраконазол и кетоконазол, были разработаны из-за их противогрибковой активности и не являются эффективными средствами против G.lamblia 55. Чувствительность к нитроимидазолам может варьироваться в зависимости от запасов и клонов G. lamblia , использованных в тестировании 29, 31, 79, 160.

В США метронидазол является единственным представителем класса нитроимидазолов, доступным для лечить лямблиоз; это также наиболее распространенный препарат, используемый для лечения во всем мире. Несмотря на его широко распространенное и приемлемое использование против Giardia , Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США никогда не одобряло его для этого показания. В клинических испытаниях использовались дозы два и три раза в день (обычно 250 мг / доза) в течение 5-10 дней и краткий курс (1-3 дня), ежедневная однократная терапия (2.0 или 2,4 г / доза) 261. При 5-10-дневных схемах эффективность колеблется от 60 до 100% у взрослых и детей, со средней эффективностью в обеих группах 92% (таблица) 20, 49, 68 , 91, 92, 100, 127, 132, 135, 150, 151, 191, 201, 202, 232, 256. В целом, этот режим хорошо переносится, с большинством побочных эффектов, включая желудочно-кишечные расстройства и металлический привкус (таблица).

ТАБЛИЦА 1

Эффективность препаратов против Giardia при инфекциях у взрослых и детей a

2,0 г –100
Препарат Доза b Средний диапазон эффективности (%) 733% )
Метронидазол 500–750 мг / день × 5–10 дней 88 60–95
2.0–2,4 г, разовая доза 48 36–60
2,0–2,4 г, q.d. × 2 дня 71 67–80
2,0–2,4 г, раз в сутки. × 3 дня 93–100
15–22,5 мг / кг / день × 5–10 дней d 94 80–100
Тинидазол день × 7 дней 87 74–100
1.0–2,0 г, разовая доза 92 86–100
50 мг / кг, разовая доза d 91 80–96
Орнидазол 1,0 , однократная доза 96–100
40–50 мг / кг, однократная доза d 92–100
Секнидазол однократная доза 86–100
30 мг / кг, 1 или 2 дозы d 88–100
Хинакрин 300 мг / день × 5–7 дней
6–8 мг / кг / день × 5–10 дней d 92–95
Фуразолидон 400 мг / день × 7-10 дней 80–85
8 мг / кг / день × 7–10 дней d 92 81–96
Альбендазол 200–800 мг / день × 1–3 дня 24–81
400 мг / день × 5–7 дней 94–100
Паромомицин 10–50 мг / кг / день или 1500 мг / день × 5–10 дней 55–88
Бацитрацин цинк 240,000 ЕД / день × 10 дней 95

ТАБЛИЦА 2

Рекомендуемая дозировка и побочные эффекты анти- Лямблиоз препаратов

9055 панкреат, центральная нервная система системная токсичность, обратимая нейтропения, периферическая нейтропатия, выравнивание зубца Т при длительном применении разовая доза 9057 токсический д
Лекарственное средство f Детская доза Побочные эффекты
Метронидазол a 250 мг t.я бы. × 5–7 дней 5 мг / кг три раза в день × 5–7 дней Головная боль, головокружение, тошнота, металлический привкус, крапивница
Дисульфирамоподобная реакция при приеме алкоголя
Мутагенный / канцерогенный?
Тинидазол b 2 г, разовая доза 50 мг / кг, разовая доза (макс., 2 г) То же, что и метронидазол
Орнидазол c 40–50 мг / кг, разовая доза (макс., 2 г) То же, что и метронидазол
Хинакрин c 100 мг t.я бы. × 5–7 дней 2 мг / кг три раза в день × 7 дней Тошнота и рвота, головокружение, головная боль
Изменение цвета кожи и слизистых оболочек на желтый / оранжевый
100 мг 4 раза в день × 7–10 дней 2 мг / кг четыре раза в день × 10 дней Тошнота, рвота, диарея
Коричневое изменение цвета мочи; дисульфирамоподобная реакция при приеме алкоголя
Неблагоприятно реагирует с ингибиторами МАО
Легкий гемолиз при дефиците G6PDH 9057 9057 9057 9057 9057
Паромомицин a 500 мг т.я бы. × 5–10 дней 30 мг / кг / день в 3 приема × 5–10 дней Ототоксичность и нефротоксичность при системном введении
Альбендазол a 400 мг четыре раза в день. × 5 дней 15 мг / кг / день × 5-7 дней (макс., 400 мг) Анорексия, запор
Редко: обратимая нейтропения и повышенные функциональные пробы печени
Тератогенный?
Бацитрацин цинк e 120 000 U b.я бы. × 10 дней Не тестировалось у детей младше 10 лет Тошнота, рвота, дискомфорт в животе
Нефротоксичность при системной абсорбции

Однократный курс высокая доза, вводимая ежедневно), были разработаны для улучшения соблюдения без ущерба для эффективности. Их применяли как у взрослых, так и у детей. Эти схемы обычно менее эффективны, особенно если вводится только одна доза метронидазола.Эффективность однократной терапии колеблется от 36 до 60% при приеме препарата в течение 1 дня 16, 93, 127, 130, 220, 229 и повышается до 67-80% при приеме препарата в течение 2 дней (таблица). 127, 130, 146; Грин, Д. М. Линч, Дж. А. Макфадзин и И. М. Пью, Letter, Br. Med. J. 2: 411–412, 1974). Продолжение лечения одной дозой в течение 3 дней увеличивает эффективность до диапазона, наблюдаемого при более низких дозах и более длительных курсах лечения 229; Грин и др., Письмо). Режимы с высокими дозами также могут иметь больше побочных эффектов 127.

Дети были включены во многие испытания как длительного, так и краткосрочного курса терапии, с результатами, аналогичными таковым у взрослых, и с эффективностью от 80 до 100% (медиана, 94%) при 5-10-дневных схемах 91 , 100, 132, 135, 186, 201, 232; A. Rastegar-Lari, A. Salek-Moghaddam, Letter, J. Trop. Педиатр. 42: 184–185, 1996). Хотя метронидазол не выпускается в стандартной жидкой форме, суспензию можно приготовить путем тщательного измельчения таблеток метронидазола с использованием капли глицерина в качестве смазки и суспендирования смеси в вишневом сиропе NF 150.

Наиболее частые побочные эффекты лечения метронидазолом включают головную боль, головокружение, тошноту и металлический привкус во рту (таблица). Тошнота возникает у 5-15% пациентов, получающих стандартные многодневные курсы 135, 151. Кроме того, метронидазолу 147 приписывают панкреатит, токсическое воздействие на центральную нервную систему при высоких дозах 144, 212 и транзиторную обратимую нейтропению. Избегайте употребления алкоголя во время приема метронидазола. Ингибирование альдегиддегидрогеназы метронидазолом может вызвать сильную рвоту, приливы, головную боль и боль в желудочно-кишечном тракте после приема алкоголя.

Метронидазол является мутагенным для бактерий и канцерогенным для мышей и крыс в высоких дозах в течение длительного периода времени 34, 153, 240, 251. Однако мутагенность у людей никогда не была зарегистрирована, что позволяет предположить, что использование метронидазола в этом отношении безопасно 23, 78, 98, 212. Это может, однако, смягчить последствия коротких курсов высоких доз для детей.

Обнаружение терапевтической эффективности метронидазола побудило исследователей разработать и испытать другие производные нитроимидазола.Другие агенты, тинидазол, орнидазол и секнидазол, имеют более длительный период полувыведения, что делает их пригодными для терапии однократной суточной дозой 217. Одна доза тинидазола (Fasigyn) была успешно использована в 1971 году в группе шведских студентов, заболевших лямблиозом. во время визита в Россию 11. Эта однократная доза 2 г (или эквивалент для детей) неизменно доказала свою клиническую эффективность от 80 до 100% со средней эффективностью 92% (Таблица) 16, 126, 130, 131 , 146, 151, 193, 222, 229, 261; З. Фарид, Н.А. Эль Масри, В. Ф. Майнер и А. Хассан, Letter, Lancet II: 721, 1974; Т. Петтерссон, Письмо, Br. Med. J. 1: 395, 1975) и намного превосходит метронидазол при прямом сравнении схем однократного приема 93, 130, 229, 261. Также улучшается соблюдение этого режима дозирования. Рекомендуемая доза для педиатрической популяции обычно составляет 50 мг / кг для разовой дозы (таблица) 82, 193, 232, 256, и препарат доступен в жидкой суспензии.

Побочные эффекты тинидазола не так распространены, как метронидазол, но включают горький вкус, головокружение и желудочно-кишечные расстройства (таблица) 130, 131; Петтерссон, Письмо).Тинидазол недоступен в Соединенных Штатах, но медицинские работники рекомендуют некоторым путешественникам, особенно долгосрочным путешественникам или наземным путешественникам в Азии, приобрести препарат по прибытии в страну назначения и принять его в случае заражения лямблиозом 113.

Еще одно производное нитроимидазола, которое также недоступно в США, — это орнидазол. Было проведено меньше исследований с орнидазолом, но он имеет отличную эффективность при приеме в течение нескольких дней и эффективность, аналогичную тинидазолу (от 92 до 100%) при однократном приеме 19, 131, 145, 220, 232, 261.Однократная доза орнидазола (40 мг / кг) также давалась детям с очевидными преимуществами в отношении соблюдения режима лечения и стоимости 39, 186. В одном исследовании препарат вводился внутривенно и вызывал усиление побочных эффектов, из-за чего исследователи неохотно рекомендовали рутинное применение этого препарата у детей до завершения крупномасштабных исследований рецидивов, канцерогенности и побочных эффектов 39.

Секнидазол, производное 5-нитроимидазола длительного действия, применялся, но недоступен в США.Подобно тинидазолу и орнидазолу, секнидазол обычно назначают однократно. Наиболее распространенная схема — 2 г для взрослых и 30 мг / кг для детей 95. Клинические исследования демонстрируют эффективность более 85% при однократной дозе у взрослых 49; Р. Бакаи, Х. Куреши и С. Дж. Зубери; Письмо, Дж. Пак. Med. Доц. 45: 288, 1995), а у детей эта доза так же эффективна, как 7-10-дневный курс метронидазола 100; Растегар-Лари и Салек-Могхаддам, Письмо). Препарат быстро и полностью абсорбируется, имеет период полувыведения от 17 до 29 часов и метаболизируется путем окисления в печени 95.Сообщалось о побочных эффектах, в первую очередь желудочно-кишечных расстройствах (тошнота, анорексия и боль в животе) и головокружении, но обычно не требует отмены препарата.

Хинакрин.

Хинакрин (атабрин) был впервые представлен как противомалярийное средство в 1930 году, после работ Кикута, и стал предпочтительным противомалярийным средством для союзных войск во Второй мировой войне из-за его большей доступности и лучшей переносимости по сравнению с хинином 240. войны, вскоре он стал важным агентом против г.lamblia с клинической эффективностью 90% или более 20, 52, 105, 255. Однако, поскольку рынок США ограничивался лечением Giardia , использование хинакрина сократилось, и его производство в США было прекращено. в 1992 г., хотя он все еще может быть получен из альтернативных источников (таблица).

Противопротозойный механизм хинакрина полностью не выяснен. Препарат легко интеркалирует с ДНК G. lamblia , и считается, что именно это взаимодействие вызывает ингибирование синтеза нуклеиновых кислот 240.Различная относительная скорость захвата хинакрина между человеческими клетками и клетками G. lamblia может быть ответственной за избирательную токсичность лекарственного средства 236. In vitro хинакрин снижает жизнеспособность кист и скорость эксцистации 179, 189. Устойчивость была индуцирована in vitro и in vitro. В одном исследовании это коррелировало со снижением поглощения препарата 246. Хинакрин быстро всасывается из кишечного тракта и широко распределяется в тканях организма.

Хотя результаты различаются в зависимости от используемого теста на чувствительность in vitro, было показано, что метронидазол и фуразолидон несколько более эффективны, чем хинакрин 30, 32, 55, 94.Однако в других исследованиях эффективность хинакрина и метронидазола in vitro одинакова 21, 117, 164. Некоторые из этих различий могут быть связаны с большей вариабельностью чувствительности к хинакрину, чем к метронидазолу или фуразолидону между клонами Giardia 31.

Клинически хинакрин очень эффективен, и исследования показали, что его эффективность в течение 5-10 дней составляет около 95% (таблица) 20, 135, 220, 255. Некоторые исследователи считают этот препарат наиболее эффективным из всех анти- Лямблии терапевтические 256.Дозировка обычно составляет 100 мг трижды в день в течение 5-7 дней для взрослых и 6 мг / кг / день в три приема в течение 5-7 дней для детей (таблица) 150.

Побочные эффекты не позволили многим клиницистам использовать хинакрин. , особенно у детей (таблица). О горьком вкусе, наряду с рвотой, сообщалось почти у 28% участников исследования 20, 52, что привело к снижению эффективности у детей младше 5 лет 52, вероятно, из-за низкого соблюдения режима лечения. Изменение цвета кожи, склер и мочи на желтый / оранжевый наблюдается у 4–5% тех, кто принимает хинакрин, примерно через 1 неделю после начала лечения и может длиться до 4 месяцев после прекращения терапии.Другие распространенные побочные эффекты включают тошноту, рвоту, головную боль и головокружение 254. Психозы, вызванные лекарственными препаратами, встречаются редко, а эксфолиативный дерматит и ретинопатия, вызванная хинакрином, редки 82. Хинакрин может усугубить псориаз, а также глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (G6PDH). -дефицитные люди, это может вызвать гемолиз. Противопоказан при беременности из-за возможной связи с расщелиной позвоночника и агенезом почек. Канцерогенность этого вещества никогда не была доказана, хотя механизм его действия заключается в связывании с ДНК.

Фуразолидон.

Фуразолидон (фуроксон) — одно из тысяч нитрофурановых соединений, созданных с момента открытия этого класса в 1940-х годах 143. Он эффективен против многих бактерий, включая Klebsiella spp., Clostridium spp., Escherichia coli , Campylobacter spp. И Staphylococcus aureus . Еще в 1950-х годах фуразолидон использовался для лечения лямблиоза 253. Он одобрен для использования в Соединенных Штатах и ​​остается важным терапевтическим средством во всем мире.Из обычных терапевтических средств против Giardia он является единственным, доступным в жидкой суспензии в Соединенных Штатах; поэтому его использование было рекомендовано в педиатрической популяции 150.

Механизм действия фуразолидона против G. lamblia , как и многих противопаразитарных средств, полностью не объяснен. Препарат подвергается восстановительной активации в трофозоите G. lamblia , но, в отличие от метронидазола, восстановление возможно происходит через NADH оксидазу 38, 244.Его убивающий эффект коррелирует с токсичностью восстановленных продуктов, которые могут повредить важные клеточные компоненты, включая ДНК. Устойчивость к фуразолидону может коррелировать со снижением поступления лекарственного средства 246 или с повышенным уровнем тиоловых ферментов, которые могут защищать от токсических радикалов 249. Препарат легко всасывается через желудочно-кишечный тракт и быстро метаболизируется в тканях, что приводит к низким концентрациям. в сыворотке и моче 143.

В тестах на чувствительность in vitro фуразолидон сопоставим с метронидазолом и неизменно демонстрирует самую высокую активность нонимидазолов 32, 55, 101; он более активен, чем хинакрин 30.

Клинические исследования с использованием фуразолидона многочисленны и проводились с широким кругом субъектов, доз и графиков введения. Хотя его эффективность обычно считалась несколько ниже, чем у метронидазола и хинакрина, сообщалось о показателях излечения от 80 до 96% для 7-10-дневных курсов (таблица) 20, 52, 91, 151, 178, 191 , 201, 255. Когда препарат вводится всего 5 дней, его эффективность значительно снижается 151, 178. Он вводится в виде четырех доз в день как взрослым (100 мг на дозу), так и детям (1.5 мг / кг) (таблица). В педиатрической суспензии две столовые ложки заменяют таблетку 100 мг.

Около 10% пациентов сообщают о желудочно-кишечных симптомах, таких как тошнота, рвота и диарея (таблица) 150, 256. Другие побочные эффекты могут включать изменение цвета мочи на коричневый; гемолиз может происходить у пациентов с дефицитом G6PDH. Препарат обладает ингибирующим действием на моноаминоксидазу (МАО), и его нельзя назначать одновременно лицам, уже принимающим ингибиторы МАО. Были редкие сообщения о дисульфирамоподобных реакциях при приеме с алкоголем 164b.Сообщалось о маниакальном эпизоде, вызванном фуразолидоном, у пациента, инфицированного вирусом иммунодефицита человека 73. Фуразолидон также противопоказан младенцам в возрасте до 1 месяца, у которых может развиться гемолитическая анемия из-за их обычно нестабильного глутатиона. Наконец, препарат оказывает мутагенное действие на бактерии, и было продемонстрировано, что он вызывает опухоли молочной железы у крыс и опухоли легких у мышей при длительном применении в высоких дозах. Однако значение этого открытия для людей неизвестно и не изучено должным образом 143, 164b, 236.При лечении педиатрических пациентов преимущества минимальных побочных эффектов и доступности жидкой суспензии должны быть сопоставлены с необходимостью частого приема препарата в течение 10-дневного периода лечения.

Бензимидазолы.

Два члена терапевтического класса бензимидазолов, альбендазол (Albenza) и мебендазол (Vermox), использовались для лечения инфекции, вызванной G. lamblia 155. Клинические исследования и исследования эффективности in vitro дали разные результаты в отношении их эффективности.Однако сравнительно доброкачественный профиль побочных эффектов в сочетании с доказанной эффективностью против многих гельминтов делает их перспективными для лечения 208, 250.

Бензимидазолы оказывают токсическое действие на Giardia , частично связываясь с G. lamblia β. -тубулиновый цитоскелет 71, 175, 209. Это связывание вызывает как ингибирование полимеризации цитоскелета, так и нарушение захвата глюкозы 250. Хотя точный сайт связывания на цитоскелете не определен, предполагается, что взаимодействие сайтов бензимидазола и колхицина может играть роль 51, 166, 236.Бензимидазолы плохо всасываются из желудочно-кишечного тракта, хотя это может быть улучшено совместным употреблением жирной пищи. Системный эффект альбендазола обусловлен его первичным метаболитом, сульфоксидом альбендазола, который быстро образуется в печени после абсорбции 3. Выведение почками незначительно.

Тестирование чувствительности G. lamblia in vitro к бензимидазолам ограничено по сравнению с чувствительностью паразита к нитроимидазолам или хинакрину.Тем не менее, исследования демонстрируют значительный эффект in vitro 79, 175, 208, 209. Один отчет показал, что и альбендазол, и мебендазол были в 30-50 раз более активными, чем метронидазол, и в 4-40 раз более активными, чем хинакрин in vitro 71 Другой продемонстрировал, что способность альбендазола влиять на морфологию, приверженность и жизнеспособность трофозоитов была намного выше, чем у метронидазола или тинидазола 166. Однако их переменная клиническая эффективность демонстрирует несоответствие между тестированием in vitro и активностью in vivo.Устойчивость к альбендазолу может быть вызвана in vitro 154 и коррелирует с изменениями в цитоскелете паразита 243. Другие бензимидазолы, такие как нокодазол, оксфендазол, тиабендазол и фенбендазол, также продемонстрировали некоторую эффективность in vitro 236.

Клинические испытания были ограничены мебендазол с неоднозначными результатами. Холл и Нахар сообщили о равной лечебной эффективности альбендазола и метронидазола у детей при назначении альбендазола в течение 5 дней, но не при однократном или трехдневном приеме (таблица) 104.Снижение эффективности альбендазола при приеме в течение 3 дней или менее также было задокументировано Kollaritsch et al. у путешественников с лямблиозом 137, Pungpak et al. у детей и взрослых 198, а также Pengsaa et al. у детей 193. Повышение эффективности наблюдалось у других пациентов, когда препарат вводился в течение 5 дней 171, 207, 214 или 7 дней 198. Исключение из необходимости в более длительных курсах лечения было замечено в одном исследовании, в котором применялась однократная доза. 68. Комбинация альбендазол-метронидазол была на 100% эффективна у 20 пациентов с метронидазол-резистентным лямблиозом, у которых было неэффективно от трех до пяти курсов стандартной пероральной терапии метронидазолом 44.

Лечение мебендазолом привело к сильно различающимся клиническим результатам. Аль-Вайли сообщил об эффективности более 90% в двух исследованиях с участием детей 8, 9. Однако другие исследования как среди детей, так и среди взрослых не показали равного успеха, но вместо этого показали эффективность в 80% 211 и в 60% или менее 39, 92 , 132; Л. ди Мартино, А. Ночерино и М. Петтоэлло Мантовани, Письмо, Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 85: 557–558, 1991), а также неспособность снизить уровень распространенности Giardia , когда мебендазол использовался для массового лечения гельминтов 219.Из-за этого несоответствия наибольший интерес был сосредоточен на альбендазоле.

Дозировка для взрослых обычно составляет 400 мг в день в течение 5 дней для альбендазола и от 200 до 400 мг в день в течение 5-10 дней для мебендазола (таблица). Обычная доза для детей составляет 15 мг / кг в день в течение 5-7 дней. Оба препарата выпускаются в виде суспензии. Одним из преимуществ использования альбендазола у детей является его эффективность против многих гельминтов, что позволяет эффективно лечить несколько кишечных паразитов 207, 208. Еще одним преимуществом является его относительное отсутствие побочных эффектов.Однако при кратковременном применении он может вызвать желудочно-кишечные проблемы в виде анорексии и запоров. Длительное применение высоких доз альбендазола, например, при его применении при инфекциях личиночных цестод, вызвало обратимую нейтропению и повышение уровней печеночных ферментов 3, 155, 258. Альбендазол противопоказан при беременности из-за возможной тератогенности (категория беременности) C), но исследования на животных не показали увеличения канцерогенности.

Паромомицин.

Паромомицин (Хуматин), член семейства аминогликозидов, был впервые выделен в 1956 году.Он показан для лечения Entamoeba histolytica и Trichomonas и был предложен для лечения G. lamblia при резистентных инфекциях и во время беременности 113, 140. Паромомицин плохо всасывается из просвета кишечника; даже при пероральном приеме больших доз достигается лишь минимальная концентрация в крови и моче пациентов с нормальной функцией почек 140. Паромомицин ингибирует синтез белка G. lamblia , вмешиваясь в 50S и 30S рибосомные субъединицы (рРНК паразита имеет необычный размер и последовательность) и вызывая неправильное считывание кодонов мРНК 69.

Тест на чувствительность in vitro демонстрирует, что паромомицин обладает активностью против G. lamblia , но активность обычно ниже, чем у нитроимидазолов, хинакрина или фуразолидона 30, 101. Однако из-за плохой кишечной абсорбции он компенсирует его активность. низкая антипротозойная активность за счет достижения высоких уровней в кишечнике. На модели на крысах препарат показал эффективность 15.

Клинические исследования ограничены, а терапевтическая эффективность колеблется от 55 до почти 90% (таблица) 47, 63, 140, 191, 218.Обычная доза составляет 500 мг трижды в день в течение 10 дней для взрослых и от 25 до 30 мг / кг / день (разделенных на три приема) для детей (таблица).

Как и другие аминогликозиды, при системной абсорбции паромомицин может вызывать ототоксичность и нефротоксичность. Однако он может быть менее ототоксичным, чем другие аминогликозиды 142, и при ограниченной системной абсорбции токсичность не должна вызывать беспокойства у людей с нормальными почками. Однако его следует использовать с осторожностью при нарушениях функции почек.

Бацитрацин цинк.

Поиск альтернативных эффективных средств лечения Giardia побудил исследователей рассмотреть вопрос о бацитрацине. Бацитрацин был впервые выделен в 1945 году из штамма Bacillus и использовался системно против тяжелых стафилококковых инфекций до 1960 года, когда его токсичность и доступность других антибиотиков ограничили его в основном местным применением 141. Цинк был добавлен в комплекс бацитрацина для стимулирования стабильность. Бацитрацин оказывает свое действие на бактерии, препятствуя стадии дефосфорилирования в синтезе клеточной мембраны.После продемонстрированной in vitro эффективности против E. histolytica и Trichomonas , бацитрацин цинк был протестирован против Giardia in vitro и оказался активным 12,13.

Клиническое испытание Andrews et al. использовали дозировку дважды в день в течение 10 дней и сравнили эффективность 120 000 ЕД бацитрацина цинка, 120 000 Ед бацитрацина, 120 000 Ед неомицина и 60 000 Ед бацитрацина цинка в сочетании с 60 000 Ед неомицина 14. Показатели излечения 95% бацитрацин цинк, 88% для бацитрацина или комбинации бацитрацин цинк-неомицин и 86% для неомицина.Побочные эффекты были ограничены небольшим количеством пациентов, которые испытали диарею, дискомфорт в животе, запоры и тошноту. Дети младше 10 лет были исключены из исследования.

Недостатки использования бацитрацина цинка включают возможность нефротоксичности при длительном пероральном приеме и желудочно-кишечные расстройства. Кроме того, на комплаентность может повлиять 10-дневный период дозирования, а составы, используемые Эндрюсом в их исследовании, не всегда доступны. Хотя бацитрацин цинк является многообещающим, необходимы дополнительные исследования, прежде чем он сможет получить широкое признание в качестве агента против G.ламблия .

Новые и экспериментальные методы лечения.

Широкий спектр химиотерапевтических агентов, включая рифампин, битионол, дихлорофен, гексахлорофен, пириметамин, фузидат натрия, хлорохин и мефлохин, продемонстрировали in vitro активность против Giardia 81, 84, 233. Липофильные тетрациклины, такие как липофильные тетрациклины, такие как д. активен in vitro; однако их клиническая эффективность ограничена, возможно, из-за их быстрого всасывания из кишечника 70.Некоторые аналоги пентамидина, а также азитромицин обладают in vitro активностью, сравнимой с активностью метронидазола 25, 33.

Нитазоксанид, производное 5-нитротиазола с широким спектром активности против простейших, гельминтов и некоторых бактерий, показал ограниченную эффективность у взрослых. и дети в Мексике (эффективность 71% [213] и 78% [211] соответственно) и у нескольких пациентов со СПИДом в Мали 64. Его вводили в дозе от 100 до 500 мг два раза в день в течение 3-7 дней.

Исследования с использованием модели на крысах продемонстрировали эффективность ивермектина в определенных условиях 260.Дисульфирам, соединение с цинковыми пальцами, используемое для лечения алкоголизма у людей, демонстрирует значительную частоту излечения и снижение паразитарного бремени на мышиной модели лямблиоза 180.

В этноботаническом обзоре желудочно-кишечных средств против Giardia , используемых У племен луо в Восточной Африке метанольные экстракты 21 из 36 изученных таксонов были смертельными или ингибировали рост G. lamblia in vitro 124. Экстракты Geranium nivem также показали активность in vitro 45.Иммуномодулирующее лекарственное средство на травах Pippali rasayana , которое часто назначают для лечения глистных инфекций и хронической дизентерии в Индии, вылечило 98% инфекцию мышей с помощью G. lamblia 6. Экстракты плодов Piper longum были эффективны в модель инфекции на мышах 241.

Proposlina, препарат пчелиного клея, продемонстрировал 60% паразитологическое излечение через 1 неделю после завершения лечения среди 48 взрослых на Кубе 172 261. У пациента с устойчивой к метронидазолу инфекцией Giardia , β-адренергический антагонист dl-пропранолол, назначенный в дозе 40 мг три раза в день с 400 мг метронидазола три раза в день в течение 10 дней, вылечил инфекцию, продемонстрировав клиническую эффективность у людей 197.Исследования in vitro демонстрируют, что пропранолол оказывает свое действие, подавляя подвижность и рост простейших, наиболее вероятно из-за мембраностабилизирующей активности препарата 85. Однако необходимы дальнейшие исследования dl-пропранолола и родственного соединения d-пропранолола. прежде, чем их можно будет рекомендовать в качестве средств против Giardia .

Иммунопрофилактические стратегии по профилактике или лечению лямблиоза обычно не были эффективными 87. Пассивный перенос иммунной сыворотки против Giardia не способствовал избавлению от паразитов при лямблиозе мышей 76, 242.Хотя пациенты с общим вариабельным иммунодефицитом действительно имеют симптоматическую и длительную инфекцию, вызванную Giardia , требуется противопаразитарная терапия для борьбы с их инфекцией 106, 216. Грудное молоко может быть цитотоксичным для Giardia через свободные жирные кислоты, которые образуются из триглицеридов молока под действием липазы, стимулированной солями желчных кислот 204. Кроме того, грудное вскармливание может дать некоторую защиту грудным младенцам 176, 183; однако подход к введению энтерального антитела против Giardia не изучался.

Особые ситуации

Беременность и кормление грудью.

Лечение симптоматической инфекции G. lamblia во время беременности является сложной задачей для клинициста, поскольку ни один терапевтический агент не сочетает оптимальную эффективность и безопасность. Бессимптомным женщинам, имеющим легкое заболевание или находящимся в первом триместре беременности, как правило, следует избегать лечения. Однако женщин, у которых невозможно поддерживать адекватный уровень гидратации и питания, следует лечить даже в первом триместре.

Метронидазол, который быстро попадает в кровоток плода после поглощения его матерью, продемонстрировал мутагенность в отношении бактерий и канцерогенность у мышей и крыс 34, 36, 153, 240, 251. Хотя эта информация вызывает беспокойство по поводу использования препарата во время беременности , канцерогенность не была продемонстрирована для людей 23, 24, 78, 98, 212, а также не было выявлено тератогенности у грызунов 164a. Метронидазол широко используется во время беременности (категория беременности B), в первую очередь для лечения трихомониаза курсами от 7 до 10 дней 42.Результаты относительно безопасности для плода противоречат друг другу 36, 42, 107, 212, 215, 218. Одно ретроспективное исследование 1469 женщин, принимавших метронидазол во время беременности, из которых 206 принимали препарат в первом триместре, не выявило никаких доказательств врожденных аномалий 26. Однако совместный перинатальный проект, в котором участвовало более 50 000 пар мать-ребенок, продемонстрировал, что воздействие метронидазола в первом триместре беременности у 31 женщины показало возможную связь с пороками развития 107. Метаанализ семи исследований, в которых проспективно отслеживалось 253 пары мать-ребенок и ретроспективный мониторинг 1083 пар, не выявил повышенного риска пороков развития плода в связи с использованием метронидазола в первом триместре 42, причем в одном отчете относительный риск оценивался как 0.92 для врожденных дефектов 215. В целом, может быть немного повышенный риск при использовании метронидазола в течение первого триместра, и поэтому его следует избегать в этот период. Высокие дозы (≥2,0 г) короткими курсами лечения не следует назначать во время беременности.

Метронидазол активно выделяется с грудным молоком в концентрациях, аналогичных таковым в плазме. Американская академия педиатрии (AAP) рекомендует давать кормящим матерям однократную дозу 2 г с последующим прекращением кормления грудью на 12–24 ч 10, 36.AAP также рекомендует матерям, принимающим тинидазол, прекратить кормление грудью на тот же период времени, что и тем, кто принимает метронидазол 10. Однако метронидазол разрешен для использования у детей для лечения амебиаза и используется у детей для лечения анаэробных инфекций, поэтому может показаться, что небольшое количество, выделяемое с грудным молоком, не будет вредным. Кроме того, поскольку режимы однократного приема высоких доз метронидазола имеют низкую эффективность и, как ожидается, приведут к более высоким уровням в грудном молоке, эти данные свидетельствуют в пользу традиционного лечения с более низкими дозами в течение 5-7 дней.

Паромомицин обычно считается безопасным, поскольку он плохо всасывается из кишечника и почти на 100% выводится с калом в неизмененном виде. Таким образом, до плода дойдет мало, если вообще какое-либо лекарство. Однако он не так эффективен, как метронидазол или хинакрин. Кроме того, в клинических испытаниях не изучалось влияние высоких концентраций паромомицина в сыворотке крови во время беременности. Тем не менее, паромомицин успешно использовался для ликвидации инфекции G. lamblia у беременных и является важным средством, которое следует учитывать в течение первого триместра, когда не следует использовать метронидазол 140, 218.Паромомицин также должен быть безопасным для кормящих матерей. Исследование на овцах показало, что уровень выделения лекарственного средства в грудном молоке в течение 12 часов после парентерального введения составляет всего 0,018% 36, 263. AAP действительно указывает, что стрептомицин и канамицин, аминогликозидные родственники паромомицина, совместимы с грудным вскармливанием 10.

Один Эксперт по лямблиозу поддержал лечение хинакрином у беременных из-за его высокой эффективности 256. Хотя препарат очень эффективен, его медленное выведение из организма и доказанная тератогенность у крыс делают его неоптимальным выбором для лечения беременных.Хотя хинидин и хинин совместимы с грудным вскармливанием, информации о безопасности хинакрина для ребенка, находящегося на грудном вскармливании, не было 10.

Фуразолидон не рекомендуется беременным. Несмотря на то, что он эффективен, он вызывает опухоли молочной железы у мышей и мутации у бактерий, что должно удерживать врача от его использования в таких условиях 164b. Его безопасность для детей, находящихся на грудном вскармливании, неизвестна. Альбендазол считается агентом категории C при беременности и обладает тератогенным действием у крыс и кроликов, хотя опыт его воздействия на беременных женщин невелик.

Бессимптомная инфекция.

В глобальном масштабе большинство людей, инфицированных G. lamblia , протекает бессимптомно или с минимальными симптомами. Лечение бессимптомных пациентов, особенно детей, является спорным вопросом, и перед началом терапии необходимо учитывать несколько факторов. Установление инфекции играет ключевую роль в принятии решения. В районах, где G. lamblia является эндемичным, лечение может быть нежелательным, потому что дети могут быстро повторно инфицироваться после лечения 96, 231.Если Giardia способствует нарушению роста и развития 86, 163, 227, лечение, даже если может произойти повторное инфицирование, может позволить догоняющий рост 103 и может стоить затрат и усилий. В этих условиях может быть полезно такое лекарство, как альбендазол, которое также лечит нематодные инфекции; однако требование 5-дневного приема во многих ситуациях затрудняет завершение терапии.

В условиях, когда у ребенка превосходный базовый уровень питания, например, в детских садах в развитых странах, бессимптомные носители не всегда могут нуждаться в терапии 5, 121, 195, 203, 221, 237.Однако следует отметить, что дети с бессимптомной инфекцией могут выделять Giardia в течение 195 месяцев, переносить их домой к членам семьи и, таким образом, инициировать заражение в домашнем хозяйстве и даже поддерживать высокий уровень инфекции Giardia в сообществе 4. 196, 224; Г. Д. Овертурф, редакция, Clin. Заразить. Дис. 18: 764–765, 1994). Нередко у матери маленького ребенка, находящегося в дневном стационаре, проявляются симптомы лямблиоза, выявляя присутствие в доме Giardia , занесенного бессимптомным ребенком.Если при дневном уходе есть рецидивирующая диарея, связанная с Giardia , которую невозможно контролировать с помощью улучшенной гигиены, лечения и исключения детей с симптомами, можно рассмотреть возможность скрининга и лечения всех детей в условиях дневного ухода 5, 18 , 230.

Если в кале обнаруживается Giardia и вероятность повторного заражения мала, например, у вернувшегося путешественника, можно назначить лечение. В домашнем хозяйстве, если у одного из членов есть симптомы и есть вероятность фекально-орального распространения инфекции в семье или наличие общего источника инфекции, все члены семьи должны пройти обследование и лечение, чтобы предотвратить повторное заражение.

Еще одним фактором, который следует учитывать при принятии решения о лечении бессимптомных носителей, являются последствия передачи инфекции, если носитель не лечится, например, инфекция у лиц, занимающихся обработкой пищевых продуктов 169, 199. Эту группу следует лечить для предотвращения вспышек болезней пищевого происхождения.

Сопротивление и рецидив.

Сообщалось о неудачах лечения всеми распространенными средствами против Giardia , включая метронидазол, хинакрин, фуразолидон и альбендазол. Однако для клинициста, столкнувшегося с рецидивом симптомов после терапии, важно различать фактическую лекарственную устойчивость, излечение с последующим повторным инфицированием и непереносимость лактозы после Giardia .Поэтому первым шагом является документальное подтверждение истинной стойкой инфекции путем отправки образца кала на обследование на O&P или на определение антигена Giardia . Если образец положительный, подробный анамнез контакта должен предоставить информацию о вероятности повторного заражения, и повторно инфицированные лица должны отреагировать на исходный терапевтический агент. Реинфекция будет обычным явлением в эндемичных регионах по всему миру и в условиях плохой фекально-ротовой гигиены. В случае повторного инфицирования пациента следует определить факторы риска и проконсультировать пациента относительно надлежащих мер гигиены и профилактики.

Post- Giardia Непереносимость лактозы является наиболее частым из дисахаридазных дефицитов, связанных с лямблиозом, и может встречаться у 20-40% пациентов 65. Таким образом, если в стуле содержится отрицательный результат на Giardia , испытание отказа от лактозы- содержащие пищу и жидкости. Для разрешения этого синдрома может потребоваться несколько недель.

Истинная неудача лечения может означать заражение лекарственно-устойчивым изолятом Giardia . Устойчивость к большинству агентов против Giardia была документально подтверждена или индуцирована in vitro 29, 154, 245–247 и множественными, генотипически разными клонами G.lamblia с чувствительностью к различным классам лекарств были обнаружены в двенадцатиперстной кишке человека 46, 81, 160, 248. Однако не было последовательной корреляции между устойчивостью или чувствительностью in vitro и клинической неудачей или успехом 43, 160, 164, 225, 249, по-прежнему оставляя открытым вопрос об истинной устойчивости к паразитам.

Клинически резистентные штаммы лечили более длительными повторными курсами или более высокими дозами исходного агента 91, 165, 178. Однако наиболее эффективные средства искоренения этих инфекций, по-видимому, включают использование лекарственного средства другого класса, чтобы избежать потенциального перекрестного заражения. сопротивление 52, 92.Первоначальный переход на препарат другого класса не всегда может быть эффективным, как было продемонстрировано на примере двух французских пациентов, которые не прошли курс лечения альбендазолом после двух курсов метронидазола, но ответили на хинакрин (П. Брассер и Л. Фавеннек, Letter, Parasite 2: 422, 1995). Комбинированные схемы с использованием метронидазол-альбендазола, метронидазол-хинакрина или других активных препаратов или с применением нитроимидазола с хинакрином курсами продолжительностью не менее 2 недель оказались успешными при резистентной инфекции 44, 182a, 197, 225, 234.Иногда для излечения может потребоваться несколько различных комбинаций или подходов.

В случаях лямблиоза, при котором альтернативная терапия неэффективна, следует учитывать другие возможности, такие как наличие иммунологической недостаточности. Хронический лямблиоз у пациентов с гипогаммаглобулинемией хорошо регистрируется 106, 108, 216 и может быть трудно поддающимся лечению, часто требуя длительных курсов терапии. Хотя Giardia встречается у гомосексуалистов, практикующих орально-анальный секс 162, 200, 226, болезнь часто может быть ни тяжелой, ни продолжительной 148.Тем не менее, у больных СПИДом с тяжелым лямблиозом может потребоваться длительная или комбинированная терапия 182a.

Лямблиоз: история болезни, патофизиология, этиология

Автор

Хишам Назер, MBBCh, FRCP, DTM & H Профессор педиатрии, консультант по детской гастроэнтерологии, гепатологии и клиническому питанию, Медицинский факультет Университета Иордании, Иордания

Хишам Назер, MBBCh, FRCP, DTM & H является членом следующих медицинских общества: Американская ассоциация врачей-лидеров, Королевский колледж педиатрии и детского здоровья, Королевский колледж хирургов в Ирландии, Королевское общество тропической медицины и гигиены, Королевский колледж врачей и хирургов Соединенного Королевства

Раскрытие: Ничего не разглашать.

Главный редактор

Берт Кагир, доктор медицины, FACS Клинический профессор хирургии Медицинской школы Содружества Гейзингер; Директор программы ординатуры по общей хирургии, больница Гатри Роберт Пакер; Лечащий хирург, Госпиталь Гатри Роберт Пакер и Госпиталь Корнинг

Берт Кагир, доктор медицины, FACS является членом следующих медицинских обществ: Американского колледжа хирургов, Ассоциации директоров программ по хирургии, Общества хирургии пищеварительного тракта

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Благодарности

Мануп С. Бутани, доктор медицины Профессор, содиректор Центра эндоскопических исследований, обучения и инноваций (CERTAIN), директор Центра эндоскопического ультразвука, Департамент медицины, Отделение гастроэнтерологии, Медицинское отделение Техасского университета; Директор отдела эндоскопических исследований и разработок, Центр рака Андерсона Техасского университета

Мануп С. Бутани, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Американской ассоциации развития науки, Американского колледжа гастроэнтерологии, Американского колледжа врачей, Американской гастроэнтерологической ассоциации, Американского института ультразвука в медицине и Американского общества гастроэнтерологической эндоскопии.

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Брукс Д. Кэш, доктор медицины, FACP Директор клинических исследований, доцент медицины, отделение гастроэнтерологии, Национальный военно-морской медицинский центр

Брукс Д. Кэш, доктор медицины, FACP является членом следующих медицинских обществ: Alpha Omega Alpha, Американского колледжа гастроэнтерологии, Американской гастроэнтерологической ассоциации и Американского общества гастроэнтерологической эндоскопии

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Стивен К. Дронен, доктор медицины, FAAEM Председатель, отделение неотложной медицины, Медицинский центр ЛеКонт

Стивен С. Дронен, доктор медицины, FAAEM является членом следующих медицинских обществ: Американской академии неотложной медицины и Общества академической неотложной медицины

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Мишель Эрвин, доктор медицины , заведующая отделением неотложной медицины, больница Ховардского университета

Мишель Эрвин, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Американской академии неотложной медицины, Американского колледжа врачей неотложной помощи, Американской медицинской ассоциации, Национальной медицинской ассоциации и Общества академической неотложной медицины

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Гленн Феннелли, доктор медицины, магистр здравоохранения Директор отдела инфекционных заболеваний, отделение педиатрии им. Льюиса М. Фрада, Медицинский центр Якоби; Клинический доцент педиатрии, Медицинский колледж Альберта Эйнштейна

Гленн Феннелли, доктор медицины, магистр здравоохранения является членом следующих медицинских обществ: Общество педиатрических инфекционных болезней

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Мурат Хёкелек, MD, PhD Технический консультант лаборатории паразитологии, профессор кафедры клинической микробиологии Медицинской школы Университета Ондокуз Майис, Турция

Мурат Хёкелек, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Турецкое общество паразитологии

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Марк Х. Джонстон, доктор медицины Адъюнкт-профессор медицины Университета медицинских наук военного персонала; Консультант, Lancaster Gastroenterology Inc

Марк Х. Джонстон, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Американского колледжа гастроэнтерологии, Американского колледжа врачей, Американской гастроэнтерологической ассоциации и Христианского медицинского и стоматологического общества

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Сандип Мукерджи, MB, BCh, MPH, FRCPC Доцент, Отделение внутренней медицины, Отделение гастроэнтерологии и гепатологии, Медицинский центр Университета Небраски; Консультанты отделения гастроэнтерологии и гепатологии Медицинского центра по делам ветеранов

Сандип Мукерджи, MB, BCh, MPH, FRCPC является членом следующих медицинских обществ: Королевский колледж врачей и хирургов Канады

Раскрытие информации: Merck Honoraria Выступление и обучение; Членство в Правлении гонорара Ikaria Pharmaceuticals

Майкл Д. Ниссен, MBBS, FRACP, FRCPA Доцент кафедры биомолекулярных, биомедицинских наук и здравоохранения Университета Гриффита; Директор инфекционных болезней и заведующий отделением детской инфекционной лаборатории Квинсленда, Центр вирусных исследований сэра Альберта Сакжевски, Королевская детская больница

Майкл Д. Ниссен, MBBS, FRACP, FRCPA является членом следующих медицинских обществ: Американской академии педиатрии, Американского общества микробиологии, Общества педиатрических инфекционных болезней, Королевского австралазийского колледжа врачей и Королевского колледжа патологов Австралии

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Андре Пеннард, доктор медицины, FACEP, FAAEM, FAWM Доцент кафедры неотложной медицинской помощи, Медицинский колледж Джорджии; Доцент кафедры военной и неотложной медицины Университета медицинских наук военнослужащих; Консультанты, отделения неотложной медицины, авиационной медицины и подводной медицины, Медицинский центр армии Вомак

Андре Пеннардт, доктор медицины, FACEP, FAAEM, FAWM является членом следующих медицинских обществ: Американской академии неотложной медицины, Американского колледжа врачей неотложной помощи, Ассоциации военных хирургов США, Международного общества горной медицины, Национальной ассоциации скорой медицинской помощи. Врачи, Медицинская ассоциация специальных операций и Медицинское общество дикой природы

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Барри Дж. Шеридан, DO Главный воин в переходных службах, Армейский медицинский центр Брук

Barry J Sheridan, DO является членом следующих медицинских обществ: American Academy of Emergency Medicine

.

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Russell W. Steele, MD Руководитель отделения детских инфекционных болезней Детского оздоровительного центра Ochsner; Клинический профессор кафедры педиатрии медицинского факультета Тулейнского университета

Рассел Стил, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американской академии педиатрии, Американской ассоциации иммунологов, Американского педиатрического общества, Американского общества микробиологов, Американского общества инфекционных заболеваний, Медицинского общества штата Луизиана, Общества педиатрических инфекционных болезней, Общество педиатрических исследований и Южная медицинская ассоциация

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Франсиско Талавера, фармацевт, доктор философии Адъюнкт-профессор, Фармацевтический колледж Медицинского центра Университета Небраски; Главный редактор Medscape Drug Reference

Раскрытие информации: Medscape Salary Employment

miRNA Giardia lamblia как новый инструмент диагностики лямблиоза человека

Аннотация

Фон

Giardia lamblia — очень частая причина желудочно-кишечных симптомов во всем мире.Существует несколько методов диагностики инфекции Giardia , но ни один из них не является идеальным. Мы стремимся найти новый метод на основе микроРНК, который улучшит существующие в настоящее время методы диагностики лямблиоза.

Методы

Глубокое профилирование последовательности малой РНК Giardia показало, что miR5 и miR6 высоко экспрессируются в Giardia . Эти миРНК были протестированы с помощью qRT-PCR в биопсиях двенадцатиперстной кишки пациентов с лямблиозом, которые были положительными при микроскопической патологической оценке.Биопсии желудка тех же пациентов служили тканями отрицательного контроля. Кроме того, эти miRNA оценивали в образцах стула пациентов с доказанным лямблиозом.

Результаты

Все гистологически подтвержденные биопсии двенадцатиперстной кишки у пациентов с инфекцией Giardia были положительны для Giardia miR5 со средним пороговым циклом (Ct) 23,7, а также для Giardia DNA qPCR (16S-подобный ген, среднее значение Ct 26,3). ). Все биопсии желудка, которые были протестированы в качестве контроля, были отрицательными.Оценка miR6 в кале у пациентов с лямблиозом показала 90% специфичность, но только 66% чувствительность, а с miR5 была получена более низкая степень точности.

Заключение

Giardia Определение miR5 при биопсии двенадцатиперстной кишки может быть новым методом диагностики лямблиоза. Он кажется более чувствительным по сравнению с тестированием ДНК Giardia методом КПЦР в биопсии двенадцатиперстной кишки. Будет важно изучить влияние рутинного тестирования miRNA Giardia на биопсию двенадцатиперстной кишки у пациентов со стойкими абдоминальными симптомами

Информация об авторе

Лямблиоз — основная причина диарейных заболеваний во всем мире.Это чаще встречается в районах с плохой санитарией, например, во многих странах с низким уровнем доходов, но также встречается и в странах с высоким уровнем доходов. Это наиболее часто обнаруживаемый кишечный паразит в Соединенных Штатах и ​​эндемик в других промышленно развитых странах. Возбудитель — жгутиковые простейшие Giardia lamblia , и передается в основном фекально-оральным путем. Основной метод диагностики — исследование кала. Обычно это обнаруживается при микроскопии кала, которую следует провести на свежем стуле и повторить через 3 дня.Несмотря на некоторые новые методы диагностики, Giardia по-прежнему трудно обнаружить, что часто приводит к неправильной диагностике.

В этом исследовании мы показываем, что использование микроРНК Giardia (miR5) в качестве маркера инфекции Giardia при биопсии двенадцатиперстной кишки может быть новым методом диагностики лямблиоза. Он оказался более чувствительным, чем гистологический диагноз, а также более чувствительным, чем анализ ДНК Giardia при биопсии двенадцатиперстной кишки. Интересно, что у наших пациентов биопсия двенадцатиперстной кишки проводилась по поводу стойких абдоминальных симптомов, и обнаружение Giardia в их биопсии было неожиданным.Таким образом, тестирование биопсии двенадцатиперстной кишки на Giardia miRNA у пациентов со стойкими абдоминальными симптомами может способствовать диагностике и своевременному лечению у пациентов с лямблиозом.

Образец цитирования: Meningher T, Boleslavsky D, Barshack I, Tabibian-Keissar H, Kohen R, Gur-Wahnon D, et al. (2019) Giardia lamblia miRNA как новый инструмент диагностики лямблиоза человека. PLoS Negl Trop Dis 13 (6): e0007398. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398

Редактор: Майкл В. Гонт, Лондонская школа гигиены и тропической медицины, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО

Поступила: 6 ноября 2018 г .; Дата принятия: 16 апреля 2019 г .; Опубликован: 17 июня 2019 г.

Авторские права: © 2019 Meningher et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все данные секвенирования были депонированы в омнибусе экспрессии генов NCBI (запись GEO GSE116101).

Финансирование: Исследование финансировалось за счет гранта программы I-CORE № 41/11 Израильского научного фонда (ISF) Бен-Дову З. Иддо. Кроме того, исследование было профинансировано за счет гранта внутреннего гранта Медицинского центра Шиба под названием «Идентификация микроРНК в стуле как диагностический инструмент лямблиоза человека» Авни Дрор и Шварц Эли.Мы заявляем, что спонсоры не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Лямблии лямблии (также известные как G . интестиналис или G . duodenalis ) являются возбудителем лямблиоза. Среди кишечных простейших паразитов он входит в тройку наиболее распространенных возбудителей диареи во всем мире [1]. Giardia видов имеют две стадии жизненного цикла; жгутиковый трофозоит, прикрепленный к микроворсинкам кишечника, и инфекционная киста, сохраняющаяся в окружающей среде [2]. Передача к человеку происходит либо при прямом контакте между людьми в средах с нарушенным уровнем гигиены [3], либо при загрязнении воды или пищи цистами, устойчивой формой. В промышленно развитых странах Giardia — наиболее распространенный паразит, обнаруживаемый в образцах стула [4, 5].Симптомы включают диарею, метеоризм, чрезмерную усталость, тошноту, неприятный запах стула, спазмы в животе и потерю веса. Примерно у 16% пациентов заболевание может стать хроническим с долгосрочными последствиями, такими как жидкий стул, недоедание, задержка роста, когнитивные нарушения, боли в животе, мальабсорбция и недомогание [6, 7].

У путешественников, возвращающихся из тропических стран, часто встречаются стойкие абдоминальные симптомы (ПАВ), включая хроническую диарею, боли в животе, метеоризм и усталость [8].К сожалению, в большинстве случаев этиология этих жалоб остается неизвестной, частично из-за низкой чувствительности текущих тестов. Только примерно в трети случаев можно идентифицировать патогены, наиболее распространенным из которых является Giardia [9]. Хотя большинство возвращающихся путешественников с хроническими жалобами остаются недиагностированными, многие из них, тем не менее, поддаются антипаразитарному лечению [8].

В настоящее время существует несколько методов диагностики для Giardia , но ни один из них не является настоящим золотым стандартом.Классически лабораторная диагностика проводится путем микроскопического исследования образцов кала, «исследования яйцеклеток и паразитов» (O&P) [10]. Рекомендуется собрать как минимум три независимых образца, предпочтительно водянистого стула, чтобы максимизировать чувствительность обнаружения. Кроме того, стул должен быть свежим, потому что трофозоиты очень быстро расщепляются [10]. Прямой флуоресцентный анализ антител и определение антигена в стуле с использованием иммуноферментного анализа (ELISA) были признаны более чувствительными инструментами для диагностики лямблиоза и представляют собой потенциально привлекательную альтернативу традиционным исследованиям O&P [11, 12].Однако исследования показали, что для достаточной чувствительности требуется по крайней мере пара образцов стула [11]. Кроме того, в последние годы методы обнаружения нуклеиновых кислот на основе ПЦР показали более высокую чувствительность по сравнению с микроскопией и тестами на обнаружение антигенов [13]. Поскольку Giardia обитают в тонком кишечнике, паразитов, поиск их в двенадцатиперстной кишке представляется разумным [14]. Проспективное исследование, проведенное в Италии, выявило лямблиоз путем прямого гистологического исследования биоптатов двенадцатиперстной кишки у 9 из 137 пациентов (6.5%) с симптомами, соответствующими синдрому раздраженного кишечника (СРК), и без тревожных признаков [15].

miRNA представляют собой небольшие некодирующие регуляторные РНК, которые могут направлять посттранскрипционную репрессию синтеза белка из мРНК, содержащих сайты связывания miRNA. У животных miRNAs выполняют разнообразные биологические функции, включая регуляцию ключевых аспектов развития и жизненных циклов [16]. Эти молекулы также обнаружены в одноклеточных организмах, включая видов Giardia, [17] (хотя существование канонической миРНК у этих примитивных эукариот обсуждается [18], поскольку в их геноме отсутствуют ортологи генов процессинга миРНК DROSHA и XPO5 [19]), и как потенциальные маркеры имеют то преимущество, что они частично специфичны для рода [20, 21] и относительно стабильны.Было показано, что миРНК устойчивы к циклическому замораживанию-оттаиванию, перевариванию РНКазой А и обработке раствором с высоким pH [22]. Кроме того, было показано, что miRNAs стабильны в образцах FFPE [23] и в фекалиях [24]. Таким образом, мы попытались идентифицировать Giardia в положительных биопсиях двенадцатиперстной кишки и образцах кала подтвержденных пациентов с лямблиозом путем обнаружения Giardia miRNAs с помощью количественной ПЦР с обратной транскрипцией.

Материалы и методы

Заявление об этике

Исследование было одобрено этическим комитетом Медицинского центра Шиба (Хельсинки), номер протокола 1335-14-SMC.Образцы FFPE были взяты из архива отделения патологии Медицинского центра Шиба. Требование информированного согласия было отменено из-за архивного характера исследуемых образцов FFPE. Контрольные образцы кала новорожденных были собраны после того, как матери были проинформированы и дали согласие. Анонимизированные замороженные образцы кала пациентов, инфицированных Giardia , были предоставлены одобренными Хельсинкским комитетом хранилищами паразитологической лаборатории Министерства здравоохранения Израиля и микробиологической лабораторией Медицинского центра Шиба.

Лямблии штаммы паразитов G . лямблий трофозоитов были получены из ресурсов BEI (https://www.beiresources.org/Home.aspx). WB clone 6 (NR-9706, сборка A [25]), Egypt-4 (NR-9231, сборка A), Mario (NR-9232, сборка A), Sug (NR-9233, сборка не определена) и G2M ( NR-9232, сборка не определена).

Лямблии Условия выращивания

Клетки Giardia выращивали в модифицированном Кейстером TYI-S-33 [26], который содержит: 2% казеина, 1% дрожжевого экстракта, 1% глюкозы, 0.2% NaCl, 0,2% L-цистеин, 0,02% L (+) — аскорбиновая кислота, 0,1% K 2 HPO 4 · 3H 2 O, 0,06% KH 2 PO 4 , 0,00228% цитрат аммония и железа (III) 1% раствор бычьей желчи (все от sigma) и 10% бычья телячья сыворотка (Gibco) в бидистиллированной воде (DDW). Трофозоиты выращивали в пробирке для культивирования клеток из полистирола (Greiner bio-one, Cellstar, Cat. № 163–160) при 37 ° C в анаэробных условиях.

Извлечение РНК из трофозоитов и профилирование миРНК с помощью секвенирования малых РНК

Тотальную РНК экстрагировали из одного миллиона трофозоитных клеток каждого изолята Giardia с использованием набора для выделения miRNA mirVana (Ambion, AM1561).Библиотеки кДНК со штрих-кодом для малых РНК (19–35 нуклеотидов) были получены из полной РНК с использованием собственного метода, как описано ранее [27]. Библиотеки были подвергнуты глубокому секвенированию на секвенаторе Illumina (HiSeq 2500). Кроме того, чтобы облегчить обнаружение miRNA, которое требует идентификации считываний цепи-пассажира, которые обычно редки по сравнению со зрелой цепью, мы подвергли библиотеки кДНК расщеплению дуплекс-специфической нуклеазой (DSN, Evrogen, cat. # EA003) [ 28] и секвенировали также расщепленные библиотеки.Полученные файлы чтения FASTQ были обработаны, как описано [29], и демультиплексированные данные были депонированы в омнибусе экспрессии генов NCBI (запись GEO GSE116101).

Биоинформатический анализ

Обнаружение miRNA в демультиплексированных библиотеках было выполнено с использованием алгоритма miRDeep2 [30]. Для этого мы объединили файлы FASTQ библиотеки интактной и расщепленной DSN кДНК. Мы позволили включить в анализ чтения длиной до 29 нт, в отличие от 25 нт по умолчанию, потому что предыдущее исследование малых РНК, ассоциированных с аргонавтом в Giardia , показало, что длина моды составляет 26 нт [17], что согласуется с структурное моделирование Giardia Dicer [31].Ранее сообщалось, что Giardia miRNA ( S1 Table , адаптировано из Liao et al [17-19, 32-37]) были специально исследованы путем включения их в качестве предполагаемых известных зрелых miRNA в анализ miRDeep2. Для картирования генома мы загрузили файл GiardiaDB-37_GintestinalisAssemblageAWB_Genome.fasta (2018-04-19) из GiardiaDB.

Образцы пациентов

блока ткани двенадцатиперстной биопсии FFPE у пациентов с подтвержденным гистопатологическим подтверждением лямблиоза были получены из отделения патологии Медицинского центра Шиба.Кроме того, в качестве отрицательного контроля использовались биопсии желудка от одних и тех же пациентов и от неродственных пациентов. Образцы кала у пациентов с лямблиозом с подтвержденным антигеном и / или микроскопией были собраны в Институте географической медицины и тропических болезней Медицинского центра Шиба и в Лаборатории паразитологии Министерства здравоохранения Израиля, Иерусалим. Образцы фекалий отрицательного контроля были собраны у новорожденных и у младенцев, которые только начали есть, но все еще не посещают детский сад.Образцы стула хранили при -80 ° C до анализа.

Извлечение ДНК и РНК из FFPE

ДНК

экстрагировали из 10-20 срезов блоков ткани FFPE с помощью набора QIAamp DNA Mini (Qiagen, 51304) в соответствии с протоколом производителя с небольшими изменениями. Инкубацию с протеиназой К проводили в течение ночи, а затем добавляли дополнительную протеиназу К на 1 час. После добавления буфера AL и этанола образцы инкубировали при -20 ° C в течение 1 часа. Последующие шаги выполнялись согласно протоколу.Выделение РНК из биоптатов FFPE выполняли с использованием набора miRNeasy FFPE (Qiagen, 217504) в соответствии с протоколом производителя.

Извлечение РНК из образцов стула человека

0,1 г стула добавляли к 200 мкл 2% суспензии поливинилполипирролидона (PVPP, Sigma) и замораживали при -20 ° C в течение ночи. Затем суспензию нагревали 10 мин при 100 ° C [1]. Выделение miRNA из суспензии выполняли с использованием набора для выделения miRNA mirVana (Ambion, AM1561) в соответствии с протоколом производителя.

кОТ-ПЦР / кПЦР в реальном времени

Система ПЦР в реальном времени ABI Quant Studio6 Flex (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния, США) использовалась во всех экспериментах с qRT-PCR и qPCR.

Один этап qRT-PCR

Обнаружение миРНК, выделенных из образцов фекалий, по технологии Eva Green, проводили, как описано ранее [38, 39].

Праймеры для обнаружения миРНК

Giardia в образцах фекалий

Лямблии miR5

RP1-miR5: 5′-GGACGGTAGCAAGCAAAGAGAGAGAAGGCTCGGACAT-3 ‘

RP2-miR5: 5′-GGGATTCTGGAAGATGATGATGACGATGCTTCCTTGG-3 ‘

P1: 5′-GGACGGTAGCAAGCAAAGAGAGAG-3 ‘

P2: 5′-GGGATTCTGGAAGATGATGATGAC-3 ‘

Лямблии miR6:

RP1-miR6: 5′-GGACGGTAGCAAGCAAAGAGAGAGCAGAATACGACAAA-3 ‘

RP2-miR6: 5′-GGGATTCTGGAAGATGATGATGACGACGCGTGACGAAG’-3 ‘

P1: 5′-GGACGGTAGCAAGCAAAGAGAGAG-3 ‘

P2: 5′-GGGATTCTGGAAGATGATGATGAC-3 ‘

Человеческий RNU6B:

RP1-RNU6B: 5′-GGACGGTAGCAAGCAAAGAGAGAGAAAAATATGGAACGCTTCACGAA-3 ‘

RP2-RNU6B: 5′-GGGATTCTGGAAGATGATGATGACCGCAAGGATGACACGCAAA-3 ‘

P1: 5′-GGACGGTAGCAAGCAAAGAGAGAG-3 ‘

P2: 5′-GGGATTCTGGAAGATGATGATGAC-3 ‘

TaqMan микроРНК qRT-PCR

qRT-PCR miRNAs, выделенных из образцов FFPE, была проведена в соответствии с протоколом производителя (Applied Biosystems) с использованием пользовательских праймеров, разработанных в соответствии с методом количественного определения miRNA Applied Biosystems [40], либо для Giardia miR5 (Applied Biosystems Assay-ID 5737335_1), либо для Giardia miR6 (Applied Biosystems Assay-ID 5710263_1).

TaqMan ДНК кПЦР

КПЦР ДНК, выделенной из образцов FFPE, выполняли со специфическими праймерами для гена малой субъединицы рибосомной (16S-подобной) РНК Giardia с помощью TaqMan qPCR, как описано Verweij et al. [1].

Статистика

Статистическую значимость оценивали с помощью t-критерия Стьюдента или однофакторного дисперсионного анализа. Значение вероятности p <0,05 считалось значимым. Для сравнения Ct miR5 с Ct ДНК использовали парный t-критерий Стьюдента.Непарный t-критерий и площадь под кривой рабочих характеристик приемника (ROC) и пороговое значение Ct были рассчитаны с использованием GraphPad Prism версии 5.00 для Windows, GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США, www.graphpad.com. Вкратце, после ввода значений Ct (инфицированный и здоровый контроль) предлагается ряд пороговых значений. График отображает процентную чувствительность по сравнению с процентом ложноположительных результатов (100-специфичность) для различных точек отсечения. Оптимальный порог определяется как порог с наивысшим отношением правдоподобия [определяемый как% чувствительности / (100% специфичность)].Данные кривой ROC представлены в таблицах S2 и S3.

Результаты

Характеристика

лямблий miРНК

Выращивали пять различных изолятов Giardia . Полная РНК была извлечена, и небольшие библиотеки РНК были подготовлены и глубоко секвенированы. Результаты и идеи этого анализа транскриптома малых РНК представлены в приложении S1 . Наши данные глубокого секвенирования подтвердили присутствие считываний, происходящих от двух предполагаемых miRNA, которые, как ранее сообщалось, имеют самые высокие уровни экспрессии в Giardia, трофозоитов, miR5 и miR6 [17], и они были использованы для последующего анализа образцов пациентов.Кроме того, эти две miRNAs консервативны между тремя основными сообществами, инфицирующими людей; A, B и E. miR5 имеет длину 26 нуклеотидов и на 100% идентичен во всех трех сообществах. miR6 имеет длину 28 нуклеотидов и на 100% идентичны в сборках A и E, а 24 из 28 идентичны в сборках B (таблица S1).

Обнаружение

микроРНК лямблий в биоптатах двенадцатиперстной кишки человека

Были изучены восемь биопсий двенадцатиперстной кишки, которые были определены патологом как Giardia положительные.Образцы были взяты у пациентов, направленных на гастроскопию из-за продолжительных жалоб со стороны желудочно-кишечной системы или анемии (таблица 1), но у них не был диагностирован лямблиоз до гастроскопии. РНК и ДНК экстрагировали из биопсийного материала и анализировали с использованием анализа TaqMan® MicroRNA Assay и анализа TaqMan qPCR DNA соответственно. Как видно из таблицы 1, все образцы были положительными для Giardia miR5 со средним пороговым значением цикла (Ct) 23,7. miR6 в основном не определялся и поэтому не исследовался в биопсии двенадцатиперстной кишки.Мы также выполнили тест qPCR для ДНК Giardia с использованием специфических праймеров для гена малой субъединицы рибосомной (16S-подобной) РНК Giardia с помощью TaqMan qPCR, как описано Verweij et al. [1]. Сравнение уровней Ct Giardia miR5 и Giardia ДНК на тех же образцах с использованием эквивалентных объемов экстрагированной нуклеиновой кислоты показывает, что miR5 дает более низкие средние значения Ct, 23,7 против 26,3 (по парному t-критерию p = 0,004). Эти находки предполагают, что амплификация miRNA может быть более устойчивой, чем амплификация ДНК.

В качестве отрицательного контроля мы использовали биопсию желудка, в которой не предполагается наличие Giardia паразитов. Во-первых, мы использовали 4 доступные биопсии желудка от 8 пациентов, упомянутых выше, с положительной гистологией двенадцатиперстной кишки. В самом деле, в биоптатах желудка этих пациентов miR5 не был обнаружен (Таблица 1). Шесть дополнительных биопсий желудка от случайно выбранных пациентов, перенесших гастроскопию по разным причинам, показали значения Ct выше 34. В целом во всех 10 контрольных биопсиях значения Ct miR5 были выше 34 при среднем значении 35.9 (± 1,6) по сравнению с 23,7 (± 4,0) в положительных случаях (p <0,0001) (рис. 1).

Рис. 1. Обнаружение Giardia miR5 в биоптатах двенадцатиперстной кишки человека.

РНК было извлечено из 8 биопсий двенадцатиперстной кишки у пациентов с положительным результатом на лямблии или в качестве контрольной группы, из 4 биопсий желудка у пациентов с положительным результатом на лямблии, и из 6 случайных биопсий желудка. РНК подвергали qRT-PCR (см. «Методы») со специфическими праймерами для miR5. Каждая точка представляет образцы пациента или контрольной группы.Среднее ± SEM показано горизонтальными линиями. ***, P <0,0001, рассчитано с помощью непарного t-критерия.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.g001

Применив анализ кривой рабочих характеристик приемника (ROC), мы получили высокочувствительные и специфические результаты. Расчетная площадь под кривой (AUC) для miR5 составила 1, что соответствует идеальному тесту; [41]. Оптимальный порог определяется как порог с наивысшим отношением правдоподобия [отношение правдоподобия определяется как% чувствительности / (100% специфичность)].С miR5, Ct <33,5 дает 100% чувствительность и специфичность и, следовательно, отношение правдоподобия ∞ (95% доверительные интервалы - чувствительность от 63,1% до 100,0%, специфичность от 59,0% до 100,0%) (рис. 2) и таблица S2.

Рис. 2. Анализ кривой ROC.

Анализ площади под кривыми ROC (AUC) выполняли со значениями Ct Giardia miR-5 в качестве предикторов для категории заболевания (инфицированная = положительная 12-перстная кишка / контроль = желудочный) в качестве переменной ответа (красные линии). Значение P = 0,0002.Кривая ROC была построена с помощью GraphPad Prism версии 5.00 для Windows. Диагональная черная линия отражает результаты диагностического теста не выше случайного уровня.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.g002

Чтобы определить минимальное количество паразитов Giardia , которое может быть обнаружено с помощью miR5 qRT-PCR, мы использовали модель in vitro, выделенную из паразитов. , и коррелировал количество клеток паразита с чтением Ct (рис. 3). Как видно, при разведении 10 4 мы насчитали ~ 8 паразитов со значением Ct 33.1, немного ниже порогового значения 33,5 Ct, определенного выше. Таким образом, нижний предел обнаружения нашего анализа miR5 может составлять 8 клеток паразита.

Рис. 3. Расчет in vitro значения Ct miR5 qRT-PCR в зависимости от количества паразитов.

WB штамм Giardia выращивали в культуре. Подсчитывали количество паразитов и разбавляли, как показано в таблице. Из каждого разведения экстрагировали РНК и подвергали кОТ-ПЦР. График представляет собой среднее значение трех повторов и логарифм концентрации паразитов в зависимости от полученного значения Ct.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.g003

Интересно, что 3 пациента с подозрением на лямблиоз, приобретенный во время путешествий, без доказательств наличия Giardia при гистологическом исследовании ткани двенадцатиперстной кишки и микроскопии кала на miR5 в двенадцатиперстная кишка. У одного из этих пациентов биопсия, которая была взята перед лечением, дала значение Ct miR5 31,0, положительное для инфекции Giardia , тогда как биопсии двух других пациентов, которые были взяты после лечения против лямблий, дали пограничные уровни Ct, 33.8 и 34 (таблица 2). Симптомы всех трех пациентов отреагировали на лечение против Giardia .

Обнаружение

микроРНК лямблий в образцах стула

19 образцов стула были собраны и включены в исследование. Было взято 9 образцов стула у пациентов, страдающих диареей с подтвержденным лямблиозом. В контрольной группе у здоровых младенцев было взято 10 проб стула; 6 новорожденных и 4 малыша в возрасте от 1 до 1,5 лет, которые только начали есть твердую пищу и еще не поступили в детский сад.Образцы пациентов были проверены на наличие Giardia тремя различными методами: микроскопическим исследованием (O&P), ELISA и ДНК-ПЦР. Образцы считались положительными, если по крайней мере два из вышеупомянутых диагностических методов были положительными.

Было выполнено измерение miR5 и miR6 в образцах кала пациентов. Была извлечена РНК из стула, и был проведен одностадийный анализ ОТ-ПЦР в реальном времени [39], анализ, который мы использовали ранее, успешно идентифицирующий очень небольшое количество miRNA [38].Как видно на фиг. 4, для miR6 была обнаружена значительная разница между положительными пациентами по сравнению со здоровыми людьми (p = 0,0025). Мы применили анализ кривой ROC, чтобы оценить точность нашего теста. Как показано на рис. 5, точность анализа присутствия miRNA Giardia, miRNA, выделенных из образцов кала инфицированных пациентов, была средней; с AUC для miR6 0,88. Отношение правдоподобия для miR6, основанное на чувствительности 66,6% и специфичности 90%, составило Ct 30,0 (таблица 3S).

Рис. 4. Обнаружение Giardia miR6 в кале человека.

РНК

экстрагировали из фекалий и подвергали одностадийной ОТ-ПЦР (см. Методы) со специфическими праймерами для miR6. Каждая точка представляет образцы пациента или здорового человека. Среднее ± SEM обозначено горизонтальными линиями. **, значение P 0,0025 рассчитано с помощью непарного t-критерия.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.g004

Рис. 5. Анализ кривой ROC.

Анализ площади под кривыми ROC (AUC) выполняли со значениями Ct Giardia miR6 в качестве предикторов для категории заболевания (инфицированные = положительный стул / контроль = отрицательный стул) в качестве переменной ответа (красные линии).Значение P = 0,0043. Кривая ROC была построена с помощью GraphPad Prism версии 5.00 для Windows. Диагональная черная линия отражает результаты диагностического теста не выше случайного уровня.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.g005

В отличие от miR6, при измерении miR5 его уровни не различались между инфицированными и здоровыми образцами (данные не показаны), что подразумевает неспецифичность (ложь). -положительный) усиление.

Обсуждение

Лямблиоз — серьезное заболевание, которое не диагностируется.В этом исследовании наша цель состояла в том, чтобы найти новый метод, который внесет вклад в существующие в настоящее время методы диагностики инфекции Giardia . Для этого мы решили сосредоточиться на молекулах miRNA Giardia из-за их стабильности, что делает их хорошими кандидатами на выживание в сложных методах экстракции. Тот факт, что молекулы miRNA не существуют в бактериях, составляющих большую часть кишечной флоры, делает их многообещающими с точки зрения специфичности. Использование miRNA для диагностики паразитарных инфекций находится на пике [17] и, насколько нам известно, никогда не использовалось для диагностики инфекции Giardia .

Нам известны дискуссии о том, имеет ли Giardia истинных миРНК. Однако это обсуждение менее актуально для нашей работы. Точное биохимическое определение и функция этих малых РНК имеют меньшее значение с точки зрения их потенциала в качестве биомаркеров. Тем не менее, поскольку анализируемая нами малая РНК уже была названа другими как miRNA, мы сохранили эту номенклатуру (например, miR5 и miR6).

Мы провели глубокий анализ секвенирования малых РНК, выделенных из 5 различных изолятов Giardia .Основываясь на их изобилии в наших данных, а также в предыдущих отчетах Saraiya et al и Liao et al [17, 18, 36], мы решили сосредоточиться на двух молекулах — miR5 и miR6, которые, по данным анализа BLAST, не являются родственны человеческому геному и транскриптому.

Поскольку Giardia находится в верхнем отделе кишечника, мы решили проверить наличие двух выбранных нами молекул в образцах биопсии двенадцатиперстной кишки от 8 пациентов, у которых при гистологическом исследовании было обнаружено Giardia паразитов (Таблица 1).Эти 8 пациентов были направлены на гастроскопию в связи с продолжительными жалобами со стороны желудочно-кишечного тракта. Интересно, что ни у одного из этих пациентов не было подозрений на лямблиоз до гастроскопии.

Все восемь образцов, признанных положительными в результате патологии, были подтверждены как положительные с помощью теста ДНК-ПЦР для Giardia . Применение qRT-PCR для Giardia miR5 также было положительным во всех образцах. Интересно, что miR6 оказался менее эффективным, более того, в 4 из 8 образцов мы его вообще не обнаружили (табл. 1).Это может быть связано с тем, что наши праймеры были сконструированы для miR6 сборок A, и, как показано в таблице S1, между miR6 сборки A и сборкой B есть 4 нуклеотида. Интересно, хотя мы экстрагировали ДНК и РНК из одинакового количества слайдов FFPE, мы идентифицировали miR5 в более низких циклах Ct, что может указывать на надежность miR5 по сравнению с тестированием ДНК. Используя биопсию желудка в качестве отрицательного контроля, мы действительно обнаружили, что miR5 не был обнаружен даже у пациентов, у которых в образце двенадцатиперстной кишки было Giardia .Кроме того, все контрольные биопсии желудка у пациентов, не относящихся к Giardia, были отрицательными на miR5.

У нас было три дополнительных случая с клиническим подозрением на лямблиоз, но с отрицательным диагнозом Giardia обычными методами и отрицательными результатами биопсии двенадцатиперстной кишки (Таблица 2). Один из этих пациентов был miR5-положительным с Ct 31 (наше расчетное пороговое значение составляет 33,5). Двум другим пациентам была сделана биопсия после эмпирического лечения, и в соответствии со значениями Ct 33,8 и 34,0 их можно было классифицировать как пограничные или отрицательные после лечения для микроРНК Giardia .Более того, хотя у нас нет каких-либо дополнительных подтверждающих доказательств того, что у этих трех пациентов был лямблиоз, все трое ответили на лечение анти- Giardia . Как видно на фиг. 3A и 3B, мы построили калибровочную кривую отношения Ct, полученного в qRT-PCR для miRNA Giardia , к количеству подсчитанных клеток паразита. На основе этой кривой Ct 33,0 указывает на 8 клеток паразита. Следовательно, поскольку наш расчетный порог для положительной инфекции составляет 33,5, можно предположить, что qRT-PCR может обнаружить всего 8 паразитов, в то время как на основе среднего уровня Ct (23.7) при гистологически положительной биопсии необходимо в 100–1000 раз выявить больше паразитов с помощью гистопатологии (рис. 3), что свидетельствует о преимуществах обнаружения miRNA с помощью qRT-PCR при биопсии двенадцатиперстной кишки. Кроме того, эти положительные случаи Giardia miRNA были отрицательными для ДНК Giardia , что также усиливает превосходство miRNA над ДНК при биопсии двенадцатиперстной кишки.

Как уже упоминалось, ни у одного из пациентов исследовательской группы не было подозрений на лямблиоз до диагностической гастроскопии (Таблица 1).Это говорит о том, что Giardia инфекций действительно недостаточно диагностированы в Израиле и, вероятно, в промышленно развитых странах в целом. Кроме того, мы предполагаем, что лямблиоз — недиагностируемое заболевание из-за низкой чувствительности современных диагностических инструментов. Это предположение было сделано при наблюдении за пациентами с хроническими желудочно-кишечными заболеваниями, некоторые из которых были возвращающимися путешественниками из тропиков. У этих пациентов были отрицательные анализы кала на паразитов, и у них был оставлен предположительный диагноз синдрома раздраженного кишечника, однако эмпирическое лечение протозойными препаратами привело к значительному улучшению у 70% [8].

Ранние исследования показали, что одной биопсии двенадцатиперстной кишки может быть недостаточно для диагностики лямблиоза. В одном из исследований было высказано предположение, что двух образцов может быть достаточно для диагностики всех случаев, вероятно, из-за неоднородного распределения паразитов в двенадцатиперстной кишке [42].

Сравнение образцов дуоденального аспирата с образцами биопсии у пациентов с лямблиозом дало неоднозначные результаты в разных исследованиях. Некоторые исследования показали превосходство образцов аспирата двенадцатиперстной кишки над биопсией слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки [43].Другие показали, что биопсия слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки более чувствительна по сравнению с образцами аспирата двенадцатиперстной кишки [44].

В обоих исследованиях использовалось гистологическое исследование, и оба показали, что образцы аспирата двенадцатиперстной кишки или биопсия слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки были более точными по сравнению с исследованием кала.

Фуад и его коллеги подвергли образцы стула и двенадцатиперстной кишки 120 пациентам с диспепсией ПЦР-анализу на ДНК Giardia и провели поиск микроорганизмов в параллельных образцах биопсии двенадцатиперстной кишки. Лямблии были обнаружены методом ПЦР в аспирате двенадцатиперстной кишки в 23 случаях, но микроорганизмы присутствовали в образцах биопсии только у 2 из этих пациентов (чувствительность 9%). В то время как исследование, проведенное в условиях высокой распространенности, показало, что у 44% (96/220) пациентов, перенесших гастродуоденоскопию из-за симптомов диспепсии, при биопсии двенадцатиперстной кишки было Giardia [45]. В этом исследовании показалось, что диагностика двенадцатиперстной кишки намного более чувствительна, чем микроскопия кала, поскольку только в небольшом количестве из них (5/85, 6%) лямблий были обнаружены паразитов при исследовании кала.

В последней части нашего исследования мы стремились обнаружить молекулы miR5 и miR6 в образцах кала пациентов с доказанным лямблиозом (которые были признаны положительными по крайней мере в двух альтернативных тестах кала). В качестве контрольной группы мы выбрали две популяции. Первыми были новорожденные, которые предположительно еще не подверглись воздействию паразита. Вторую контрольную группу составили малыши без братьев и сестер, которые еще не начали посещать детский сад, но перестали кормить грудью и начали есть твердую пищу.У этих групп была относительно небольшая вероятность контакта с Giardia . Результаты нашего исследования показали умеренную точность с 90% специфичностью и только 66,7% чувствительностью при диагностике инфекции Giardia с использованием miR6 в кале. Результаты количественного определения miR5 в кале были еще менее точными.

Похоже, что идентификация молекул miRNA Giardia в образцах двенадцатиперстной кишки показывает больший потенциал, чем в образцах кала. Экстракция miRNA из парафина проста и менее подвержена фоновому шуму, который существует в стуле из-за большого количества бактерий. Лямблии паразитов обитают в двенадцатиперстной кишке, где они достигают высокого количества клеток, тогда как в стуле их количество относительно невелико, а выведение является периодическим. Тот факт, что miR5 был идентифицирован в образцах двенадцатиперстной кишки, но не в образцах кала, и наоборот miR6, предполагает различия в экспрессии молекул miRNA между трофозоитами Giardia (существуют в двенадцатиперстной кишке) и цистами Giardia (присутствуют в стуле). Созданные нами библиотеки miRNA были получены в результате секвенирования культур Giardia в его трофозоитной форме.Это также основная форма паразита, обитающая в двенадцатиперстной кишке, хотя и в другой среде.

Основным ограничением нашего исследования является относительно небольшое количество выборок как в экспериментальной, так и в контрольной группах. Другое ограничение состоит в том, что мы оценили только две молекулы miRNA.

В заключение, тестирование miR5 на инфекцию Giardia при биопсии двенадцатиперстной кишки может быть прорывным методом диагностики лямблиоза, который потенциально может быть более чувствительным, чем существующие методы.Очевидно, мы не предлагаем биопсию двенадцатиперстной кишки каждому пациенту с подозрением на лямблиоз. Тем не менее, мы считаем, что qRT-PCR для miRNA Giardia должна быть одним из тестов у пациентов, подвергающихся эндоскопическому обследованию при невыявленных стойких абдоминальных симптомах.

Мы хотим подчеркнуть тот факт, что биопсия двенадцатиперстной кишки в наших образцах была взята у пациентов, которые страдали стойкими абдоминальными симптомами и не подозревались на инфицирование Giardia . Только патологоанатом неожиданно обнаружил Giardia при биопсии двенадцатиперстной кишки.Поэтому мы считаем, что qRT-PCR для miRNA Giardia должна быть одним из тестов, которые проходят такие пациенты. Следовательно, было бы важно дополнительно изучить вклад тестирования miRNA Giardia в биопсию двенадцатиперстной кишки и аспират двенадцатиперстной кишки от пациентов со стойкими абдоминальными симптомами.

Вспомогательная информация

Папка S1. Алгоритм miRDeep2 (когда допустимо, чтобы до 50% отображенных считываний несовместимы с обработкой Dicer) выдал 58 новых предложений для предшественников miRNA, которые показаны в этой папке.

Файл result_16_06_2018_t_13_52_59.html представляет собой индекс, через который можно получить доступ к графику pdf.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.s002

(ZIP)

S1 Текст. Результат анализа miRDeep2 для поиска известной и новой miRNA в библиотеках малых РНК 5

изолятов трофозоитов Giardia (запускается с опцией «-t», чтобы в выходные данные включались дисквалифицированные предшественники).

В выходных данных показаны свернутые скопления чтения для каждого предложенного предшественника miRNA и перечислены причины дисквалификации.Последовательности отсортированы по количеству и указана их исходная библиотека. Например, последовательность «Gi3_8

8_x63185» была обнаружена 63185 раз в библиотеке Gi3

.

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.s003

(PDF)

S2 Стол. Данные Giardia miR5 в биопсии двенадцатиперстной кишки человека, результаты Ct в реальном времени и данные кривой ROC.

Расчет оптимального отсечения, определяемого как отсечение с наивысшим отношением правдоподобия [определяется как% чувствительности / (100% специфичность)].

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.s005

(DOCX)

S3 Таблица. Данные Giardia miR6 в образцах стула человека, результаты Ct в реальном времени и данные кривой ROC.

Расчет оптимального отсечения, определяемого как отсечение с наивысшим отношением правдоподобия [определяется как% чувствительности / (100% специфичность)].

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0007398.s006

(DOCX)

Ссылки

  1. 1. Verweij JJ, Blange RA, Templeton K, Schinkel J, Brienen EA, van Rooyen MA и др.Одновременное обнаружение Entamoeba histolytica, Giardia lamblia и Cryptosporidium parvum в образцах фекалий с помощью мультиплексной ПЦР в реальном времени. J Clin Microbiol. 2004. 42 (3): 1220–3. Epub 2004/03/09. pmid: 15004079; PubMed Central PMCID: PMC356880.
  2. 2. Носала К., Доусон СК. Критическая роль цитоскелета в патогенезе лямблий. Curr Clin Microbiol Rep. 2015; 2 (4): 155–62. Epub 2016/06/28. pmid: 27347476; PubMed Central PMCID: PMC46.
  3. 3. Колли С.М., Безаджио Р.К., Ниши Л., Биньотто Т.С., Феррейра Е.С., Фалавинья-Гильерме А.Л. и др.Идентичный набор Giardia duodenalis у людей, животных и овощей в городских районах на юге Бразилии указывает на связь между ними. PLoS ONE. 2015; 10 (3): e0118065. Epub 2015/03/12. pmid: 25761119; PubMed Central PMCID: PMC4356552.
  4. 4. Сильвестри С., Греганти Дж., Арзени Д., Морчиано А., Кастелли П., Барчиеси Ф. и др. Кишечный паразитоз: анализ данных 2006–2011 гг. В клинической больнице Анконы, Италия. Infez Med. 2013; 21 (1): 34–9. Epub 2013/03/26. pmid: 23524899.
  5. 5. Бен-Шимол С., Саги О., Гринберг Д. Различия в распространенности паразитов в образцах стула между тремя различными этническими педиатрическими популяциями на юге Израиля, 2007–2011 гг. Parasitol Int. 2014. 63 (2): 456–62. Epub 2013/11/10. pmid: 24201297.
  6. 6. Ди Генова Б.М., Тонелли Р.Р. Стратегии заражения кишечными паразитическими патогенами и ответами клеток-хозяев. Front Microbiol. 2016; 7: 256. Epub 2016/03/15. pmid: 26973630; PubMed Central PMCID: PMC4776161.
  7. 7.Ханевик К., Хаускен Т., Моркен М.Х., Стрэнд Э.А., Морч К., Колл П. и др. Сохраняющиеся симптомы и воспаление двенадцатиперстной кишки, связанные с инфекцией Giardia duodenalis. J Infect. 2007. 55 (6): 524–30. Epub 2007/10/30. pmid: 17964658.
  8. 8. Nissan B, Lachish T, Schwartz E. Эффективность эмпирического антипаразитарного лечения у возвращающихся путешественников со стойкими абдоминальными симптомами. Журнал туристической медицины. 2018; 25 (1). Epub 2017/12/13. pmid: 29232458.
  9. 9. Росс АГ, Криппс А.В.Энтеропатогены и хронические заболевания у возвращающихся путешественников. N Engl J Med. 2013; 369 (8): 784. Epub 2013/08/24. pmid: 23964949.
  10. 10. Картрайт С.П. Полезность многократных исследований яиц стула и паразитов в условиях высокой распространенности. J Clin Microbiol. 1999. 37 (8): 2408–11. Epub 1999/07/16. pmid: 10405376; PubMed Central PMCID: PMC85240.
  11. 11. Хэнсон К.Л., Картрайт С.П. Использование иммуноферментного анализа не избавляет от необходимости анализировать несколько образцов стула для чувствительного обнаружения Giardia lamblia.J Clin Microbiol. 2001. 39 (2): 474–7. Epub 2001/02/07. pmid: 11158092; PubMed Central PMCID: PMC87761.
  12. 12. Джонстон С.П., Баллард М.М., Бич М.Дж., Кузер Л., Уилкинс П.П. Оценка трех коммерческих тестов для обнаружения организмов Giardia и Cryptosporidium в образцах фекалий. J Clin Microbiol. 2003. 41 (2): 623–6. Epub 2003/02/08. pmid: 12574257; PubMed Central PMCID: PMC149727.
  13. 13. Zboromyrska Y, Hurtado JC, Salvador P, Alvarez-Martinez MJ, Valls ME, Mas J, et al.Этиология диареи путешественников: оценка инструмента мультиплексной ПЦР для обнаружения различных энтеропатогенов. Клиническая микробиология и инфекции: официальное издание Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний. 2014; 20 (10): O753–9. Epub 2014/03/14. pmid: 24621195.
  14. 14. Фуад С.А., Эсмат С., Басёни М.М., Фархан М.С., Кобаиси М.Х. Молекулярная идентификация кишечной лямблии у пациентов с диспепсией. Пищеварение. 2014; 90 (1): 63–71. Epub 2014/09/10.pmid: 25196096.
  15. 15. Грациоли Б., Матера Дж., Ларатта С., Схипани Дж., Гварниери Дж., Спиниелло Е. и др. Инфекция Giardia lamblia у пациентов с синдромом раздраженного кишечника и диспепсией: проспективное исследование. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2006; 12 (12): 1941–4. Epub 2006/04/13. pmid: 16610003; PubMed Central PMCID: PMC4087522.
  16. 16. Бушати Н, Коэн СМ. функции микроРНК. Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития. 2007. 23: 175–205. pmid: 17506695.
  17. 17.Сарайя А.А., Ли В., Ву Дж., Чанг СН, Ван СС. МикроРНК в древнем протисте подавляют экспрессию специфичного для варианта поверхностного белка, нацеливаясь на всю кодирующую последовательность. PLoS Pathog. 2014; 10 (2): e1003791. Epub 2014/03/04. pmid: 24586143; PubMed Central PMCID: PMC3937270.
  18. 18. Liao JY, Guo YH, Zheng LL, Li Y, Xu WL, Zhang YC и др. И эндо-миРНК, и производные тРНК малые РНК участвуют в дифференцировке примитивных эукариот Giardia lamblia. Proc Natl Acad Sci U S A.2014. 111 (39): 14159–64. pmid: 25225396; PubMed Central PMCID: PMC41

    .

  19. 19. Ли В., Сарайя А.А., Ван СС. В регуляции генов Giardia lambia участвует предполагаемая микроРНК, происходящая из небольшой ядрышковой РНК. PLoS игнорирует тропические болезни. 2011; 5 (10): e1338. Epub 2011/10/27. pmid: 22028939; PubMed Central PMCID: PMC3196473.
  20. 20. Гриффитс-Джонс С., Сайни Х. К., ван Донген С., Энрайт А. Дж. miRBase: инструменты для геномики микроРНК. Nucleic Acids Res. 2008; 36 (выпуск базы данных): D154–8.pmid: 179.
  21. 21. Ли SC, Чан WC, Ху LY, Lai CH, Hsu CN, Lin WC. Идентификация гомологичных микроРНК в геномах 56 животных. Геномика. 2010. 96 (1): 1–9. Epub 2010/03/30. pmid: 20347954.
  22. 22. Чен Х, Ба И, Ма Л, Цай Х, Инь И, Ван К. и др. Характеристика микроРНК в сыворотке: новый класс биомаркеров для диагностики рака и других заболеваний. Клеточные исследования. 2008. 18 (10): 997–1006. Epub 2008/09/04. pmid: 18766170.
  23. 23. Какимото Ю., Танака М., Камигучи Х., Очиай Э., Осава М.Стабильность микроРНК в образцах тканей FFPE: зависимость от содержания GC. PLoS ONE. 2016; 11 (9): e0163125. pmid: 27649415; PubMed Central PMCID: PMC5029930.
  24. 24. Ссылка A, Балагер Ф., Шен Й., Нагасака Т., Лозано Дж. Дж., Боланд С. Р. и др. Фекальные микроРНК как новые биомаркеры для скрининга рака толстой кишки. Эпидемиология рака, биомаркеры и профилактика: публикация Американской ассоциации исследований рака, спонсируемая Американским обществом профилактической онкологии. 2010; 19 (7): 1766–74.Epub 2010/06/17. pmid: 20551304; PubMed Central PMCID: PMC2
    25. 0.
  25. 25. Monis PT, Caccio SM, Thompson RC. Вариация в Giardia: к таксономической ревизии рода. Тенденции паразитологии. 2009. 25 (2): 93–100. pmid: 1

    17.
  26. 26. Keister DB. Аксеническая культура Giardia lamblia в среде TYI-S-33 с добавлением желчи. Труды Королевского общества тропической медицины и гигиены. 1983. 77 (4): 487–8. Epub 1983/01/01. pmid: 6636276.
  27. 27.Шило В., Мор-Йосеф Леви I, Абель Р., Михайлович А., Вассерман Г., Навех-Мани Т. и др. Let-7 и MicroRNA-148 регулируют уровень паратироидного гормона при вторичном гиперпаратиреозе. J Am Soc Nephrol. 2017; 28 (8): 2353–63. pmid: 28298326; PubMed Central PMCID: PMC5533223.
  28. 28. Qiu X, Zhang H, Yu H, Jiang T, Luo Y. Биоанализ, опосредованный дуплексной нуклеазой. Тенденции в биотехнологии. 2015; 33 (3): 180–8. pmid: 25640199.
  29. 29. Фарази Т.А., Браун М., Морозов П., Тен Хув Дж.Дж., Бен-Дов И.З., Ховестадт В. и др.Биоинформатический анализ библиотек кДНК со штрих-кодом для профилирования малых РНК с помощью секвенирования следующего поколения. Методы. 2012. 58 (2): 171–87. pmid: 22836126; PubMed Central PMCID: PMC3597438.
  30. 30. Friedlander MR, Mackowiak SD, Li N, Chen W., Rajewsky N. miRDeep2 точно идентифицирует известные и сотни новых генов микроРНК в семи кладах животных. Nucleic Acids Res. 2012; 40 (1): 37–52. pmid: 215; PubMed Central PMCID: PMC3245920.
  31. 31. Макрэ И.Дж., Чжоу К., Ли Ф., Репик А., Брукс А.Н., Канде В.З. и др.Структурная основа процессинга двухцепочечной РНК с помощью Dicer. Наука. 2006. 311 (5758): 195–8. pmid: 16410517.
  32. 32. Чен XS, Коллинз Л.Дж., Биггс П.Дж., Пенни Д. Высокопроизводительный полногеномный обзор малых РНК паразитарных простейших Giardia Кишечник и Trichomonas vaginalis. Genome Biol Evol. 2009; 1: 165–75. pmid: 20333187; PubMed Central PMCID: PMC2817412.
  33. 33. Хуанг П.Дж., Лин В.К., Чен С.К., Линь Ю.Х., Сунь С.Х., Лю П.С. и др. Идентификация предполагаемых miRNA из одноклеточных жгутиконосцев с глубоким ветвлением.Геномика. 2012; 99 (2): 101–7. Epub 2011/11/29. pmid: 22120185.
  34. 34. Ли В., Сарайя А.А., Ван СС. Профиль микроРНК, полученных из snoRNA, которые регулируют экспрессию вариантных поверхностных белков в Giardia lamblia. Клеточная микробиология. 2012. 14 (9): 1455–73. Epub 2012/05/10. pmid: 22568619; PubMed Central PMCID: PMC3422372.
  35. 35. Сарайя А.А., Ли В., Ван СС. МикроРНК, полученная в результате очевидного канонического пути биогенеза, регулирует экспрессию гена вариантного поверхностного белка в Giardia lamblia.РНК. 2011. 17 (12): 2152–64. pmid: 22033329; PubMed Central PMCID: PMC3222128.
  36. 36. Сарайя А.А., Ван СС. snoRNA, новый предшественник микроРНК в Giardia lamblia. PLoS Pathog. 2008; 4 (11): e1000224. Epub 2008/12/02. pmid: 1
    37. 59; PubMed Central PMCID: PMC2583053.
  37. 37. Чжан Ю.К., Чен Д.Л., Тиан Х.Ф., Чжан Б.Х., Вэнь Дж.Ф. Полногеномная вычислительная идентификация микроРНК и их мишеней в глубоко ветвящихся эукариотах Giardia lamblia. Comput Biol Chem.2009. 33 (5): 391–6. pmid: 19716768.
  38. 38. Менингер Т., Лерман Г., Регев-Рудски Н., Голд Д., Бен-Дов И.З., Сиди Ю. и др. Шистосомные микроРНК, выделенные из внеклеточных пузырьков в сыворотке инфицированных пациентов: новый инструмент для диагностики и наблюдения за шистосомозом человека. J Infect Dis. 2017; 215 (3): 378–86. pmid: 28362903.
  39. 39. Ян Дж, Чжан Н., Ци С., Лю X, Шангуань Д. Одношаговая ОТ-ПЦР в реальном времени для обнаружения микроРНК. Таланта. 2013; 110: 190–5. Epub 2013/04/27.pmid: 23618193.
  40. 40. Chen C, Ridzon DA, Broomer AJ, Zhou Z, Lee DH, Nguyen JT и др. Количественное определение микроРНК в режиме реального времени с помощью ОТ-ПЦР «стержень-петля». Nucleic Acids Res. 2005; 33 (20): e179. Epub 2005/11/30. pmid: 16314309; PubMed Central PMCID: PMC1292995.
  41. 41. Хаджиан-Тилаки К. Анализ кривой рабочих характеристик приемника (ROC) для оценки медицинских диагностических тестов. Каспийский журнал внутренней медицины. 2013. 4 (2): 627–35. pmid: 24009950; PubMed Central PMCID: PMC3755824.
  42. 42. Оберхубер G, Stolte M. Лямблиоз: анализ гистологических изменений в биоптатах 80 пациентов. J Clin Pathol. 1990. 43 (8): 641–3. Epub 1990/08/01. pmid: 2401732; PubMed Central PMCID: PMC502644.
  43. 43. Зафар М.Н., Бакай Р., Лоди Т.З., Ахмад С., Ахмед В., Куреши Н. и др. Giardia lamblia у пациентов, перенесших верхнюю G.I. эндоскопия. J Pak Med Assoc. 1991. 41 (4): 74–5. Epub 1991/04/01. pmid: 1861341.
  44. 44. Гупта С.К., Кроффи Дж. М., Пфефферкорн, доктор медицины, Фицджеральд Дж. Ф.Диагностическая ценность дуоденального аспирата на G.

    No related posts.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *