PRF-терапия в Стоматологии, цена в Киеве

Содержание

PRF – Фибрин, обогащенный тромбоцитами (Platelet-reach fibrin). PRF в стоматологии – терапевтическая методика, повышающая эффективность оперативного вмешательства, облегчающая послеоперационный и реабилитационный период.

PRF терапия — это одна из современных методик регенеративной медицины. Собственные клетки крови пациента способны в разы увеличить скорость и качество заживления. Благодаря PRF мембране, последствия хирургического лечения зубов и оперативного вмешательства в мягкие ткани в стоматологии будут максимально сглажены и незаметны.

Методика получения PRF препарата

Существует несколько видов PRF терапии, в том числе A-PRF и I-PRF. Данный препарат — это часть плазмы, полученной из крови пациента, с высоким содержанием фибрина. В ней также много тромбоцитов и активных элементов для роста сосудистых тканей. Обычная PRF мембрана изготавливается в пластиковой пробирке с активатором плазмы. Или в пробирках из стекла, которое само по себе является таким активатором. При высокой скорости центрифуги, за 8-12 мин прямо в кабинете врача можно получить препарат.
Метод A-PRF терапии (Advanced Platelet Riches Fibrin) был впервые разработан в международном учебном центре в Ницце. Технологии получения PRF материала схожи. Различие только в скорости обработки и некоторых нюансах приготовления высокотехнологичного застывшего фибрина, богатого тромбоцитами. Аутогенные фибриновые мембраны в разы ускоряют заживление послеоперационных ран, регенерации тканей.
Источником I-PRF (инъекционная PRF мембрана) тоже является кровь пациента. С помощью центрифуги с другим режимом обработки получают фибрин из мембраны с консистенцией тягучей жидкости, которую хранят в стерильной вакуумной пробирке. Это застывшая плазма в чистом виде, которая загустеет в течение 10 минут.
Крови для проведения PRF терапии нужно немного. Примерно как для обычного анализа из вены.

Чем полезен фибрин, получен с помощью PRF терапии

Отработанная и проверенная на эффективность инновационная методика PRF позволяет избежать воспалений, стимулирует рост тканей. Полученная из собственной крови PRF мембрана не вызовет отторжения или неприятных реакций, как при использовании искусственных материалов.
Терапия имеет следующие преимущества:

• препарат богат лейкоцитами и факторами роста сосудистого эндотелия;
• фибрин PRF помогает успешно восстановить твердые и мягкие ткани человека;
• отпадает необходимость в биохимических добавках;
• происходит стимуляция заживления ран;
• препарат не вызывает аллергических реакций;
• технология фибринового сгустка биологична, безопасна и дает массу плюсов.

Показания к использованию PRF терапии

Фибрин препятствует кровотечению и способен сам стать частью ткани. Например, фибриновый сгусток, помещенный в лунку после удаления зуба, защищает от воспаления и стимулирует рост кости.
Основной эффект PRF терапии — стимуляция роста кровеносных сосудов. Поэтому сфера применения касается следующих действий:

• установка имплантатов;
• синус-лифтинг;
• лечение пародонтита, пародонтальных дефектов;
• трансплантация тканей;
• расщепление гребней;
• удаления зубов (заживление ран, лунок), для возможности сохранения объема, высоты и формы кости;
• кровоточивость и рыхлость десны;
• воспалительные процессы в ротовой полости;
• костная пластика;
• альвеолиты;
• подвижность зубного ряда;
• вертикальное наращивание кости;
• осложнения после челюстно-лицевых травм и операций;
• гингивиты.

А также другие проблемы, связанные с заживлением и восстановлением тканей.

Противопоказания к PRF терапии

К сожалению, у этой уникальной биотехнологии тоже есть противопоказания.
К ним относятся:

• гепатиты;
• вирус иммунодефицита человека;
• проблемы обмена веществ;
• ОРЗ и другие инфекционные болезни;
• непереносимость антикоагулянта;
• расстройства психики;
• опухолевые новообразования.

Беременность и лактация не являются противопоказаниями. Но все же стоит проконсультироваться у специалиста о целесообразности процедуры.

Процедуры A-PRF и I-PRF в клинике «Мед-Део»

В нашей клинике применяется терапия по I-PRF и A-PRF технологиям. Современные аппараты качественно отделяют плазму. Цены в нашей клинике доступны, поэтому убедиться лично в мощном положительном эффекте терапии может каждый желающий. Для этого стоит записаться на прием к нашим специалистам, заполнив форму на сайте, или связавшись с нашим менеджером по телефону. Позаботьтесь о своей идеальной улыбке уже сейчас!

Автор стоматолог-пародонтолог Томашевская Елена Анатольевна

Технология APRF / APRF / Остеопластические материалы

---

применение в клинической практике

 

 

 

 

Профессор Джозеф Чукрун,

создатель и разработчик методики A-PRF, I-PRF, L-PRF, директор международного учебного центра и собственной клиники по проблемам боли (г.Ницца). Известный международный спикер, автор большого количества научных статей.

 

 

 

 

Хабиев Камиль Наильевич,

к.м.н., сертифицированный имплантолог Европейской Ассоциации Остеоинтеграции, член ICOI, эксперт международного исследовательского центра MINEC, президент группы компаний Дентал Гуру

---

 

Богатый тромбоцитами фибрин (PRF — Platelet Rich Fibrin) – это фибриновый матрикс, содержащий в себе цитокины, факторы роста и белые кровяные клетки, и способный выделять их продолжительное время.

Может использоваться как в виде сгустков, так и в виде мембран. Профессор Чукрун является одним из пионеров в исследовании свойств PRF. Усовершенствованный APRF (Advanced PRF) является плодом его многолетних исследований.

Одним из важнейших элементов регенерации являются тромбоциты, являющиеся аутологичным источником факторов роста. Попытка использования богатой тромбоцитами плазмы (PRP) сталкивалась со следующими проблемами: необходимость двойного центрифугирования с добавлением антикоагулянтов, индукция полимеризации тромбоцитарного концентрата с помощью хлорида кальция и бычьего тромбина, отсутствие доказательной базы эффективности этой технологии.

Почему PRP не показало тех результатов, на которые рассчитывали исследователи? Ответ связан с механизмом регенерации.

Согласно исследованиям Choukroun (2001), Kevy (2001), Marx (2004, 2005)

Тромбоциты могут секретировать факторы роста только после образования фибринового сгустка

Хотя тромбоциты и лейкоцитарные цитокины играют важную роль, но только фибрин, удерживающий и поддерживающий их, способен придать им терапевтический потенциал. Гармония между цитокинами и поддерживающей их фибриновой матрицей играет большую роль, чем все остальные составляющие.

Концентрация тромбоцитов практически одинакова и при получении PRP и при получении APRF, но количество лейкоцитов значительно меняется.

Благодаря большому количеству лейкоцитов, выделение факторов роста происходит медленно и постепенно

Благодаря длительному (более 7 дней) выделению факторов роста, APRF способствует быстрейшей регенерации ткани (костной ткани, десны и др.).

Для получения APRF используются особые пробирки. Благодаря специальным, одноразовым, стерильным пробиркам и определенному времени центрифугирования, в фибриновой матрице концентрируется максимальное количество тромбоцитов и лейкоцитов, факторов роста и иммуной защиты, что стимулирует ангиогенез и создает благоприятные условия для восстановления поврежденного участка.

 

Сравнение классической технологии PRF и модифицированной методики APRF. Ускорение васкуляризации в 2,5 раза (сокращение сроков до 2-х недель). Большая концентрация стволовых и эндотелиальных клеток.

Режим получения APRF задается автоматически (в центрифуге Scilogex), либо вручную. В центрифуге Scilogex нет необходимости вручную выставлять режимы — они переключаются автоматически одним движением!

Для получения APRF в ручном режиме необходимо выставить следующие показатели:

скорость вращения 1300 об/мин, время – 8 минут.

В отличие от других вариантов получения плазмы, богатых тромбоцитами – PRP (plated rich plasma) и факторами роста – PRGF (plasma rich growth factors), при получении APRF не используются антикоагулянты, что несомненно сказывается на качестве сгустков.

Методика получения APRF предельно проста. Для этого не требуются специальные навыки и оборудование. Она проводится непосредственно перед хирургическим вмешательством.

Вакуумным способом происходит забор крови из вены пациента в специальные пробирки, далее кровь центрифугируется в рекомендованном режиме. Полученные сгустки отжимаются в специальном прессе, в результате чего мы получаем довольно плотные мембраны, которые достаточно прочные, эластичные, отлично обрабатываются с помощью хирургических ножниц, стабильны при комнатной температуре. Методику получения APRF Вы можете посмотреть в разделе видео.

Также они являются хорошей альтернативой коллагеновым мембранам при проведении реконструктивных операций на челюсти (НКР, синус-лифтинг) [3], при восполнении постэкстракционных лунок, для предупреждения развития альвеолита[2], в пародонтальной хирургии, при проведении лоскутных операций [1].

Клинический случай — полноценное восстановление костной ткани через 3 месяца после удаления зубов (использовался только APRF)

Клинический случай — закрытие перфорации мембраны гайморовой пазухи во время синус-лифтинга.

 

 

 

Клинический случай — использование APRF в качестве остеопластического материала при проведении синус-лифтинга. Наблюдается образование кости через 6 месяцев после операции с применением только 

APRF в качестве остеопластического материала.

Клинический случай — закрытие рецессии только с помощью APRF (4 слоя)

Клинический случай — закрытие дефекта на небе после забора СДТ

Клинический случай — закрытие дефекта мягких тканей с помощью APRF

Клинический случай — закрытие обширного дефекта мягких тканей после удаления нерезорбируемой мембраны. На 10 день рана полностью эпителизирована. Через 8 недель на гистологических срезах наблюдается образование тканей десны на месте APRF.

Помимо обширного применения в имплантологии и челюстно-лицевой хирургии, мембраны просто незаменимы в травматологии и общей хирургии, при лечении трофических язв, длительно незаживающих ран и ожогов. Благодаря высокому содержанию лейкоцитов, тромбоцитов и факторов роста происходит стимуляция ангиогенеза и эпителизация поврежденных участков.

Клинический пример — лечение синдрома Лайеля (некроз кожи):

Клинический пример — лечение осложнений при ампутации пальцев ног при сахарном диабете:

Достоинства APRF очевидны. Это простота и экономичность, 100% аутогенная методика, так как получается из собственной крови пациента, высокое содержание всех форм лейкоцитов и тромбоцитов, а также медленное выделениефакторов роста. Все это улучшает регенерацию тканей и результат проводимого лечения.

К сожалению, некоторые производители выдают обычные пластиковые пробирки за технологию APRF. Но это не так! Оригинальные пробирки APRF от профессора Джозефа Чукруна изготовлены из закаленного стекла, каждая пробирка запечатана в одноразовую упаковку, поэтому стерильна и может использоваться хирургом во время операции.

Только в оригинальных пробирках есть достаточная концентрация факторов роста.

Внешне отличить сгусток, полученный в пластиковой пробирке от сгустка, полученного в оригинальной стеклянной пробирке, не просто. Это как настоящая таблетка с лекарством и пустышка — внешне выглядят одинаково, но результат будет разный.

Область применения APRF

1. Мембрана для изоляции остеопластического материала при костной пластике и НКР
2. Закрытие перфораций при синус-лифтинге
3. В качестве остеопластического материала при синус-лифтинге
4. Как соединительно-тканный трансплантат (закрытие рецессий десны)
5. Для сохранения костной ткани в лунках после удаления зубов (socket preservation)

6. Для профилактики альвеолитов
7. Для стимуляции роста кровеносных сосудов (ангиогенеза)
8. Для остановки кровотечения (гемостаза)
9. Для получения пластилиноподобного костного графта
10. В дерматологии, косметологии, общей хирургии для заживления ран и лечения воспалительных процессов

Что Вам даст использование модифицированного улучшенного APRF:

1. Возможность отказаться от использования ксеногенных, аллогенных и искусственных мембран и получить биосовместимую аутогенную мембрану

2. Получить до 20 мембран с максимальной биосовместимостью и очень низкой себестоимостью (1,5-2 $)
3. Добиться быстрейшего заживления и образования костной ткани за счет стимуляции ангиогенеза
4. Существенно уменьшить количество осложнений
5. Избежать необходимости забора соединительно-тканного трансплантата
6. Значительно улучшить качество НКР за счет пластилиноподобной консистенции графта
7. На порядок удешевить процедуру костной пластики

Список литературы:

1. Influence of PRF in the healing of bone and gingival tissues. Clinical and histological evaluations.Marrelli M, Tatullo M.Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2013 Jul; 17(14):1958-62.

2. Effects of platelet-rich fibrin and piezosurgery on impacted mandibular third molar surgery outcomes.Uyanık LO, Bilginaylar K, Etikan I. Head Face Med. 2015 Jul 26; 11:25. doi: 10.1186/s13005-015-0081

3. Additional Effects of Platelet-Rich Fibrin on Bone Regeneration in Sinus Augmentation WithDeproteinized Bovine Bone Mineral: Preliminary Results.Tanaka H, Toyoshima T, Atsuta I, Ayukawa Y, Sasaki M, Matsushita Y, Hiraoka R, Koyano K, Nakamura S.Implant Dent. 2015 Jul 22. Состав стартового набора для получения APRF и i-PRF Состав полного набора для получения APRF и i-PRF

Состав стартового набора для получения APRF и i—PRF

 

 

Отзывы

Отзыв появится после модерации

Наращивание костной ткани (prf мембрана) зубов в Вишневом

Наращивание костной ткани

Современная стоматология стремительно развивается и добивается поразительных результатов. Сегодня можно нарастить костную ткань и полностью восстановить зубной ряд. Благодаря новейшим методикам костная пластика осуществляется очень быстро, практически не вызывая дискомфорта.

Зачем нужна костная пластика

В результате травмы или неправильно выполненной экстракции зуба челюстная кость может повредиться. Кость также может разрушить хронический воспалительный процесс или абсцесс. После удаления зуба костная ткань перестает испытывать давление, поэтому в ней начинаются атрофические процессы. Они приводят к уменьшению костной массы. В верхней челюсти атрофические процессы развиваются быстрее, чем в нижней, потому что плотность ее кости ниже.
Если дефект кости сильно выражен, восстановить зубной ряд с помощью протезирования или имплантации невозможно. Надо сначала нарастить объем костной ткани и восстановить ее естественный анатомический рельеф.

Методы остеопластики

Существует несколько методов остеопластики в стоматологии:

• расщепление альвеолярного отростка;
• направленная костная регенерация;
• пересадка костного блока;
• синус-лифтинг.

Расщепление альвеолярного отростка осуществляют, если костная ткань уменьшилась в объеме незначительно. Метод направленной костной регенерации используется в случаях, когда обнаружена атрофия средней степени. Сильно выраженный дефект помогает исправить подсадка костной ткани. Синус-лифтинг назначают, когда нужно восстановить костную ткань в области зубов, расположенных рядом с гайморовыми пазухами.
В настоящее время остеопластика выполняется с использованием PRF-мембраны. Технологии PRF в стоматологии (APRF и IPRF) используются для уменьшения боли, устранения отека, снижения вероятности инфицирования и ускорения заживления тканей. PRF-мембрану создают из компонентов крови пациента, поэтому она не вызывает отторжения. Костная пластика в стоматологии считается одной из самых сложных операций, поэтому выполнять ее должны только высококвалифицированные и опытные хирурги-стоматологи.

Преимущества проведения остеопластики клинике Dent-U

В клинике Dent-U созданы все условия для успешной имплантации костной ткани. Преимуществами медицинского учреждения в Вишневом являются:

• опытный и высококвалифицированный персонал;
• проведение всех видов остеопластических операций с использованием методики PRF;
• наличие современного оборудования, инструментов и материалов;
• индивидуальный подход;
• безопасность;
• доступная цена.

В Вишневом восстановлением костной ткани зубов занимаются хирурги-стоматологи, которые имеют опыт работы более 10 лет. Они подбирают вид операции, учитывая индивидуальные особенности пациента. Для наращивания используется биогенный (натуральный) или минеральный (искусственный) материал, который стоит недорого. Все манипуляции выполняются с помощью анестезии, поэтому они не доставляют пациентам дискомфорта.
Костная пластика челюстей в Вишневом осуществляется с помощью новейшего оборудования. Благодаря использованию PRF-мембраны наращивание костной ткани происходит быстро. Оно может выполняться одновременно с имплантацией. PRF-мембрана увеличивает вероятность благополучного приживления искусственного материала. В клинике имеется максимально возможное количество одноразовых материалов и инструментов, поэтому вероятность осложнений ничтожно мала. Стоимость услуг зависит от вида используемых материалов.

Как обратиться в стоматологическую поликлинику Dent-U

Записаться на прием к врачу можно на сайте стоматологической поликлиники, заполнив соответствующие поля. В ближайшее время с клиентом свяжется сотрудник учреждения. Он подберет удобное для пациента время приема. Медицинский работник ответит на все вопросы клиента – о методах наращивания кости в стоматологии и стоимости услуг.
Стоматологическая клиника находится в Вишневом на улице Европейской. До нее можно быстро доехать из Киева, а также из Крюковщины и Софиевской Борщаговки. В стоматологической клинике имеется гибкая система скидок. Благодаря ей цена медицинской помощи вполне доступная.

PRF терапия в Новосибирске, цены

PRF-методика (биологическая мембрана) в стоматологии.

PRF – это методика, при помощи которой получают тромбоциты с высоким содержанием фибрина (фибриновой пленки).

Фибрин – это высокомолекулярный белок, который играет важнейшую роль в предотвращении воспалительного процесса. Он защищает организм от распространения болезнетворных агентов и токсинов, т.е. не даёт воспалению распространиться.

Для чего нужна данная технология? Показания.

PRF – биологическая мембрана, которая снижает риски постоперационных осложнений и используется в стоматологии:

• при костной пластике,
• при закрытии перфораций (открытый синус-лифтинг),
• при пластике мягких тканей,
• для сохранения костной ткани в лунках после удаления зубов,
• для профилактики альвеолита.

Самое важное – PRF позволяет заменить любые искусственные мембраны и получить биосовместимую мембрану с очень низкой себестоимостью.

Данный метод способствует быстрому заживлению и восстановлению прооперированного участка, образованию новых кровеносных сосудов, необходимых для приживления костного трансплантата.

Как получают?

В процессе процедуры используется кровь самого пациента, которую помещают в специальный аппарат и трансформируют (центрифугируют). В конце цикла получают ту самую структуру крови пациента – фибрин.

Какие преимущества у PRF технологии?

• полная безопасность;
• значительное сокращение сроков заживления после хирургического вмешательства;
• значительное ускорение сроков имплантации;
• исключен риск возникновения аллергической реакции;
• полная естественность процесса получения фибриновой пленки, т.к. используется собственная кровь пациента;
• безболезненность проведения процедуры;
• отсутствие противопоказаний к проведению манипуляции.

PRF (PRP) заметно повышает уровень комфорта стоматологического лечения: сокращает сроки заживления и тем самым минимизирует связанные с этим болезненные, дискомфортные ощущения.

Чтобы записаться на консультацию в Стоматологию «32» и узнать подробнее о PRF-технологиях, позвоните нам по номеру 8 (383) 349-93-32.

PRF в стоматологии

Удаление зуба является хирургической операцией, после которой иногда возникает ряд осложнений, а именно боль, отечность, кровоточивость, восполение, альвеолит и др.

Для сокращения сроков заживления послеоперационной раны, снятия болевого синдрома и отечности применяют PRF технологию. Что это такое?

Технология PRF — это инновационная медицинская технология получения тромбоцитов с высоким содержанием фибрина или, говоря иначе, фибриновой пленки.

Тромбоциты — это клетки крови, отвечающие за восстановление поврежденных тканей.

Фибрины — это высокомолекулярные белки, которые играют важнейшую роль в предотвращении воспалительного процесса. Они защищают организм от распространения болезнетворных агентов и токсинов, т.е. не дают воспалению распространиться.

Показания к применению PRF

1. После удаления зубов:

— для уменьшения болезненных ощущений и сокращения сроков заживления

— для сохранения высоты, объема и формы кости.

2. При лечении пародонтита

3. При установке имплантатов и костно-пластических операциях в области объемных дефектов.
 

Насколько это безопасно?

Абсолютно безопасно. В данном случае для ускорения заживления применяются не какие-то химические, медикаментозные препараты или донорские материалы. Для получения фибриновой пленки используется кровь самого пациента.

Т.е. кровь пациента обрабатывается таким образом, что ее восстанавливающие, регенерирующие свойства многократно увеличиваются. Получается, что заживлением занимается сам организм пациента, только этот процесс значительно ускорен.

Важно, что данная технология прошла многочисленные исследования, многократные апробации и признана официально. По поводу плазмотерапии не существует никаких спорных вопросов.

Как происходит получение фибриновой пленки?

Для этого у пациента берется кровь из вены. Она помещается в специальную центрифугу.

В результате центрифугирования, которое занимает чуть более 10 минут, кровь разделяется на две фракции. Одна из них — это тромбоциты с высоким содержанием фибрина. Из них изготавливается специальный препарат — мембрана, которая накладывается на рану после удаления зуба или место имплантации.

Преимущества PRF-технологии:

— значительное сокращение сроков заживления после хирургического вмешательства

— значительное ускорение сроков имплантации

— практически полное отсутствие риска попадания инфекции в послеоперационную рану

— аллергические реакции полностью исключены

— полная естественность процесса получения фибриновой пленки, т.к. она получается из крови самого пациента

В стоматологии «Фларт» практически все сложные удаления  проводят с применением данной технологии.

 

Восстановление после стоматологических операций

Использование аутогенного (собственного) специально обработанного биоматериала в стоматологии

Как использование технологии A-PRF позволяет быстрее и комфортнее восстанавливаться после стоматологических операций, рассказывает Кирилл Барков, врач — стоматолог-хирург-ортопед центра «ПрофСтом».

Аутогенный богатый тромбоцитами фибрин (PRF) используется в нашей клинике в качестве дополнительного фактора, который способствует регенерации тканей в области хирургической операции, например, при восстановлении костной ткани после удаления зубов, при подготовке к имплантации и операции синус-лифтинга.

A-PRF – это аутогенный богатый тромбоцитами фибрин нового поколения, применяемый при заживлении ран. По сути дела, A-PRF создает условия для скорейшего заживления раневой поверхности, восстановления собственной костной ткани, убыль которой наблюдается, например, после удаления зубов, минимизирует риск возникновения воспаления в послеоперационный период и снижает болезненность.

Как это работает?

A-PRF (аутогенный богатый тромбоцитами фибрин) принадлежит к новому поколению тромбоцитарных концентратов, получаемых без биохимической обработки крови. Биоматериал изготавливается из крови пациента, которую мы забираем непосредственно перед операцией. После разделения крови на фракции в специальной центрифуге, врач через несколько минут получает уникальный «родной» пациенту материал, который не будет отторгаться его организмом. Благодаря специальной обработке полученный нами биоматериал представляет собой фибриновую основу с включениями тромбоцитов, лейкоцитов, макрофагов, цитокинов, а также медленно выделяющихся в больших количествах основных факторов роста (трансформирующий фактор роста, тромбоцитарный фактор роста, эндотелиальный фактор роста сосудов). По сути, это не только полностью готовый заживляющий концентрат, но и «иммунный узел», содержащий все молекулярные и клеточные элементы, необходимые для оптимального заживления раны, регенерации сосудистой сети, уничтожения патогенных бактерий. A-PRF способствует быстрому снятию воспаления, боли, отеков. Как следствие, послеоперационный период для наших пациентов, даже после серьезного хирургического вмешательства, протекает максимально комфортно.

Сам процесс

Фибриновые мембраны и «костный клей», полученные по технологии A-PRF, мы используем во время хирургического вмешательства для покрытия раневых поверхностей: лунки удаленного зуба; области проведения операции синус-лифтинга; тканей десны при пародонтологических вмешательствах; костной ткани в области операции имплантации.

В каких случаях применяется технология A-PRF?

Операция дентальной имплантации.

Синус-лифтинг (поднятие гайморовой пазухи).

Хирургическое лечение заболеваний пародонта.

«Консервация» лунок после удаления зубов.

НКР (направленная костная регенерация).

Какое оборудование применяется?

Для получения биоматериала A-PRF в нашей клинике мы используем специальные сертифицированные пробирки BD Vacutainer для забора крови, сертифицированную в России клиническую центрифугу Scilogex DM0412 производства США, позволяющую получать аутогенный богатый тромбоцитами фибрин в разных агрегатных состояниях (фибриновая мембрана и «костный клей»), что облегчает нашу работу и расширяет показания к применению данной технологии в различных клинических условиях.

Кстати

«Консервация» лунки удаленного зуба – ряд методик и манипуляций, выполняемых хирургом-стоматологом после удаления зуба, которые позволяют добиться максимально быстрого заживления раны, препятствуют атрофии костной ткани, а также способствуют восстановлению оптимального объема альвеолярной кости.

Применение A-PRF при консервации лунки позволяет нам добиться:

при протезировании несъемными ортопедическими конструкциями (мостовидными протезами) – красивой эстетики десневого края в области отсутствующих зубов;

при протезировании съемными протезами — ровного альвеолярного гребня, обеспечивающего максимальное удобство и фиксацию съемного протеза;

при операции имплантации — достаточного объема костной ткани для проведения успешной операции.

Для получения более полной информации, пожалуйста, обратитесь за консультацией к врачу-хирургу ООО «Центр профессиональной стоматологии» (ООО «ПрофСтом»).

ООО «Центр профессиональной стоматологии» (ООО «ПрофСтом») г. Тула, ул. Макаренко, д. 9-б, офис 2

Телефоны: (4872) 52-62-25, +7-910-550-67-92

Время работы: понедельник-пятница с 9.00 до 20.00, суббота с 9.00 до 15.00, воскресенье выходной.

Лицензия на медицинскую деятельность № ЛО-71-01-001801 от 25 августа 2017г выдана Министерством Здравоохранения Тульской области.

О возможных противопоказаниях необходимо проконсультироваться со специалистом

Костная пластика RecoDent|Стоматология| PRF в стоматологии

Костная пластика в стоматологии

Многих волнует вопрос о том, что такое костная пластика. Это — операционная процедура восстановления поражённой челюстной костной ткани при частичном/полном отсутствии зубов. Уместна при атрофии зуба, его патологических процессах и т.д. Также костная пластика имеет и другие названия: синус-лифтинг, костная аугментация, остеопластика. Операция позволит создать достаточное для проведения имплантация зуба пространство, убрать эстетические дефекты и восстановить прежнее состояние ротовой полости. В некоторых случаях процедура проводится сразу перед имплантацией зуба, но иногда проводится и в качестве отдельной операции.

«Костная пластика цена Киев» — этим запросом пестрят поисковики. Узнайте о подробностях проведения процедуры, стоимости и видах операций из нашей статьи.

PRF в стоматологии

PRF, или фибриновая мембрана предназначена для проведения костной пластики. Она делает заживление более эффективным и безопасным. Фибрин с высоким содержанием тромбоцитов является аутоматриксом, выделяемым из крови. Процедура, сделанная на его основе позволяет отказаться от остальных биохимических добавок и не использовать дополнительные вещества, стимулирующие процесс заживления.

Виды костной пластики

На данный момент выделяют несколько видов костной пластики:

• Костная пластика верхней челюсти.
• Костная пластика нижней челюсти.
• Костная пластика ладьевидной кости.

Каждый вид имеет свои показания и противопоказания. Костная пластика альвеолярного отростка применяется при его атрофических процессах:

1. Горизонтальная атрофия.
2. Вертикальная атрофия.
3. Комбинированная атрофия.

Костная пластика в стоматологии: цена

Большинство клиентов волнует вопрос цены данной процедуры, так как считается, что хирургическое вмешательство по репозиции и восстановлении стоит довольно дорого. Костная пластика — стоимость зависит от типа операции и её технологии. К примеру, операции, имеющие высокий риск являются более дорогостоящими, ведь от врача-стоматолога требуется больше аккуратности и внимательности. Также стоимость зависит от используемого для имплантации материала: высококачественные заменители костной ткани стоят дороже.

Если вы вводите запрос «костная пластика цена в Украине», вас наверняка удивит разнообразие бюджета различных операций. Всё дело в том, что стоимость зависит от характеристик проведения.

Имплантация зубов: костная пластика

Имплантация зубов в костной пластике имеет разнообразное количество методов проведения. Существует несколько типов материалов, с помощью которых проводится операция:

• Аутогенный материал. Применяется кусочек кости, полученный у самого клиента. Считается, что такая операция имеет минимальные риски, так как процент приживления импланта всегда высок.
• Аллогенный материал. Заключается во взятии донорского материала, менее распространённая практика.
• Аллопластический. В этом случае имплант выполнен из составляющих синтетического типа, базирующихся на основе фосфата кальция.
• Ксеногенный. Имеет вид гранул или костных блоков, создан с помощью животных костей. Довольно распространённый вариант в наше время.

Костная пластика для имплантации зубов имеет свои разновидности:

1. Расщепление альвеолярного отростка. Рекомендуется для реабилитации нескольких зубов, поражённых горизонтальной атрофией. В толщину отросток должен быть 2 и меньше миллиметров.
2. Синус-лифтинг. Восстановление жевательных зубов в челюстной области. Применяется достаточно часто.
3. Имплантация костного блока. Рекомендуется при всех видах атрофии.
4. Направленная костная регенерация. Рекомендуется при малой комбинированной атрофии. Если у вас достаточно тонкая челюстная ткань, данный операционный метод поспособствует её утолщению.

Кому не рекомендована пластика

Не всегда проблемы могут быть решены благодаря процедуре наращивания костной ткани. Среди противопоказаний к применению выделяют:

• Остеопороз, повышенная ломкость костей.
• Беременность, период кормления грудью.
• Болезни крови.
• Иммунодефицитные состояния.
• Психические заболевания.

Также процедуру нельзя провести, если во рту обнаружены ранки, инфекции, язвы; недостаточное покрытие зуба костной тканью. В случае, когда клиент имеет ощутимые дефекты зубов, цена костной пластики может быть выше — перед процедурой проводится лечение повреждённых участков и их реабилитация.

 

Более быстрый способ вылечить? PRP и PRF в стоматологии

Christopher H. Hughes, DMD, FAGD, DABOI, FAAID, использует фибрин, богатый лейкоцитами и тромбоцитами (L-PRF), для хирургических процедур в своей клинике в Херрине, штат Иллинойс, включая пересадку лунок мягких тканей трансплантация, костная пластика и большинство процедур установки имплантатов. Он сказал, что L-PRF «похож на чудодейственное лекарство».

«Через неделю после операции обычно в месте хирургического вмешательства, где использовался L-PRF, казалось, что оно заживает в течение трех или четырех недель», — сказал Хьюз.«Это значительно ускоряет каскад исцеления».

Богатый тромбоцитами фибрин (PRF) и его предшественник, обогащенная тромбоцитами плазма (PRP), относятся к категории концентратов аутологичной крови, которые представляют собой продукты крови, полученные с использованием собственной крови пациента. Врач берет образец крови у пациента, затем концентрирует его с помощью центрифуги для разделения различных компонентов крови на отдельные концентрированные слои, которые может использовать врач. Несмотря на то, что сегодня существует несколько вариантов этой технологии, в которых приоритет отдается различным компонентам крови, общая концепция в стоматологии такая же — они используют собственную кровь пациента для улучшения заживления после хирургической операции на полости рта.

И быстрое выздоровление — лишь одно из преимуществ, — сказал Хьюз. Говоря конкретно о вариации L-PRF, он отметил обширный список преимуществ для пациентов и стоматологов: он уменьшает кровотечение во время операции и уменьшает воспаление. Он улучшает первичное закрытие хирургических лоскутов. L-PRF «богат» лейкоцитами, поэтому риск послеоперационной инфекции снижается. А поскольку он сделан из собственной крови пациента, риск аллергического или иммунологического отторжения исключается.Наконец, Хьюз сказал, что это недорого и просто в изготовлении.

«За 30 лет моей клинической практики не было другого лекарства, устройства или техники, которые бы делали все это так, как L-PRF», — сказал Хьюз.

Концентраты аутологичной крови могут помочь пациентам во время и после челюстно-лицевой хирургии, но стоматологи общего профиля часто сталкиваются с трудностями при добавлении PRP / PRF в свою практику. Проблемы, связанные с добавлением использования концентратов аутологичной крови, включают ориентирование на растущий рынок оборудования, понимание различных вариантов и способов их использования, а также интерпретацию результатов исследований по их использованию в стоматологии.

---

Обязательно ознакомьтесь с нашим предстоящим вебинаром PRF: методы и применения для случаев дентальных имплантатов.

---

PRP и PRF: важные различия, которые должен понимать общий стоматолог

PRP и PRF — это не одно и то же, хотя и практикующие, и исследователи использовали эти термины как синонимы, сказал Ричард Дж. Мирон, DDS, BMSc, MSc. Доктор медицинских наук, соредактор публикаций «Биоматериалы нового поколения для регенерации костей и пародонта» и «Фибрин с высоким содержанием тромбоцитов в регенеративной стоматологии: биологические предпосылки и клинические показания».«PRP был впервые использован при хирургических вмешательствах в полости рта в 1997 году и относится к обогащенному тромбоцитами концентрату, смешанному с антикоагулянтами, — сказал Мирон. PRF был представлен в 2001 году как концентрат тромбоцитов второго поколения без использования антикоагулянтов. ¹

«Данные из многих областей медицины ясно продемонстрировали превосходные результаты PRF по сравнению с PRP, поскольку свертывание крови является важным событием во время заживления ран», — сказал Мирон.

Он говорит, что преимущества использования PRP и PRF заключаются в их способности способствовать регенерации тканей при относительно низких затратах.«Использование PRP, как правило, больше не рекомендуется для клинического использования, поскольку у него есть два основных недостатка», — сказал Мирон. «Во-первых, он содержит антикоагулянты и, следовательно, предотвращает свертывание крови после повторной имплантации пациентам. Во-вторых, одноразовые наборы для забора крови обычно стоят дороже в расчете на одного пациента ».

Однако аргумент, что PRP «всегда» использует антикоагулянт, оспаривается Аруном К. Гаргом, DMD, одним из первооткрывателей PRP.

«В первые дни использования PRP мы иногда пропускали антикоагулянт, исходя из того, насколько быстро нам нужно было использовать материал», — сказал Гарг.«Для более длительных операций мы добавляли антикоагулянт, чтобы сохранить факторы роста, полученные из тромбоцитов, до тех пор, пока мы не будем готовы использовать материал, а затем мы вызывали свертывание крови во время использования».

Хьюз, который в своей практике использует исключительно PRF, добавил, что необходимость улучшения PRP отчасти объясняется тем, что исходное оборудование PRP было дорогим, а методика была более сложной и трудоемкой — PRP требует двух вращений в центрифуге плюс добавление тромбина, тогда как PRF требует только одного вращения без добавок.

«Первоначально PRP чаще всего использовался в больницах для крупных оральных или пластических операций», — сказал Хьюз. «Для использования в обычном стоматологическом кабинете PRP оказалась непрактичной».

От теории к практике: концентраты крови в клинической стоматологии

Как PRF, так и PRP собираются и производятся аналогичным образом, объяснила Эллен Паулисик, DDS, FAGD, Ребека Зехманн, DDS, и Алекс Кусек, DDS, которые используют PRF в своей практике на острове Дэниел, штат Южная Каролина.

Они объяснили, что у пациента берут кровь и помещают во флакон. Затем флакон вращают в центрифуге с заданной скоростью и продолжительностью, при этом PRF выделяется из крови. Полученный PRF представляет собой желтую гелеобразную мембрану, которую затем обычно прессуют в более плоскую мембрану.

«Эти мембраны затем можно адаптировать поверх материала костного трансплантата, объединить с материалом костного трансплантата и / или расположить вокруг или поверх зубного имплантата, чтобы обеспечить биологическую мембрану, которая будет способствовать созреванию кости и улучшать здоровье ороговевшей ткани десны », — сказал Кусек. «PRF также может использоваться в хирургии пародонта в качестве единственного материала трансплантата. Кроме того, этот материал чрезвычайно полезен для заживления перфораций во время увеличения пазухи, предотвращения инфекции и улучшения клинических результатов ».

«Типичное использование PRP включает комбинирование его с PRF и частицами кости для создания« липкой »кости, которую легко адаптировать и манипулировать во рту во время процедур трансплантации», — продолжил Кусек. «Материал PRP также может быть введен шприцем в область трансплантата для повышения стабилизации и введен в окружающие ткани для улучшения заживления.

Клифф Э. Рогге, DDS, FAGD, также использует как PRP, так и PRF в своей практике в Лонгмонте, Колорадо.

«Я использую их в своей практике для костной пластики, смешивая PRP с материалом для костной пластики и помещая его в лунку, после чего сверху следует PRF-мембрана, а затем поверх нее — политетрафторэтиленовая мембрана», — сказал Рогге. «Я также использую PRF в качестве сгустка после любых удалений, в том числе зубов мудрости, чтобы уменьшить сухость лунок и ускорить заживление. Честно говоря, с момента внедрения PRF у меня не было сухой розетки.«Устранение сухих розеток — не единственное преимущество, которое видел Рогге.

«Я не только вижу более быстрое заживление и ускоренный рост костей, но также заметил уменьшение сообщаемой послеоперационной боли при использовании PRP и PRF».

Внедрение технологии на практике

Паулисик, Зехман и Кусек заявили, что технологию PRP / PRF относительно просто добавить в стоматологическую практику. В большинстве случаев, кроме покупки центрифуги, требуется только дополнительное обучение флеботомии.

«Стоматологам разрешено брать кровь в большинстве штатов без формальной сертификации», — сказал Кусек. «Существует множество курсов выходного дня, на которых можно научить основам флеботомии, а также принципам и применению PRF / PRP».

После прохождения курса флеботомии в 2014 году Карл Д. Вертс, DDS, FAGD, FICOI, сказал, что забор крови для PRP / PRF был неотъемлемой частью его практики удаления, костной пластики и других имплантатов в Глендейле, штат Калифорния. и пародонтологические операции.

«Исцелят ли пациенты, если вы не будете использовать PRP / PRF? Совершенно верно, — сказал Вертс. «Но если вы можете получить конечный результат проще, быстрее и с меньшим количеством осложнений, почему бы и вам?»

Затраты на добавление PRP / PRF в общую стоматологическую практику варьируются, в значительной степени обусловленные быстрорастущим бизнесом по производству концентратов аутологичной крови. Эти продукты породили многомиллиардную индустрию, в которой различные производители создают тонкие — иногда проприетарные — вариации центрифуг и флаконов.

«Центрифуги с различными настройками скорости были представлены на рынке, и вариации центрифугирования могут повлиять на жизнеспособность и эффективность клеток внутри», — сказал Вертс. «Является ли это клинически значимым? Не знаю, как это можно измерить ».

Помимо инвестиций в центрифугу и обучения флеботомии, Вертс сказал, что другие расходы, связанные с использованием PRP / PRF в практике, такие как вакуумные пробирки для сбора, иглы-бабочки и пробирки для вытяжки, «минимальны.

«Использование рассасывающихся мембран для процедур трансплантации может стоить от 50 до 100 долларов каждая, — сказал Вертс. «Для сравнения: использование собственной PRF пациента в качестве мембран — это копейки внешних затрат плюс ваше время, за которое можно выставить счет. Существует страховой код для продуктов аутологичной крови, но страховая защита редко оплачивает это. Я часто беру плату за процедуру, а затем считаю ее подарком пациенту ».

Paulisick, Zechman и Kusek подсчитали, что первоначальная стоимость добавления центрифуги и мембранного компрессора PRF к их практике составляла от 2000 до 4000 долларов, а единственная дополнительная стоимость — это одноразовые комплекты для сбора крови, которые обычно стоят менее 10 долларов за контейнер.Из-за конкуренции в отрасли и большого количества центрифуг, доступных на рынке, стоматологи должны иметь возможность найти оборудование в широком диапазоне цен. Исследования показывают, что не может быть значительных различий в качестве PRF, полученного с использованием разных центрифуг, если протокол согласован. ²

«После первоначальных инвестиций эта технология может способствовать лучшим результатам, меньшему количеству неудач и более счастливым пациентам», — сказал Кусек.

Хотя концентраты аутокрови могут широко использоваться в стоматологических кабинетах общего профиля, Мирон сказал, что стоматологи должны консультироваться с имеющимися исследованиями при их применении в своей практике.

«Наша исследовательская группа недавно опубликовала систематический обзор, в котором мы обнаружили, что PRF значительно улучшает клинические результаты восстановления пародонта и мягких тканей», — сказал Мирон. «Несмотря на это, мы также пришли к выводу, что до сих пор не хватает хорошо проведенных исследований, убедительно демонстрирующих роль PRF в индуцировании образования кости (остеоиндукции). Поэтому клиницистов следует проинформировать о том, что PRF обладает большими регенеративными возможностями для мягких тканей, чем для твердых тканей ». ³

Большинство научных исследований подтверждают утверждение Мирона. Данные свидетельствуют о том, что PRP / PRF действительно помогают в процессе заживления, даже в тех случаях, когда уровень улучшения не является статистически значимым. Несмотря на то, что существует множество анекдотических свидетельств, исследователи предполагают, что необходимы более убедительные доказательства.

Перегрузка аббревиатуры: устранение путаницы в отношении вариаций концентрации аутологичной крови

С тех пор, как PRF был впервые использован в хирургических процедурах полости рта в 2001 году, появилось несколько вариантов — L-PRF, A-PRF (расширенный фибрин с высоким содержанием тромбоцитов) и i- PRF (инъекционный фибрин, богатый тромбоцитами).По словам Вертса, этого «достаточно, чтобы у вас закружилась голова от попыток выучить и запомнить их все».

«По сути, все восходит к исходным концепциям PRP / PRF», — сказал он. «Да, преимущества каждого из этих новых« улучшений »можно продемонстрировать с научной точки зрения, но клинически все работает одинаково — все это значительно улучшает заживление».

Хьюз согласился, отметив, что L-PRF, A-PRF и i-PRF — все «второстепенные» варианты PRF. Сорта не требуют специального оборудования, а требуют корректировки протокола центрифугирования (время и силы вращения).

«Чтобы создать различные разновидности PRF, необходимо изменить время, в течение которого кровь вращается, или изменить количество оборотов в минуту (RPM) во время центрифугирования», — пояснил Хьюз.

Первым вариантом PRF была L-PRF, а затем A-PRF. Третья разновидность, i-PRF, представляет собой жидкую инъекционную форму PRF, которая предлагает альтернативу PRP.

«Важно понимать, что PRF обычно находится в форме сгустка», — сказал Хьюз. «Если вам нужно, чтобы PRF был инъекционным, вы просто меняете время центрифуги и число оборотов в минуту, чтобы получить жидкую форму — это i-PRF.”

Без антикоагулянта i-PRF недолго остается жидкостью. Если не вводить быстро, он превращается в липкий клей, похожий на гель, но этот продукт тоже может быть полезен, — сказал Хьюз.

«Это прекрасное дополнение к костной пластике из частиц или блоков, помогающее стабилизировать и иммобилизовать трансплантат», — сказал он. «Я видел отличные результаты, используя его в этом качестве».

Если разновидности, аббревиатуры и номенклатура вводят в заблуждение отраслевых, как стоматолог общего профиля должен объяснять пациентам концепцию концентратов аутологичной крови?

«Я говорю, что это способ уменьшить осложнения, увеличить и ускорить время заживления, заставляя их заживать, как у подростков», — сказал Вертс.«Это более легкая жидкость для процесса заживления».

В отрасли еще есть путь к прояснению путаницы вокруг приложений, установлению терминологии и содействию лучшему пониманию различий, но концентраты аутологичной крови предлагают солидные преимущества как для пациентов, так и для стоматологов общего профиля.

«Включение PRP / PRF в вашу практику говорит вашим пациентам, что вы в курсе текущих тенденций, используете методы, которые отвечают их интересам, и прилагаете усилия для обеспечения наилучших возможных результатов», — сказал Вертс.

Келли Рехан — независимый журналист из Омахи, Небраска.

Ссылки
1. Borie, Eduardo, et al. «Применение богатого тромбоцитами фибрина в стоматологии: обзор литературы». Международный журнал клинической и экспериментальной медицины , vol. 8, вып. 5, 2015, с. 7922-7829.
2. Мирон, Ричард Дж. И др. «Сравнение богатого тромбоцитами фибрина (PRF), полученного с использованием 3 коммерчески доступных центрифуг как при высоком (~ 700 г), так и при низком (~ 200 г) относительных центрифужных силах.” Клинические устные исследования , vol. 24, вып. 3, март 2020 г., стр. 1171-1182.
3. Мирон, Ричард Дж. И др. «Использование богатого тромбоцитами фибрина в регенеративной стоматологии: систематический обзор». Клинические исследования полости рта , vol. 21, 2017, с. 1913-1927.

Применение богатого тромбоцитами фибрина в стоматологии: обзор литературы

Abstract

Разработка биоактивных хирургических добавок для регулирования воспаления и увеличения скорости процесса заживления является одной из серьезных проблем в клинических исследованиях.В этом смысле богатый тромбоцитами фибрин (PRF) представляется естественной и удовлетворительной альтернативой с благоприятными результатами и низкими рисками. В следующем обзоре делается попытка обобщить соответствующую литературу, касающуюся техники использования PRF, с акцентом на ее приготовление, преимущества и недостатки ее использования в клинических применениях. PRF отдельно или в сочетании с другими биоматериалами, по-видимому, имеет несколько преимуществ и показаний как для медицины, так и для стоматологии, поскольку это минимально инвазивный метод с низким риском и удовлетворительными клиническими результатами.

Ключевые слова: Тромбоциты, фибрин, богатый тромбоцитами фибрин, регенерация кости, хирургия полости рта

Введение

Разработка биоактивных хирургических добавок, которые используются для регуляции воспаления и увеличения скорости процесса заживления [1 ], является одной из серьезных проблем в клинических исследованиях. В этом смысле заживление — сложный процесс, который включает клеточную организацию, химические сигналы и внеклеточный матрикс для восстановления тканей [2].Понимание процесса заживления все еще неполное, но хорошо известно, что тромбоциты играют важную роль как в процессах гемостаза, так и в процессах заживления ран [3].

Регенеративный потенциал тромбоцитов был представлен в 70-х годах [4], когда было обнаружено, что они содержат факторы роста, которые отвечают за увеличение выработки коллагена, митоз клеток, рост кровеносных сосудов, привлечение других клеток, которые мигрируют к месту повреждения. , индукция дифференцировки клеток, среди прочего [5].

Одним из последних нововведений в оральной хирургии является использование концентратов тромбоцитов для in vivo приложений тканевой инженерии: 1) богатая тромбоцитами плазма (PRP) и 2) богатый тромбоцитами фибрин (PRF). Концентраты тромбоцитов представляют собой концентрированную суспензию факторов роста, содержащихся в тромбоцитах, которые действуют как биоактивные хирургические добавки, которые применяются локально для ускорения заживления ран [5].

Whitman et al [6] в 1997 году первыми внедрили использование богатой тромбоцитами плазмы при хирургических вмешательствах в полости рта, сообщив о больших преимуществах, поскольку она увеличивает количество остеопрогениторных клеток в костной ткани хозяина и костном трансплантате.Однако его использование также представляет риск, поскольку бычий тромбин, который используется для обработки PRP, может генерировать антитела к факторам V, XI и тромбину, которые могут вызывать коагулопатии, которые могут угрожать жизни [5].

С другой стороны, PRF был впервые использован в 2001 году Choukroun et al. [7], особенно в челюстно-лицевой хирургии, и в настоящее время рассматривается как концентрат тромбоцитов нового поколения. Он состоит из матрицы аутологичного фибрина [1] и имеет ряд преимуществ перед PRP, включая более легкое приготовление и отсутствие необходимости в химических манипуляциях с кровью, что делает его строго аутологичным препаратом [5].

В следующем обзоре делается попытка обобщить соответствующую литературу, касающуюся техники использования фибрина, обогащенного тромбоцитами (PRF), с акцентом на его получение, преимущества и недостатки его использования в клинических применениях.

Тромбоциты и фибрин

Тромбоциты — вторые по количеству тромбоциты в крови [8]. Это цитоплазматические фрагменты, у которых отсутствует ядро, полученное из мегакариоцитов [9,10]. Их продолжительность жизни составляет от 7 до 10 дней [10], а нормальная концентрация в периферической крови составляет 150-450 × 10 ⁹ / л [8].Эти неактивированные тромбоциты представляют собой двояковыпуклые дискоидные структуры в форме линзы с размерами приблизительно 2,0-4,0 на 0,5 мкм и средним объемом 7-11 фл [8].

Тромбоциты образованы периферической областью, которая соответствует фосфолипидной мембране, ряду микротрубочек и очень обширной канальцевой системе, соединяющей поверхность с цитоплазмой. В цитоплазме можно идентифицировать гранулы гликогена, митохондрии, лизосомы, пероксисомы и различные типы включений, включая альфа и плотные гранулы [11].Альфа-гранулы — это крупные макромолекулы, которые составляют 15% от общего объема тромбоцитов [10]. Они содержат специфические для тромбоцитов и неспецифические для тромбоцитов белки (фибриноген, фибронектин, тромбоспондин, факторы роста и др.) [11]. Кроме того, плотные гранулы имеют высокое содержание кальция, неорганического фосфора, АДФ, АТФ и серотонина [11]. Однако наиболее важными элементами тромбоцитов для достижения процессов заживления и восстановления являются лейкоциты и факторы роста, последние — полипептиды, которые участвуют в дифференцировке, пролиферации, миграции и клеточном метаболизме [12].

Факторы роста стимулируют и привлекают стволовые клетки к месту повреждения, способствуя митозу клеток и вызывая ангиогенез и остеогенез [13]. Эти факторы роста после активации тромбоцитами, захваченными фибриновым матриксом, продемонстрировали стимуляцию митогенного ответа клеток надкостницы для достижения заживления кости [14]. Цитокины также высвобождаются из тромбоцитов, они ответственны за модуляцию активации тромбоцитов и пролиферации и дифференцировки лейкоцитов, играя важную роль в иммунологии, в частности, в механизме воспаления [13].

Кроме того, фибрин представляет собой мостиковую молекулу, которая обеспечивает ряд клеточных взаимодействий и обеспечивает временную матрицу, в которой клетки могут пролиферировать, организовывать и выполнять свои функции, главным образом, в участках, пострадавших от повреждения или воспаления [15]. Фибрин обеспечивает матрицу для миграции фибробластов и эндотелиальных клеток, которые участвуют в процессе ангиогенеза и отвечают за заживление новых тканей [3]. Формирование фибриновой сети является результатом превращения растворимого фибриногена — большого гликопротеина — в растворимый фибрин под действием тромбина и фактора XIIIa [16].Этот процесс можно разделить на три стадии: 1) протеолиз фибриногена тромбином; 2) полимеризация мономеров фибрина; 3) стабилизация фибрина фактором XIIIa [17].

Фибрин может иметь множество вариаций в своей структуре из-за различных физиологических ситуаций, таких как концентрация ионов кальция и фибриногена и его качество. Более того, фибрин может изменять свою структуру у пациентов с некоторыми сопутствующими заболеваниями, такими как диабет и нефротический синдром, среди прочих [18].

Фибрин, богатый тромбоцитами

PRF состоит из аутологичного фибринового матрикса, богатого лейкоцитами и тромбоцитами [1,13], состоящего из тетрамолекулярной структуры с цитокинами, тромбоцитами, цитокинами и стволовыми клетками внутри него [11,19] , который действует как биоразлагаемый каркас [20], который способствует развитию микроваскуляризации и способен направлять миграцию эпителиальных клеток к своей поверхности [19,21]. Кроме того, PRF может служить средством переноса клеток, участвующих в регенерации тканей [22], и, по-видимому, имеет устойчивое высвобождение факторов роста [23] в период от 1 до 4 недель, стимулируя среду для заживления ран в значительном количестве. времени [24].Он имеет сложную структуру прочного фибринового матрикса с благоприятными механическими свойствами и медленно ремоделируется, подобно сгустку крови [24]. Некоторые исследования [25-28] продемонстрировали, что PRF является лечебным биоматериалом с большим потенциалом для регенерации костей и мягких тканей без воспалительных реакций и может использоваться отдельно или в сочетании с костными трансплантатами, способствуя гемостазу, росту и созреванию костей. Этот аутологичный матрикс продемонстрировал в исследованиях in vitro большой потенциал для увеличения прикрепления клеток [24] и стимуляции пролиферации и дифференцировки остеобластов [29].Dohan et al. [21,30] заявили, что PRF обладает иммунологическими и антибактериальными свойствами, может приводить к дегрануляции лейкоцитов и содержит некоторые цитокины, которые могут вызывать ангиогенез и про / противовоспалительные реакции.

Разница между естественным тромбом и PRF состоит в том, что последний более однороден и стабилен, его легко обрабатывать и размещать в указанном месте [31].

В хирургических процедурах PRF может служить резорбируемой мембраной для управляемой регенерации кости (GBR) [22], предотвращая миграцию нежелательных клеток в костный дефект и обеспечивая пространство, которое позволяет иммиграцию остеогенных и ангиогенных клеток и разрешает основной тромб для минерализации [32].Однако нормальная мембрана PRF имеет быструю деградацию (1-2 недели), но если волокна сшиты, она может обеспечить устойчивость к ферментативной деградации и может быть более стабильной во время заживления [23]. Учитывая вышеизложенное, Kawase et al. [23], в исследовании in vitro на мышах, предложили тепловое сжатие PRF-мембраны в случаях с признаками направляемой регенерации кости, потому что эта процедура является менее цитотоксической техникой, которая уменьшает площадь поверхности и пористость, задерживая ее разрушение до 4 недели.

Simonpieri et al. [31] упомянули концепцию «естественной регенерации кости» (NBR), которая включает регенерацию через мембраны PRF как объема кости, так и ткани десны. Те же авторы сообщили об удовлетворительных клинических результатах, связанных с изменением формы всей альвеолярной кости и восстановлением объема десны и периимплантной кости, с достижением адекватных механических и эстетических свойств.

Мембрана

PRF показала благоприятные клинические результаты при лечении дефектов пародонта [22], защищая открытые раны от среды ротовой полости, когда шовный материал не может связывать края слизистой оболочки [13,19,22,31], и ускоряя работу твердых и мягких тканей. исцеление [19,31,33].В некоторых клинических исследованиях [34,35] мембрана PRF использовалась в качестве единственного материала для трансплантации для увеличения дна гайморовой пазухи, что дало многообещающие результаты.

Другие авторы, включая Тофлера и др. [36], рекомендовали использовать мембрану PRF для закрытия необнаруженной перфорации мембраны пазухи во время остеотомии бокового окна в процедуре подъема гайморовой пазухи.

Мембрана PRF способствует заживлению ран, защищает место операции [33,36], способствует восстановлению мягких тканей; при смешивании с костным трансплантатом он может действовать как «биологический соединитель», который привлекает стволовые клетки, способствует миграции клеток остеопрогениторов к центру трансплантата и обеспечивает неоангиогенез [36].

Кроме того, Choukroun et al. [37] провели исследование, в котором они хотели увидеть потенциал использования PRF в сочетании с лиофилизированным костным аллотрансплантатом с (FDBA) для улучшения регенерации кости при процедуре лифтинга гайморовых пазух. Результаты показали сокращение времени заживления до установки имплантата. С гистологической точки зрения время заживления сократилось вдвое — с 8 до 4 месяцев; однако для подтверждения этих результатов необходимы крупномасштабные исследования [37]. Кроме того, добавление PRF к костному трансплантату может привести к уменьшению объема используемого костного заменителя и, по-видимому, улучшает реваскуляризацию трансплантата, поддерживая ангиогенез [37].Simonpieri et al. [31] предложили использовать смесь PRF с костным трансплантатом, помещать в дефекты кости или, в случае немедленных имплантатов, покрывать его несколькими слоями PRF, отметив хорошие клинические результаты.

Yilmaz et al. [38] гистологически и стереологически сравнили лечебные эффекты β-TCP и PRF, по отдельности и в комбинации, при стандартизированных дефектах костей голеней свиней. Результаты показали, что когда β-TCP и PRF использовались вместе, вновь сформированная кость была значительно больше, чем при использовании обоих по отдельности.Кроме того, PRF может действовать как биологический адгезив, удерживая частицы вместе, облегчая манипуляции с костными трансплантатами [38].

Протокол для приготовления PRF

Протокол пытается накапливать тромбоциты и высвобожденные цитокины в фибриновом сгустке [35].

Протокол PRF требует только центрифугированной крови без добавления антикоагулянта и бычьего тромбина [1]. Затем отбирают образец крови без антикоагулянта в 10-миллилитровые пробирки в стеклянной или покрытой стеклом пластиковой пробирке [1,11,39], затем сразу же центрифугируют при 3000 об / мин в течение 10 минут [1,3,39].

Полученный продукт состоит из следующих трех слоев [1]:

● Самый верхний слой, состоящий из ячеистой плазмы.

● Сгусток PRF посередине.

● Основание красного тельца внизу.

После этого необходимо поместить сгусток PRF в стерильную чашку примерно на 10 минут, чтобы позволить высвободиться надлежащей сыворотке, содержащейся в [1]. Mazor et al. [35] сообщили, что сгусток может быть преобразован в мембрану посредством сжатия между двумя стерильными марлями или специальным инструментом.

Вначале фибриноген концентрируется в верхней части пробирки, прежде чем соответствующий тромбин преобразует его в фибрин [1]. Из-за отсутствия антикоагулянта кровь начинает свертываться, как только она соприкасается с поверхностью стекла. Контакт с поверхностью кремнезема необходим для активации процесса полимеризации сгустка [40]. В этом смысле PRF может быть получен только в сухих стеклянных пробирках или пластиковых пробирках со стеклянным покрытием. Более того, частицы диоксида кремния не представляют риска цитотоксичности по сравнению, например, с бычьим тромбином, используемым для приготовления PRP [40].

Наконец, тромбоциты, по-видимому, массово захватываются фибриновыми сетками [1]. Следовательно, для успешной подготовки PRF, быстрый сбор крови и немедленное центрифугирование до начала каскада свертывания абсолютно необходимы [41]. Быстрое обращение — ключ к достижению клинически пригодного сгустка PRF [1].

показывает горизонтальное наращивание кости в верхнечелюстном гребне богатым тромбоцитами фибрином, смешанным с аллотрансплантатом (Puros®, Cortico-Cancellous Particulate Allograft, Zimmer Dental Inc, Сан-Диего, Калифорния, США).

Клиническое применение во время горизонтальной операции по увеличению кости. A. Сгусток PRF в стерильной марле для выделения сыворотки. Б. Аллотрансплантат, смешанный со сгустком PRF. C. Расположение аллотрансплантата PRF + в альвеолярном гребне для увеличения его ширины. Обратите внимание на слой PRF над костным трансплантатом. D. Окончательный шов. Не было необходимости обнажать мембранный слой PRF, потому что в этом случае можно было связать края слизистой оболочки.

Преимущества использования PRF

В литературе, связанной с использованием PRF, сообщается о некоторых преимуществах, например:

● Его приготовление является упрощенным и эффективным методом с центрифугированием в один этап, бесплатным и открытым доступом. для всех врачей [31,40].

● Получен на основе аутологичного образца крови [19].

● Минимальные манипуляции с кровью [42].

● Не требует добавления внешнего тромбина, потому что полимеризация — это полностью естественный процесс, без риска возникновения иммунологической реакции [1,42].

● Он имеет естественный фибриновый каркас с факторами роста внутри, которые могут сохранять свою активность в течение относительно более длительного периода и эффективно стимулировать регенерацию тканей [24].

● Может использоваться отдельно или в сочетании с костными трансплантатами, в зависимости от цели [31,37].

● Увеличивает скорость заживления пересаженной кости [37,42].

● Это экономичный и быстрый вариант по сравнению с рекомбинантными факторами роста при использовании в сочетании с костными трансплантатами [43].

● Используемый в качестве мембраны, он позволяет избежать хирургической операции на донорском участке и снижает дискомфорт пациента в течение раннего периода заживления раны [44].

● Исследования PRF показывают, что он более эффективен и вызывает меньше разногласий по его окончательным клиническим результатам по сравнению с PRP [31].

Недостатки использования PRF

PRF могут иметь следующие недостатки:

● Окончательное доступное количество невелико, поскольку это аутологичная кровь [19].

● Успех протокола PRF напрямую зависит от обращения, в основном связанного со временем сбора крови и ее передачей в центрифугу [1].

● Необходимость использования пробирки со стеклянным покрытием для достижения полимеризации сгустка [40].

● Возможный отказ от лечения путем пункции, необходимой для взятия крови (Wani 2014).

● Требуется лишь минимальный опыт врача для манипуляции PRF [13,31].

Другие клинические применения

В литературе сообщается о некоторых других возможных применениях PRF, например:

● Непериодонтальные дефекты кости: уменьшение глубины зондирования и заполнение рентгенографического дефекта [22].

● При локализованном остите 90% уменьшения остита было обнаружено в области хирургического вмешательства на третьих молярах [46].

● В качестве дополнения к заживлению небной раны после извлечения свободного десневого трансплантата [47].

● В качестве потенциального каркаса в процедурах реваскуляризации пульпы некротизированного незрелого постоянного зуба: поскольку он богат факторами роста, он, по-видимому, усиливает клеточную пролиферацию и дифференцировку, усиливает ангиогенез, действует как матрица для роста тканей и регулирует воспалительную реакцию. [48].

● В нескольких удалениях для сохранения высоты альвеолярного гребня [31].

● Регенерация кости вокруг имплантатов, расположенных непосредственно внутри альвеолярного дефекта [31].

● Реконструкция крупных костных дефектов после онкологических операций [49].

● В пластической хирургии сгустки PRF часто используются непосредственно для заполнения полостей [50] или смешиваются с трансплантатом адипоцитов в липоструктуре [51].

● В виде мембраны он может быть полезен для небольших отологических операций [52,53].

Влияние богатого лейкоцитами и тромбоцитами фибрина (L-PRF) на подавление экспрессии провоспалительных цитокинов, пролиферацию шванновских клеток и нейротрофических факторов

Изготовление и характеристика PRF

Это экспериментальное исследование было проведено в Стоматологической больнице Цзилиньского университета, Китай, с марта 2018 года по июль 2019 года.Для приготовления L-PRF образцы крови сначала были тщательно собраны у новозеландских белых кроликов в соответствии с институциональными биоэтическими руководящими принципами (руководящие принципы IEC), все экспериментальные протоколы были одобрены институциональным комитетом по этике, который принадлежит стоматологической больнице при Университете Цзилинь. . Кроликов жестко удерживали механическим фиксатором для кроликов, чтобы сбрить и выщипать шерсть в области над ушными венами. Затем место обработали антисептическим раствором. Удерживая ушную раковину недоминантной рукой, доминирующая рука затем вводила иглу в вену.После медленного удаления иглы прикладывали сильное давление марлей в течение одной минуты для обеспечения гемостаза. Всего 10 мл образца крови собирали в стеклянные пробирки (Vacutainer; BD Bio-Sciences, Allschwil, Швейцария) и мгновенно центрифугировали при 3000 об / мин (1278 g) в течение 12 минут при комнатной температуре (ротор с фиксированным углом F- 35-30-17, центрифуга 5702; Eppendorf, Дармштадт, Германия). Слой L-PRF был вкраплен в середину. Этот сгусток представлял собой трехмерную структуру, состоящую из лейкоцитов и тромбоцитов, заключенных в фибрин.

После этого с помощью сканирующего электронного микроскопа (SEM) изучали морфологические особенности мембраны L-PRF. Для приготовления L-PRF были взяты два образца крови в соответствии с протоколом, описанным выше. Блок L-PRF был зажат между двумя стерильными марлями, и полученная мембрана L-PRF была разделена на три части. Все образцы фиксировали сразу после приготовления в 2,5% глутаровом альдегиде и 0,1 натрийкакодилатном буфере в течение 24 часов, затем промывали натриевым какодилатным буфером и дистиллированной водой трижды в течение 10 минут.После этого образцы сушили этанолом в порядке возрастающей концентрации (25–50–75–90–100%), а затем покрывали распылением 20 нм золота, чтобы их можно было исследовать с помощью СЭМ. Фотографии были сделаны при напряжении 5 кВ и увеличении от 2 до 20 К. СЭМ (S-3400N, Hitachi, Япония) использовался для наблюдения и идентификации клеточных тел, захваченных в матриксе (лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов), и для анализа общей архитектуры фибриновой сети.

Определение фактора роста в L-PRF

Набор для ELISA использовали для оценки концентрации IGF-1 в различные временные интервалы, как указано.Полученный L-PRF погружали в свежую среду Игла, модифицированную Дульбекко (DMEM, HYCLONE, Юта, США) без антибиотиков или сыворотки, и инкубировали при 37 ° C с 5% CO2 для облегчения высвобождения IGF-1 в течение 2 часов ( з) до 28-дневного срока обучения. Через 2 часа, 4 часа, 1 день, 3 дня, 7 дней, 14 дней, 21 день и 28 дней из образца удалили 5 мл DMEM, поместили в морозильную камеру при -80 ° C для дальнейшего использования и заменили с 5 мл свежего DMEM. Чтобы определить концентрацию IGF-1, мы следовали инструкциям производителя коммерчески доступного набора для ELISA, специально разработанного для использования на кроликах (JonIn, Шанхай, Китай).Уровни поглощения считывали при длине волны 450 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов (Infinite 200Pro, Швейцария). Все результаты были представлены как общий вес молекул (нг и пг) на 1 мл объема надосадочной жидкости. Концентрация фактора роста в каждый момент времени оценивалась, чтобы определить оптимальную точку для высвобождения фактора роста. Кроме того, концентрации факторов роста в каждый момент времени складывались, чтобы получить кумулятивный итог. Этот тест был повторен два раза для повышения точности.

Влияние L-PRF на пролиферацию SC и секрецию нейротрофических факторов (NGF, GDNF)

Вначале экстракт L-PRF был приготовлен для уменьшения различий между мембранами L-PRF. L-PRF погружали в свежую среду DMEM и инкубировали в течение 14 дней при 37 ° C и 5% CO2 для получения адекватного кумулятивного высвобождения факторов роста в результате процесса, описанного в разделе 3.2. После этого кондиционированные среды собирали, центрифугировали при 1000 об / мин в течение 5 минут перед тем, как экстракты пропускали через биологический фильтр (MILLEX, Millipore, Ирландия).Затем к экстрактам добавляли 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS, GIBCO, Гранд-Айленд, США) и 1% антибиотиков (HYCLONE, Юта, США) и обозначали как 100% экстракт L-PRF. Экстракты хранили при -80 ° C для дальнейшего использования.

Набор для подсчета клеток-8 (CCK-8)

Тест CCK-8 был создан для определения клеточной пролиферации после заражения различными концентрациями L-PRF. Первичные СК кроликов (RAB-iCELL-n008, icell-bioscience, Шанхай, Китай) культивировали в стандартной среде для культивирования клеток DMEM, которая содержит 10% FBS и 1% антибиотиков.Чтобы изучить влияние L-PRF на пролиферацию клеток, SC высевали в 96-луночные планшеты при плотности 5000 клеток / лунку в DMEM и хранили во влажной атмосфере (37 ° C с 5% CO2) до следующего дня. После этого культуральную среду преобразовывали в DMEM или различные концентрации (25%, 50% и 100%) экстрактов L-PRF. Для определения оптимальной концентрации мы использовали набор Cell-Counting Kit-8 (CCK-8) (Кумамото, Япония). Через 1, 2 и 3 дня обработки в каждую лунку добавляли 10 мкл CCK-8 и инкубировали еще 2 часа при 37 ° C с 5% CO2.Изменения оптической плотности при 450 нм определяли с помощью спектрофотометра Synergy HT (BioTek Instruments).

Количественная ПЦР с обратной транскрипцией (RT-qPCR)

Тест RT-qPCR проводили для анализа экспрессии мРНК NGF и GDNF. СК четвертого и пятого поколений высевали в чашки для клеток и хранили во влажной атмосфере (37 ° C с 5% CO2) до следующего дня. После 1, 2 и 3 дней инкубации при 37 ° C с 5% CO2 клетки заражали DMEM или 100% экстрактом L-PRF на основании результатов, приведенных в разделе 3.3.1. После инкубации клетки собирали для экстракции мРНК, чтобы перейти к RT-qPCR. Весь процесс экстракции тотальной РНК проводился с помощью TRizol (TAKARA, Далянь, Китай) в соответствии с протоколом производителя. После этого была выполнена обратная транскрипция РНК в комплементарную кДНК с использованием в общей сложности 1000 нг изолированной РНК с использованием Master Mix высокой емкости РНК-к-кДНК (TAKARA, Nojihigashi, Kusatsu, Japan). Термоциклирование проводили при 6 циклах при 37 ° C в течение 15 минут, затем 40 циклов при 85 ° C в течение 5 секунд и при 4 ° C в течение ∞.Высококопийную амплификацию кДНК проводили с помощью ПЦР SYBR Green Master Mix (TAKARA, Nojihigashi, Kusatsu, Япония) с детектором последовательности ABI Prism 7700 (Applied Biosystems, Япония). Последовательности праймеров, выбранные в этом исследовании, перечислены ниже: прямой GAPDH, 5-CCACTT, TGTGAAGCTCATTTCCT-3 ‘и обратный, 5′-TCTCGTCCTCCTCTGGTGCT-3′; NGF прямой, 5’-CCAACAGGACTTACAGGGCAA-3 ‘и обратный, 5′-TCTTGTCCCCAACCCACAC-3′; и GDNF прямой, 5’-CGCTAAAAGGTGTGGCTGTATCT-3 ‘и обратный, 5′-ATCTTCCATTCTGGGCAAACA-3’.Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа в качестве эндогенного контрольного гена была включена для нормализации данных в RT-qPCR. Относительное выражение было рассчитано на основе метода дельта-дельта CT. Все тесты RT-qPCR были повторены дважды в этом исследовании.

Иммуноферментный анализ (ELISA)

Для количественной оценки экспрессии белков NGF и GDNF использовали набор для ELISA. СК высевали в 24-луночные планшеты при плотности 20000 клеток / лунку в DMEM и хранили во влажной атмосфере при 37 ° C с 5% CO2 до следующего дня.После этого культуральные среды были заменены на DMEM или 100% экстракт L-PRF, после чего их собирали через 1, 2 и 3 дня и замораживали при -80 ° C для будущего использования. Следующие ниже протоколы использования наборов ELISA были такими же, как описано в разделе 3.2.

Противовоспалительное действие L-PRF на SC

Набор для подсчета клеток 8 (CCK-8)

Тест CCK-8 использовали для определения необходимой концентрации PG-LPS для подавления пролиферации SC. На основе протокола для клеточных культур, описанного в разделе 3.3.1, СК подвергали воздействию различных концентраций (0,5, 1, 5 и 20 мкг / мл) PG-LPS (Сан-Диего, Нью-Йорк, США) при 37 ° C с 5% CO2. После 2 дней лечения в каждую лунку добавляли 10 мкл CCK-8 и выполняли те же протоколы, описанные в разделе 3.3.1.

Количественная ПЦР с обратной транскрипцией (RT-qPCR)

Тест RT-qPCR был проведен для анализа времени пика воспаления после заражения PG-LPS (один мкг / мл) в связи с результатом, приведенным выше в Разделе 3.4.1. . Используя тот же протокол культивирования клеток, который описан в разделе 3.3.2, SC заражали DMEM и PG-LPS (один мкг / мл) с последующей 1, 3, 6, 12, 24 часами инкубации при 37 ° C с 5% CO2, затем собирали. Протоколы выделения мРНК были такими же, как описано в разделе 3.3.2. Последовательности праймеров, выбранные в этой части, перечислены ниже. IL-1β прямой, 5′-CTGCAACACCTGGGATGACTAC-3 ‘и обратный, 5′-GTGCCAGACAACACCAAGGA-3′; TNF-α прямой, 5’-GTAGCAAACCCGCAAGTGGA-3 ‘и обратный, 5′-TGAAGAGAACCTGGGAGTAGATGAG-3′; IL-6 прямой, 5’-GTGAATAATGAGACCTGCCTGCT-3 ‘и обратный, 5′-CTGGTGTTTTCTTCGTCACTCCT-3’; и GAPDH, который был таким же, как описано в разделе 3.3.2.

Количественная ПЦР с обратной транскрипцией (RT-qPCR)

Тест RT-qPCR проводили для оценки влияния L-PRF на PG-LPS-индуцированный воспалительный ответ. На основе того же протокола для клеточных культур, описанного в разделе 3.3.2, SC были разделены на 3 группы (группа DMEM, группа LPS и группа PRF). Группу DMEM и группу PG-LPS обрабатывали 4 мл DMEM или 4 мл PG-LPS (один мкг / мл) в течение 3 часов на основании результата, приведенного в разделе 3.4.2, в то время как группу PRF вводили 4 мл 100% L -PRF экстракт для предварительной обработки в течение одного часа перед добавлением 4 мл PG-LPS (один мкг / мл) в среду на 3 часа и сбор клеток.Были выполнены те же протоколы извлечения мРНК, как описано в разделе 3.3.2. Последовательности праймеров, выбранные в этой части, такие же, как и последовательности, перечисленные в разделе 3.4.2.

Иммуноферментный анализ (ELISA)

Набор ELISA был разработан для поддержки противовоспалительного эффекта L-PRF. Используя тот же протокол культивирования клеток, который описан в разделе 3.3.3, затем SC обрабатывали 4 мл PG-LPS (один мкг / мл) в течение 6 часов на основании результата в разделе 3.4.2. Набор SC предварительно обрабатывали 4 мл 100% L-PRF в течение 1 часа, прежде чем к среде добавляли 4 мл PG-LPS (один мкг / мл).Все культуральные среды были собраны и сохранены при -80 ° C для будущего использования. Протоколы использования наборов ELISA были такими же, как описано в разделе 3.2.

Статистический анализ

Среднее значение ± стандартное отклонение (SD) использовалось для представления данных. С использованием программного пакета GraphPad Prism (GraphPad, Сан-Диего, Калифорния, США) был проведен статистический анализ, включающий односторонний дисперсионный анализ (ANOVA) с тестом сравнения HSD Тьюки. Статистическая значимость была принята как p <0.05.

Стандартизированный протокол, предложенный для клинического использования L-PRF и использования L-PRF Wound Box®

Введение

Богатый тромбоцитами фибрин (PRF) Choukroun et al . ^[1] — это новый шаг в терапевтической концепции геля тромбоцитов с упрощенной конструкцией и небольшими искусственными биохимическими изменениями. В отличие от других концентратов тромбоцитов, этот метод не требует антикоагулянтов, тромбина или любого другого гелеобразующего агента, что делает его не более продолжительным, чем центрифугирование естественной крови без добавок ^[2] .Хотя тромбоциты и цитокины лейкоцитов играют важную роль в биологии этого биоматериала, поддерживающий фибриновый матрикс, безусловно, составляет реальный терапевтический потенциал PRF. Отсутствие антикоагулянта приводит к образованию эндогенного тромбина, который последовательно активирует большую часть тромбоцитов, содержащихся в образце, и в то же время запускает образование фибрина. Протокол PRF — это простой метод, разработанный во Франции Choukroun и др. . ^[1] и может рассматриваться как концентрат тромбоцитов второго поколения, потому что это натуральный продукт без каких-либо антикоагулянтов или желирующих агентов.Тромбоциты и лейкоциты собираются с помощью этого метода с высокой эффективностью, а лейкоциты сохраняются. Однако тромбоциты активируются во время этого процесса, что приводит к значительному встраиванию тромбоцитов, лейкоцитов и факторов роста в фибриновый матрикс.

Фибриноген изначально концентрируется в верхней части пробирки, пока под действием циркулирующего аутологичного тромбина он не превращается в сеть из фибрина. В результате образуется фибриновый сгусток, содержащий тромбоциты, расположенный в центре пробирки, как раз между нижним слоем эритроцитов и бесклеточной плазмой наверху.Затем сгусток PRF помещается на решетку в PRF Box ^® и накрывается крышкой компрессора; он производит мембрану из аутологичного фибрина примерно за 1 мин. PRF Box ^® разработан для обеспечения постоянной толщины мембраны, которая остается гидратированной в течение нескольких часов и позволяет восстанавливать сывороточный экссудат, экспрессируемый фибриновыми сгустками, богатыми белками, такими как витронектин и фибронектин ^[2] . Сгусток PRF образуется в процессе естественной полимеризации во время центрифугирования, и его естественная фибриновая структура, по-видимому, ответственна за медленное высвобождение факторов роста и гликопротеинов из матрицы (≥ 7 дней).Адгезивные белки фибриноген, фибронектин, витронектин и тромбоспондин-1 в большом количестве присутствуют в структуре фибрина. Среди факторов роста, хранящихся в тромбоцитах и ​​важных для заживления ран, находятся: факторы роста тромбоцитов с -AB и -C; они также присутствуют в виде фактора роста эндотелия сосудов А, трансформирующего фактора роста бета 1, фактора роста фибробластов 2, фактора роста эпидермиса, фактора роста гепатоцитов и инсулиноподобного фактора роста-1.

Фибриноген может улучшить заживление раны, увеличивая как пролиферацию, так и миграцию клеток, и он собирается с фибронектином в фибриллы независимо от образования фибрина.Фибрин является важным фактором заживления ран; Фактически, на результат заживления раны влияет структура фибрина (толщина волокон, количество точек ветвления, пористость и проницаемость сгустка в месте повреждения) ^[3] . Сгустки PRF также представляют собой биоактивный резервуар. После первого массового выброса факторов роста тромбоциты синтезируют и выделяют новые на всю оставшуюся жизнь (7-10 дней).

Фибриновые гели играют важную роль в тканевой инженерии по нескольким причинам.Наиболее важной причиной является врожденная совместимость с фибрином клеточного организма, которая различается в зависимости от многих компонентов и процессов, задействованных в производстве каркасов. Хотя факторы роста тромбоцитов играют важную роль в биологии PRF, структура фибрина и содержание лейкоцитов являются двумя ключевыми параметрами.

Действующий метод приготовления PRF ^® должен эффективно отделять тромбоциты от эритроцитов и концентрировать их, не повреждая и не разрушая самих тромбоцитов.Факторы роста, содержащиеся в α-гранулах, не действуют во время разряда; они смешиваются с мембраной, активирующей тромбоциты. Следовательно, если тромбоциты повреждаются во время производства PRF, они не будут секретировать больше биоактивных факторов роста. Фактически, они особенно лабильны и чувствительны к любому стрессовому событию на этапе обработки и применения; по этой причине на концентрацию факторов роста также могут влиять манипуляции во время обработки крови.Таким образом, очень важно стандартизировать процедуру подготовки, и тип выполняемого центрифугирования должен иметь определенные характеристики, в том числе: медленный запуск в начале, центральная фаза при высоких оборотах и ​​конечная медленная фаза перед остановкой ^{[4 ]} , и должно происходить при определенной температуре и в течение определенного времени.

Наша гипотеза состоит в том, что L-PRF легко получить у лошадей без модификации человеческого протокола, даже позволяя лучше стандартизировать человеческий протокол.

Необходимо разработать стандартный протокол для получения L-PRF со следующими основными характеристиками: (1) факторы роста, присутствующие в тромбоцитах, должны храниться для стимуляции окружающих клеток-хозяев; (2) тромбоциты должны храниться в структуре фибрина с минимальным повреждением или активацией; (3) трехмерную решетку фибрина следует использовать в качестве каркаса для окружающих клеток-хозяев.

Методы

Препарат

За взятием крови должно следовать немедленное центрифугирование в качестве предварительного условия в спецификации выхода PRF.Он разработан для образования однородно увлажненной толстой мембраны и экссудата, богатого тромбоцитами, лейкоцитами, витронектином и фибронектином, экспрессируемым фибриновыми сгустками ^[5] .

В целом, L-PRF является механически устойчивым, способным выдерживать нагрузки, имеет способность к двукратному растяжению при растяжении и достаточно хорошо удерживает хирургические швы, поскольку значительно деформируется до разрыва. ^[6] . Технология производства PRF очень проста и требует только образца крови и настольной центрифуги [Рисунок 1].

Рис. 1. Центрифуга с термометрами, весами и цифровым датчиком

Используемый протокол — протокол «Choukroun et al . ^[1] ”: образцы крови собирают в пробирки на 9 мл без антикоагулянта или гелевого сепаратора и сразу же центрифугируют в соответствии со следующей программой: ускорение 30 с, 2 мин при 2700 об / мин, 4 мин при 2400 об / мин 3 мин при 3000 об / мин и 36 с замедление и остановка.

После центрифугирования в пробирке локализуются три части: эритроциты внизу, фибриновый сгусток, представляющий PRF в середине, и бесклеточная плазма вверху.Мы можем получить PRF, извлекая матрицу из трубки с помощью щипцов и удаляя красный сгусток. Успех этого метода полностью зависит от сбора крови и скорости переноса в центрифуге ^[7,8] . Конская кровь использовалась Textor et al . ^[9] для производства концентрата тромбоцитов (PRF). Письменное согласие владельцев было получено на всех лошадей, и процедура взятия крови проводилась в соответствии с действующими директивами AVMA.

Мы провели проспективное исследование крови лошадей, которая была собрана в пробирки без стекла с антикоагулянтным пластиковым покрытием или гелевого сепаратора (пробирки BD vacutainer для сыворотки 9,0 мл), для производства сгустков и мембран L-PRF на 6 здоровые лошади разного возраста (в среднем ± SD, 10 ± 4,1 года, от 4 до 17 лет), пола и породы.

9 мл крови были быстро собраны с помощью стерильных шприцев на 10 мл, а также с помощью системы сбора крови из пробирок Vacutainer с предварительно прикрепленными сборными изделиями Ref.368652 Becton, Dickinson & C. USA (22 “среднее значение менее 25” на пробирку) из вены и сразу (в течение 1 мин) центрифугировали в соответствии с предыдущим описанием при температуре 21-30 ° C в настольной модели 3225. Центрифуга.

Температуры внутренней и внешней поверхности центрифуги регистрировались до и во время центрифугирования с помощью цифрового термометра с внутренним датчиком (Tronic) [Рисунок 1].

Новое устройство было протестировано для подготовки и стандартизации L-PRF в сгустках и мембранах: L-PRF Wound Box ^® [Рисунок 2].При использовании PRF Wound Box процесс сжатия мембраны в сгустках осуществляется путем медленного и однородного легкого сжатия, и конечная мембрана всегда остается однородно влажной и пропитанной сывороткой.

Рисунок 2. Коробка для ран L-PRF ^®

Этот метод позволяет избежать извлечения и потери значительного количества факторов роста. Коробка для раны L-PRF ^® была изготовлена ​​нами с использованием металлического контейнера 17,5 см × 7,6 см × 2 см, содержащего перфорированную стальную пластину размером 150 м × 68 м × 1.5 мес. Была вторая стальная пластина, которая действует как компрессор, 150 мм × 68 мм × 1,5 мм, весом 148 г [Рисунок 2]. Эта пластина второй формы оказывает давление 142,437 Па / см ² . В этом исследовании сгусток подвергался сжатию в течение 2, 5, 10 и 15 минут для образования мембран.

Макроскопический анализ

После центрифугирования сгусток L-PRF был удален из пробирки с помощью стерильного пинцета и гладкого шпателя, чтобы аккуратно высвободить красный сгусток из лейкоцитарной пленки.Каждый полученный сгусток L-PRF помещали на лоток для измерения веса и размера с помощью цифровых весов ювелира [Рисунок 1].

Компрессию сгустка проводили с помощью бокса для раны L-PRF ^® , прикладывая давление 142,437 Па / см ² , постоянное в течение 2, 5, 10, 15 мин. Этот метод позволил нам получить из каждого сгустка мембраны L-PRF, которые были индивидуально взвешены и измерены цифровым датчиком [Рисунок 1]. Площадь поверхности сгустков и мембран в квадратном сантиметре измеряли с помощью программного обеспечения Calcderm ^[10] .

Процедура оптической микроскопии

Мембраны фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине в течение 24 часов при температуре окружающей среды, затем добавляли в парафин. Последующие срезы диаметром 4 мм были выполнены вдоль середины мембран и окрашены гематоксилин-эозином. Каждый отдел был разделен на 3 области равного размера: проксимальный (голова), центральный (тело) и дистальный (хвост). Каждую область этих срезов наблюдали с помощью оптического микроскопа и анализировали путем подсчета видимых тел клеток (отмеченных темно-фиолетовым) в центре каждой наблюдаемой области с увеличением 25 ×, 40 ×, 60 × и 100 × (иммерсионное погружение). ).Общее количество подсчитанных клеточных тел было использовано для корреляции их распределения между 3 областями мембраны (голова, тело и хвост).

Мазки крови, образованные остаточной кровью в пробирках, также исследовали для морфологической оценки после удаления сгустка PRF шпателем (по 2 на каждую пробирку), дифференцирования сгустка через 0 и 60 мин центрифугированием и фиксации их спиртом. 90% для окрашивающего пятна Май-Гренвальда-Гимзы, чтобы идентифицировать различные корпускулярные элементы, в частности тромбоциты и нейтрофилы, для сравнения их с анализом крови.У каждой лошади также брали образец крови для проведения анализа крови с использованием пробирок K3E 5,4 мг EDTA (VacuMed).

Согласно исследованию Peck et al . ^[11] , три образца крови были взяты из левой яремной вены каждой лошади с помощью иглы 14-го размера, два для получения PRF и один для анализа крови. После центрифугирования сгусток удаляли немедленно [группа A ( n = 6)] и через 60 мин [группа B ( n = 6)]. Высвобождение, полученное при надавливании мембраной Wound Box ^® , было дифференцировано между двумя группами и сохранено в пробирке с K3E 5.4 мг ЭДТА для анализа крови. Его сравнивали с базальным и с корпускулярными элементами подсчета мазков, полученных из красного сгустка, в качестве косвенного измерения концентрации тромбоцитов и лейкоцитов L-PRF. Два образца, взятые с помощью системы Vacutainer без гелей, были случайным образом разделены на две группы (A и B) с помощью подбрасывания монеты.

Супернатант, полученный при прессовании L-PRF через 0 и 60 мин, анализировали с помощью анализа крови в стандартном помещении.Хотя прямое измерение концентрации тромбоцитов в PRF пока невозможно, мы рассчитали остаточную концентрацию тромбоцитов. Исследования проводили с помощью счетчика клеток Cell Dyn 3500 R (Abbott).

Определение параметров мембран

Сразу после образования мембраны L-PRF хранили при 4 ° C до доставки в лабораторию, чтобы избежать повреждения при хранении.

Размер мембран измеряли по высоте, длине и ширине (в мм) с помощью цифрового датчика, а площади неправильной формы измеряли в см ² с помощью программного обеспечения Calcderm ^[10] .

Содержание эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов (нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, базофилов), присутствующих в мембране, было рассчитано путем сравнения основного анализа крови с показателем, полученным из надосадочной жидкости, как это было выполнено на мазках крови красного сгустка.

Снижение веса после сжатия также оценивалось с использованием образцов крови, взятых с помощью шприца и вакутейнера. Использование вакутейнера приводит к меньшей вариабельности характеристик образца крови.

Статистический анализ

Статистическая значимость различий между двумя группами была рассчитана с использованием критерия Стьюдента t и дисперсионного анализа для повторных измерений для параметрических переменных и с помощью хи-квадрат для непараметрических переменных. P Значения <0,005 считались статистически значимыми. Данные были проанализированы с использованием дисциплинарной биомедицинской статистики программного пакета Stanton Glantz 2007, версия 6.0.

Результаты

Процедура хорошо переносилась всеми животными. Не было обнаружено значительных различий в основной гематологической конфронтации, которая имела среднюю концентрацию RBC 9,8 × 10 ³ / мл [диапазон: (7-13) × 10 ³ / мл], WBC 5,1 × 10 ³ / мл [диапазон: (5-13) × 10 ³ / мл] (± 0.37, 95% ДИ) ( P = 0,24) и среднее количество тромбоцитов 106,8 × 10 ³ / мл [диапазон: (100-350) × 10 ³ / мл] (± 15,3, 95% ДИ ) ( P = 0,5) ( P — сравнение результатов между 6 лошадьми). Невозможно напрямую количественно определить концентрацию тромбоцитов и лейкоцитов, захваченных внутри сгустка L-PRF, что было получено косвенно путем сравнения средних значений цельной крови, средних значений супернатанта, полученных после сжатия сгустка через 2 мин, и средние значения, полученные при подсчете мазков красного сгустка после удаления сгустка L-PRF.

В таблице 1 сравниваются характеристики сгустков и мембран L-PRF, полученных у людей (центробежный интраспин), сообщенные Пинто и др. . ^[12] и Дохан Эренфест и др. . ^[13,14] и те, которые мы наблюдали в модели лошади. В этом сравнении было подтверждено, что существуют значительные различия в характеристиках сгустка, но эти различия устраняются при исследовании мембран, образовавшихся в результате сжатия. Это наблюдение, на наш взгляд, можно отнести к другому содержанию экссудата (масса экссудата 1.47 ± 0,13 г у человека, 3,05 ± 0,11 г у лошадей, P = 0,000).

Таблица 1

Сравнение мембран, полученных из крови человека и крови лошадей (среднее ± стандартное отклонение)

мм Высота мембраны (мм)

Переменная	Человек ( n = 8)	Лошадь ( n = 6)	Студент t -test ( P )	Значимость
Окончательный температурный тест трубки ( ° C)	27,5 ± 0.66
Вес сгустка (г) *	2,09 ± 0,19	4,23 ± 0,55	0,000	S
Вес мембраны (г)	0,62 0,78 ± 0,08	0,036	NS
Масса экссудата (г)	1,47 ± 0,13	3,05 ± 0,11	0,000	S
Длина
Длина сгустка	мм .43	44,38 ± 3,83	0,000	S
Ширина сгустка (мм)	12,81 ± 0,75	14,74 ± 1,23	0,003	S	мм Высота сгустка
	7,02 ± 1,09
Площадь сгустка (мм 2 )		4,10 ± 0,86
Длина мембраны (мм)		.81 ± 3,18 #	0,248	NS
Ширина мембраны (мм)	12,25 ± 0,71	13,02 ± 1,01 #	0,119	NS
	3,02 ± 0,51 #
Площадь поверхности мембраны (см 2 )		3,08 ± 0,5 #
Весовое соотношение сгусток / образец крови (%) 10 мл	20.94 ± 2,4	32,53 ± 0,54	0,000	S

Тот факт, что они использовались в сравнении с двумя разными типами центрифуг, по нашему мнению, не имеет значения, поскольку результаты частично совпадают.

В этом исследовании не было обнаружено никакой связи между размером мембран и содержанием гемоглобина или содержанием эритроцитов, обнаруженных при исходном анализе крови. При оптической микроскопии [Рис. 3] большая часть клеточных тел (окрашенных в темно-фиолетовый цвет для ядер) была сосредоточена в проксимальной части (головке) каждой мембраны, последняя 1/4 наблюдалась в центре, а дистальная часть имелись только остаточные следы тел клеток.Однако оптическая микроскопия не позволила более детально наблюдать точное состояние этих клеточных тел. Большинство клеток сосредоточено в проксимальной области (голове), ближайшей к красному сгустку.

Рис. 3. Мембрана L-PRF через 0 мин после компрессии (окрашивание гематоксилин-эозином). (A) III проксимальный фибрин 25 × образец лейкоцитов; (B) фибрин среднего уровня III 60 × эритроцитов; (C) III дистальный фибрин с рисунком 60 ×; (D) III проксимальный 25 × эритроцитов-фибрин; (E) III проксимальный 60 × фибрин справа, центральные лимфоциты, эритроциты и нейтрофилы гранулоцитов слева; (F) средний III 25 × образец фибрина; (G) III дистальный фибрин с рисунком 60 ×; (H) мазок красного сгустка 40 × присутствие моноцитов в ковре красных клеток; (I) мазок красного сгустка 40 × наличие эритроцитов, моноцитов и тромбоцитов; (J) мазок красного сгустка 100-кратное присутствие тромбоцитов в ковре красных клеток (окраска: may-grǔnwald-giemsa)

На рисунке 4A показаны средние характеристики мембраны, полученные с помощью L-PRF Wound Box после нескольких минут сжатия (2, 5, 10 и 15 мин).Небольшие различия между M05 min, M10 min, M15 min, M02 min сравниваются, чтобы заставить нас обратиться к использованию мембраны через 2 минуты после начала сжатия [Таблица 2].

Таблица 2

Тест значимости вариаций параметров мембраны L-PRF для сжатия с L-PRF Wound Box в течение 2, 5, 10 и 15 мин, ( P )

34 * *

Переменная	Базальный и M02 min		Базальный и M05 min		Базальный и M10 min		Базальный и M15 min		M02′-M05′- M10′-M15 ‘
Параметр Student	ANOVA	ANOVA Стьюдента t	ANOVA	Стьюдент t	ANOVA	Стьюдент t	ANOVA	χ 903	0,006	0,002 *	0,005 *	0,002 *	0,005 *	0,001 *	0,006	1.000
% снижение веса (г)			/	/	/	/	/	0,852
% редуцирующий сгусток (г)	0,000 *	0,000 *	0,000 *	0,000 *	0,000 *	0,000 0.000 *	0,000 *	0,000 *	/
Длина мембраны (мм)	0,031	0,004	0,039	0,002 *	0,019	0,002 *	0,019	0,002 * *	1.000
Ширина мембраны (мм)	0,015	0,021	0,001 *	0,005 *	0,001 *	0,006	0,001 *	5 0,001000
Высота мембраны (мм)	0,018	0,054	0,005 *	0,020	0,002 *	0,014	0,002 *	0,008		1.000 Площадь поверхности 905 мембрана (см 2 )	0,506	0,137	0,083	0,079	0,058	0,078	0,038	0,066	1.000

9000 Рисунок(A) Средние характеристики характеристик мембраны L-PRF, полученные на модели лошади с L-PRF Wound Box в течение нескольких минут сжатия: вес (г), высота (мм), длина (см), ширина (см), размер ( ² см) и% снижения веса при сжатии; (B) средние характеристики мембраны L-PRF, полученные на модели лошади с L-PRF Wound Box: вес (г), высота (мм), длина (мм), ширина (мм), площадь поверхности (см ²⁾ ), A — измерение в разное время, а B — в M02; (C)% снижения веса во время сжатия; (D) изменения внешней и внутренней температуры во время центрифугирования при 23 ° C (B) и при 30 ° C (A), отбор с помощью системы Vacutainer и шприца объемом 9 мл после 2 мин сжатия

Рабочая температура должна быть между 21 и 30 ° C, потому что сгусток не образуется при более низкой температуре.На рисунке 4D показаны температуры, измеренные во время центрифугирования внутри и вне низкотемпературного (23 ° C) и высокотемпературного (30 ° C) центрифугирования в разное время. Обратите внимание, что увеличение скорости вращения увеличивает внутреннюю температуру.

При использовании 9-миллилитровых шприцев вместо системы отбора проб вакутайнер производимые мембраны меньше по размеру [Рис. 4B], как с точки зрения веса, длины, ширины и общей полезной площади. После 2-минутной компрессии уменьшение веса мембраны по сравнению со сгустком составляет 85%, если он взят шприцем, и 70%, если он взят с помощью системы Vacutainer [Рисунок 4C].

Результаты анализа цельной крови и супернатанта, полученные из сгустка через 0 мин и после 60 мин сжатия, сравниваются с подсчетом эритроцитов, тромбоцитов и мазка лейкоцитов красного сгустка после 0 и 60 мин, и показаны с соответствующими статистическими тестами в Таблице 3, тогда как микроскопические изображения через 60 мин показаны на Рисунке 5.

Таблица 3

Эмокромоцитометрическое исследование полной крови в сравнении с количеством эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов на красной полоске сгустка при 0 «и 60» с тестами значимости

3 Neo

Тип	CBC кровь	Мазок C.0 мин	CR мазок 60 мин	Между красным сгустком мазок 0-60 мин
	Среднее ± SD	Среднее ± SD	Среднее ± SD	t -test *		χ 2
RBC	7,648,000 ± 11,309,81	7,399,440 ± 27,039,76	7,322,960 ± 81119,29	P .000	S
WBC	5,150 ± 369	8,5 ± 2,12	0,5 ± 0,71	P = 0,037	S	P 36 PLT	106780 ± 153,51	500 ± 707,11	6000 ± 1414,21	P = 0,039	S	P = 0,000	S
	/	/	/	/	/	/
Базофилы	4.2 ± 1,3	/	/	/	/	/	/
Lynphocites	1,606 ± 668	/	/	/	/
Моноциты	490,2 ± 138,06	/	/	/	/	/	/
Eosinophils4 ± 5,37	/	/	/	/	/	/

Рис. 5. Мембрана L-PRF 60 мин по мощности сжатия (окрашивание гематоксилин-эозином). (A) III проксимальный фибрин 25 × белых кровяных клеток-эритроцитов; (B) средний-III 25 × узор фибрин; (C) III проксимальный 60-кратный рисунок фибрина справа, центральные лимфоциты, эритроциты и нейтрофилы гранулоцитов слева; (D) III проксимальный 60 × фибрин справа, центральные лимфоциты, эритроциты и нейтрофилы гранулоцитов слева; (E) средний III 60 × образец фибрина с лимфоцитами; (F) мазок красного сгустка 40 × наличие тромбоцитов в ковре красных клеток; (G) мазок красного сгустка 40 × наличие эритроцитов и большого количества тромбоцитов; (H) мазок красного сгустка 100-кратное присутствие большого количества тромбоцитов в ковре красных клеток (окрашивание по Май-Гренвальду-Гимзе)

Существует также статистически значимая разница между содержанием эритроцитов, лейкоцитов и PLT в мазках, полученных из красный сгусток через 0 и 60 мин, как показано на рисунках 3 и 5A-C при разном увеличении.В таблицах 3, 4 и 5 также показано гипотетическое содержание эритроцитов, лейкоцитов и PLT в мембранах L-PRF, полученное из разницы этих корпускулярных элементов между цельной кровью, супернатантом через 0 и 60 минут и мазком красного сгустка. на 0 и 60 мин. Тест t показывает значительные различия между эритроцитами через 0 и 60 минут и между PLT через 0 и 60 минут в мембранах L-PRF.

Таблица 4

Гемокромоцитометрическое исследование надосадочной жидкости при 0 ‘по сравнению с 60’ с тестами значимости

Тип	Надосадочная жидкость общего анализа крови при 0 мин	Надосадочная жидкость СВС.через 60 мин	Между супернатантом общего анализа крови 0-60 мин
	Среднее ± SD	Среднее ± SD	t -тест *		χ 2

905BC 13,428 ± 21,345 73,714 ± 186,233 P = 0,411 НЗ P = 0,000 S WBC 10953695 P = 0,255 NS P = 0,000 S PLT 479 ± 77,614 3,627 ± 3,401 P = 0,000 S Нейтрофилы 0,29 ± 0,76 1,29 ± 2,21 P = 0,280 NS

9039 9039 9039 9039

9036 NS Базофилы

2.29 ± 2,14 2 ± 1,73 P = 0,785 NS P = 0,611 NS Lynphocites 19 ± 23365 19 ± 2336,69 = 0,238 NS P = 0,000 S Моноциты 4,57 ± 7,68 2,86 ± 5,01 P = 0,631 P = 0,631928 NS Эозинофилы 4 ± 9,71 4,57 ± 7,96 P = 0,906 NS P

NS P Таблица эритроциты, тромбоциты и лейкоциты на мембранах L-PRF, полученные из сгустков на 0 ‘по сравнению с теми, которые получены из сгустков на 60’ с помощью тестов значимости

0,00

Тип	Мембрана 0 мин		Мембрана 60 мин		Между мембранами L- PRF 0-60 мин
	No./ мл	%	Кол-во / мл	%	t -тест *		χ 2
RBC			193,966	0,0025%	P = 0,000	S	P = 0,266	NS
WBC	% 5,111,15	,8980%	P = 0,007	NS	P = 0,993	NS
PLT	105,801	99,00%	97536 91	S	P = 1.000	NS

Содержание эритроцитов в мембранах составляет 0,0028%, лейкоцитов — 99,24%, а PLT — 99,0% по сравнению с общим содержанием кровь.Мембраны после 60 мин сжатия имеют содержание эритроцитов, лейкоцитов и PLT ниже, чем через 0 мин [Таблица 5].

Обсуждение

Успех этого метода полностью зависит от сбора крови и скорости переноса в центрифуге ^[7,8] . Конская кровь использовалась Textor et al . ^[9] для PRF.

Исследование, проведенное McLellan и Plevin ^[15] , показало, что PRF у лошадей аналогична PRF у людей, обеспечивая непосредственный и постоянный источник факторов роста тканей.В нашем исследовании была предпринята попытка стандартизировать подготовку процедуры L-PRF, которая, оставаясь простой и недорогой техникой, не требует специального оборудования, но имеет определенное постоянство при производстве мембраны с точки зрения L- Макроскопические и микроскопические особенности PRF. Аутологические концентраты тромбоцитов перспективны в области регенеративной медицины из-за большого количества факторов роста.

L-PRF представляет собой очень значительный шаг вперед в эволюции концентратов тромбоцитов, поскольку это, по сути, фибриновая мембрана, внутри которой находятся тромбоциты и лейкоциты.Эти твердые мембраны обладают превосходными эксплуатационными характеристиками и могут быть надежно зашиты в анатомически желаемом месте во время открытой операции. Однако физические и биологические свойства относительно неизвестны. L-PRF будет формироваться, когда шаги, описанные выше, будут строго соблюдаться.

Коробка для намотки PRF, которая существует на рынке, бывает различной формы и доступности, благодаря прижимной пластине, с различным давлением в зависимости от веса, что дает мембрану различной толщины, ширины и длины.

Одним из наиболее важных факторов для создания хорошей мембраны L-PRF является задержка во времени между сбором крови и центрифугированием, а также температура обработки. Успех метода L-PRF полностью зависит от скорости сбора крови и немедленного переноса крови в центрифугу, обычно в течение 1 мин, а также от температуры центрифугирования и более высокого давления при 21 ° C. Вы не можете создать сгусток хорошо структурированного L-PRF (с его конкретным клеточным содержанием, архитектурой матрицы и профилем высвобождения факторов роста), если сбор крови продолжительный и неоднородный, или если температура центрифугирования от 21 до 30 ° C; вместо этого он образует непоследовательную рассыпчатую массу фибрина с неизвестным содержанием.L-PRF работает как временный внеклеточный матрикс, который трансформируется в функциональную ткань во время заживления и может успешно подвергаться механическим воздействиям и результатам заживления, в зависимости от структурной целостности L-PRF, поэтому важно уточнить его физические свойства.

L-PRF выглядит как плотная соединительная ткань с превосходными эксплуатационными характеристиками. При модуле упругости 0,470 МПа (SD = 0,107) мембрана L-PRF растягивается вдвое по сравнению с исходной длиной до разрыва (деформации 215%).Эти данные согласуются с опубликованной литературой ^[6] , в которой сообщается о низкой жесткости (1-10 МПа) и высоком напряжении (до 150%) перед разрушением.

На основании этих результатов становится ясно, что L-PRF — это новый биоматериал с уникальными характеристиками: ожидаемая подготовка аутокрови, простота протокола, определенная архитектура, впечатляющие механические свойства и обилие полученных наростов. факторы от активированных тромбоцитов.

Мембраны L-PRF, полученные авторами от лошади, ассимилируются с человеческими как с точки зрения морфологии, так и с точки зрения микробиологии.Биохимическое поведение в этом исследовании не исследовалось. В будущем наши эксперименты с лошадиной кровью, несомненно, смогут улучшить наше понимание заживления ран у людей, а также будут способствовать развитию области персонализированной медицины.

Наши эксперименты на лошадях по стандартизации производства L-PRF, несомненно, улучшат наше понимание заживления ран, особенно в регенеративной терапии хронических повреждений кожи у людей. Собранные данные показывают, что лучший метод подготовки — это 2-минутное сжатие сгустка после 0 минут забора крови с использованием системы Vacutainer на 9 мл, а не шприца на 9 мл.Предел этого исследования — отсутствие подробных биохимических характеристик перепонок лошади по сравнению с человеческими. Проблемы, связанные с сохранением этих мембран, значительно ограничивают их использование. Криоконсервация при 4 ° C может быть решением этой проблемы, но на данный момент данные, представленные в литературе, не обнадеживают из-за сокращенного периода полужизни криоконсервированных тромбоцитов (<2 дней) по сравнению с свежими (3,5-3,8 дня). ^[16] . Данные о максимальном времени хранения и идеальной температуре для сохранения PRF в значительной степени отсутствуют.В будущих исследованиях мы хотели бы проверить гипотезу Пека и др. . ^[11] сравнение параметров, наблюдаемых через 0 и 60 мин при центрифугировании с использованием сухих пробирок Vacutainer и пробирок Vacutainer с разделяющим гелем, анализ полученного продукта с помощью сканирующего электронного микроскопа. Мы также должны учитывать, как долго PRF (сгусток или мембрана) остается стабильным после его создания и можно ли эффективно использовать экссудат, собранный в раневом боксе L-PRF, для фиксации аутологичных трансплантатов (мембрана L-PRF или биопроводящая или биоиндуктивная дерма).

Декларации

Вклад авторов

Основная часть статьи: A. Crisci, E. Serra

Исправление рукописи: D. Lombardi, F. Cardillo

Подготовка рукописи: M. Crisci, G. Lombardi

Financial поддержка и спонсорство

Все расходы взял на себя первый автор. Ни спонсорства, ни финансовой поддержки не было.

Конфликт интересов

Конфликтов интересов нет.

Согласие пациента

На всех лошадей получено письменное согласие владельцев.

Одобрение этики

Поскольку владельцы лошадей дали согласие, мы не пошли на этическое освобождение.

Авторские права

© Автор (ы) 2017.

Цитируйте эту статью

Криши А, Ломбарди Д, Серра Э, Ломбарди Дж., Кардилло Ф, Криши М.Предложен стандартизированный протокол для клинического использования L-PRF и использования L-PRF Wound Box®. J Неизведанные медицинские данные 2017; 2: 77-87. http://dx.doi.org/10.20517/2572-8180.2017.17

Статистика доступа к статьям

полнотекстовых просмотров каждый месяц

PDF-загрузок каждый месяц

Количество обращений в год

* Все данные взяты из Crossref

Фибрин, обогащенный тромбоцитами (PRF) — Использование | Преимущества | Недостатки | Рабочий

В настоящее время, одним из самых перспективных нововведений в области хирургической стоматологии является использование богатого тромбоцитами фибрина (PRF).Используется отдельно или в качестве добавки с другими биоматериалов, он ускоряет механизм заживления тканей и уменьшает воспаление.

Фибрин, богатый тромбоцитами (PRF) используется в регенеративной медицине и стоматологии. Использование PRF сообщило о значительных преимуществах, поскольку оно улучшает клетки-остеопрогениторы в кости-хозяине и костном трансплантате. Протокол PRF устно и челюстно-лицевая хирургия была внедрена для улучшения заживления кости в имплантате. стоматология и ее применение в различных областях стоматологии.

Французский хирург по имени доктор Джозеф Чукроун впервые осознал, когда проводил операции на лице что PRF ускоряет заживление. Этот метод сейчас признан эффективным лечение для ускорения заживления во время стоматологической хирургии и удаления зубов. Система центрифуги PRF Choukroun позволяет нам извлекать кровь, отделять тромбоцитов и факторов роста, и снова добавьте мощную группировку в свой тело.

Что такое фибрин, обогащенный тромбоцитами (PRF?)

с высоким содержанием тромбоцитов Вещество фибрина (PRF) — это побочный продукт крови (плазмы), богатый тромбоциты.Короче говоря, PRF — это просто побочный продукт крови. Он исключительно богат тромбоцитами и факторы роста — «сигнальные» молекулы, которые обеспечивают связь между клетки.

PRF — это инструмент, который значительно улучшает регенерацию костей и мягких тканей. В последнее время его использование стало был рекомендован для регенеративной пародонтологии и заживления ран.

Какая польза от фибрина, обогащенного тромбоцитами (PRF)?

• Богатые тромбоцитами фибрин (PRF), как известно, обладает несколькими свойствами, которые помогают в заживлении и регенерация.
• PRF мембрана помогает в лечении дефектов пародонта. Защищает открытые раны от ротовой полости. окружающая среда, когда шов не может связать края слизистой оболочки.
• ПРФ, в в сочетании с лиофилизированным костным аллотрансплантатом (FDBA), улучшает регенерацию кости в процедуре лифтинга гайморовой пазухи. Значительно снижается заживление время до установки имплантата.
• ПРФ может действовать как биологический цемент, чтобы удерживать частицы вместе, помогая манипулировать костные трансплантаты.
• PRF значительно усиливает образование новой кости по сравнению с заживлением без PRF
• PRF мембраны в качестве единственного трансплантата используется для замены дна гайморовой пазухи увеличение.
• PRF мембрана помогает в заживлении ран, защищая хирургические процедуры, смягчая восстановление тканей, и при смешивании с костным трансплантатом он может действовать как «биологический разъем ».
• Богатые тромбоцитами фибрин — это система концентратов крови, которая используется для мягких тканей и костей регенерация тканей.

Преимущества использования фибрина, обогащенного тромбоцитами (PRF)

• PRF безопасен и быстро, поскольку это побочный продукт крови пациента. Следовательно, болезнь передача не проблема. В течение амбулаторная хирургическая процедура, меньшее количество крови берется через IV. Эта кровь помещается в центрифугу PRF и вращается. В менее чем за пятнадцать минут PRF сформирован и готов к использованию.
• PRF — это быстро и удобно производится в кабинете врача, пока пациент испытывает амбулаторная хирургическая процедура, например установка зубных имплантатов и другие.
• The перенасыщение раны PRF и, следовательно, факторами роста, вызывает увеличение синтеза тканей и, следовательно, более быстрая регенерация тканей и более быстрое заживление.
• Пациент не требует затрат на уборочную технику в больнице или банк крови для PRF. Это рентабельно и безопасно.
• Один из Основные преимущества PRF — это малоинвазивная методика с низкими рисками и удовлетворительные клинические результаты, такие как предотвращение осложнений или имплантация неэффективность, особенно у пожилых пациентов с возрастными заболеваниями.
• ПРФ имеет многие клинические приложения, такие как костная пластика для зубных имплантатов, включают накладки и вставки трансплантатов, процедуры увеличения гребня и закрытие расщелины, губы и дефекты неба, процедуры синус-лифтинга. PRP помогает организму воспользоваться стандартными методами лечения со значительно увеличенной скоростью; тело устремляется к многочисленным клеткам, и типы клеток рана, чтобы начать процесс заживления.
• Помогает в восстановление костных дефектов путем обработки мелких кист или путем извлечения зубы зуб.

Недостатки использования фибрина, обогащенного тромбоцитами (PRF)

• реализация протокола PRF напрямую зависит от обработки, главным образом, время сбора крови и передачи на центрифугу. Финал доступное количество может быть низким, потому что это собственная кровь.
• Только требует большего, чем минимальный опыт клинициста для манипуляции PRF. Пациентам с нарушениями свертываемости крови или гематологическими заболеваниями не рекомендуется имеют право на эту внутрифирменную процедуру.Вам понадобится опытный хирург / терапевт. чтобы определить, подходит ли вам PRP.

Как работает богатый тромбоцитами фибрин (PRF)?

Небольшое количество кровь берется у пациента и затем помещается в центрифугу PRF машина, в которой кровь разделяется на эритроциты, лейкоциты, и тромбоциты. При удалении зуба или другой стоматологической процедуре PRF возвращает в организм обогащенную кровь и способствует заживлению в том месте, где это очень нужно.Группировка тромбоцитов и факторов роста регенеративные возможности, наблюдается заживление твердых и мягких тканей чтобы быть быстрее и помочь пациенту быстрее восстановиться после удаления зуба.

В стоматологии, во время стоматологической операции кость челюсти обнажается и очищается. Jawbone имеет очень недостаточное кровоснабжение, связанное с другими тканями тела. Ткань, где снижается количество крови, снижается способность организма к исцелению ну и меньше защиты от бактериальной и грибковой инфекции.Добыча участки обычно оставляют для заживления обнаженными и открытыми в ротовую полость без PRF. Во время заживления места удаления, слюны, бактерий и других загрязняющих веществ влить в уязвимую кость челюсти. Терапия, богатая тромбоцитами и фибрином, когда их помещают в выемки, обработка защищает участок от инфекционное заболевание. Это также обогащает область с белками и факторами роста, которые способствуют росту новых костей. В разделах имплантаты расположены, PRF занимает пространство между костной лункой и Зубной имплантат.Сайты дентальных имплантатов с фибрино-тромбоцитарной терапией увеличивают вероятность хирургического успеха и снижают уровень бактериальной инфекции в кости.

Центрифуга

PRF доступна в Центре Implant Pro (IPC), Сан-Франциско. Пожалуйста, позвоните или свяжитесь с нами, чтобы назначить бесплатную консультацию.

Прочие стоматологические и клинические применения Богатый тромбоцитами фибрин (PRF)

• В дефекты пародонта
• Остеит уменьшился в области хирургических вмешательств третьих моляров
• В десне трансплантат
• Многократно удаление для сохранения высоты альвеолярного гребня
• Кость регенерация вокруг немедленных имплантатов
• Внутри альвеолярный дефект
• PRF сгустки используются непосредственно для заполнения полостей и в тканевой форме.
• Для малых отологов хирургия, PRF полезна.

Богатые тромбоцитами фибрин — это новое слово в хирургии. С улучшенным заживлением и иммунная поддержка, операция может привести к более быстрому и лучшему заживлению, с меньшим количеством послеоперационные осложнения. В последнее время фибрин, богатый тромбоцитами, стал общепринятым. малоинвазивная техника с низким риском и удовлетворительными клиническими результатами. Тромбоциты Свойства коагулятора делают их отличными кандидатами для лечения в более крупных масштабах. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF) — это лечебный биоматериал с высокой вероятностью регенерация костей и мягких тканей.Лишен любых воспалительных реакций и может использоваться отдельно или вместе с костью трансплантаты, рост костей, содействие гемостазу и прогресс. PRF отображается как естественная и разумная помощь в восстановительной костной хирургии у пожилых пациентов с благоприятным результатом и низкими рисками.

В Implants Pro Center ™, Сан-Франциско, мы принимаем все основные стоматологические и медицинские страховки PPO, тем самым снижая ваше беспокойство по поводу стоимости лечения зубных имплантатов или любых оральных операций. У нас также есть чрезвычайно опытный и заботливый персонал, который обеспечит пожизненный уход, обслуживание и поддержку.Implants Pro Center ™, Сан-Франциско, также оснащен всеми современными технологиями, такими как компьютерная томография, внутривенная седация, обогащенный тромбоцитами фибрин и т. Д., Чтобы предоставить не что иное, как лучшие услуги. Вы будете чувствовать себя комфортно при любой стоматологической процедуре. Не стесняйтесь связаться с нами, чтобы назначить консультацию.

Поставьте нам лайк на:

PRF Богатый тромбоцитами фибрин Миннеаполис, Миннесота

Естественный выбор, чистый и простой для лечения опадения десен и потери костной массы

Ткань десны и потеря кости челюсти вызывают рецессию десны, что потребует трансплантата кожи нёба рта. для коррекции рецессии тканей десны.Исцеление от нёба может быть долгим процессом. Решением этих и других сложных ситуаций является новая терапия тромбоцитами, созданная на основе вашей собственной крови.

Фибрин, обогащенный тромбоцитами (PRF), меняет все правила, поскольку он способствует заживлению и росту костей внутри вашего собственного тела. В отличие от других методов лечения, в которых используются искусственные компоненты, в терапии тромбоцитов с PRF используется только ваша собственная кровь. Благодаря простому забору крови и протоколу передовых технологий, PRF создается для вас индивидуально — от вас.Конечными результатами являются улучшенная реакция заживления и значительно меньшее время восстановления.

ВАША СОБСТВЕННАЯ СИЛА ИСЦЕЛЕНИЯ

Если у вас образовалась небольшая царапина на колене, ваше тело отреагирует, образуя сгусток, чтобы остановить кровотечение, образовать струп и, наконец, восстановить новую здоровую кожу. Терапия фибрином тромбоцитов аналогична.

Собирается небольшое количество крови для создания продвинутого биологически активного соединения, которое будет усиливать целительные силы, обнаруженные в вашей собственной крови, для улучшения вашего заживления.Процедура получения PRF практически безболезненна — не более, чем обычный анализ крови.

Терапия на 100% натуральная и не содержит добавок. Естественные факторы роста, присутствующие в вашем теле, концентрируются с помощью PRF. Ваши собственные концентрированные тромбоциты и другие ключевые клетки крови и их уникальные способности к исцелению просто повторно вводятся на месте хирургической процедуры. В результате ваше собственное тело высвобождает мощные лечебные белки и создает основу для исцеления.

ЕСТЕСТВЕННЫЙ ВЫБОР, ЧИСТЫЙ И ПРОСТОЙ

Система PRF ™, единственная в своем роде процедура, позволяет докторуСанчес создать столько мембран PRF, сколько сочтет необходимым. После взятия пробы крови пробирки вращают с использованием очень специфической центрифуги и протокола. Затем мембраны PRF удаляются и прессуются до идеальной толщины. PRF не подвергается химическим изменениям и не содержит никаких синтетических, животных или других человеческих ингредиентов.

После создания PRF его можно разместить непосредственно в / на хирургических участках, чтобы немедленно ускорить заживление. PRF также является отличным способом для доктора Санчеса применять другие регенерирующие материалы к определенному операционному полю по мере необходимости.Фибриновую мембрану PRF можно разделить, скомбинировать с костным трансплантатом или коллагеновым материалом и подготовить к любым показаниям. Доктор Санчес определит для вас наиболее подходящую технику PRF.

ИСЦЕЛЕНИЕ ИЗНУТРИ

PRF ™ — это, по сути, биоактивный «пластырь», который создается из вашей собственной крови и затем помещается в места проведения операции для ускорения заживления. Образец вашей крови собирается в пробирку, как это делается для анализа крови. Затем доктор Санчес использует уникальную систему PRF ™ для разделения и концентрирования определенных важных клеток и активных белков путем центрифугирования вашей собственной крови в специальной центрифуге.После быстрой подготовки биоактивная мембрана PRF, созданная только из вашей собственной крови, теперь идеально подходит для вашей процедуры.

При размещении в местах хирургического вмешательства PRF высвобождает естественные целебные белки вашего тела, создавая более эффективную сеть для клеток, улучшающую процесс заживления. В зависимости от вашей ситуации ваш пародонтолог может дополнить вашу мембрану PRF различными биоматериалами, подобранными в соответствии с вашими потребностями. Для пациентов со значительной потерей костной массы можно также использовать комбинацию PRF и материала для роста кости для ускорения естественной регенерации кости.Для пациентов со значительной рецессией десен PRF можно комбинировать с коллагеном или трансплантатами десен для ускорения регенерации.

ОБЩИЕ ВОПРОСЫ ПО PRF

Что такое PRF?

PRF означает фибрин с высоким содержанием тромбоцитов. PRF содержит лейкоциты и тромбоциты. Лейкоциты также известны как белые кровяные тельца. Они являются частью иммунной системы и отвечают за исцеление нашего организма. Тромбоциты — это тоже клетки крови. Они отвечают за привлечение заживляющих клеток, создание кровяных мембран.Они также являются ключевыми клетками для производства факторов роста. Фибрин — еще один компонент крови, который работает с тромбоцитами, создавая кровяные мембраны.

Как создаются мембраны PRF?

Мембраны

PRF сначала создаются путем взятия у вас небольшого образца крови. Пробирки с образцами крови вращаются в процессе центрифугирования. Это создает матрицу или кровяную мембрану. В Затем матрицу удаляют из трубки и помещают в устройство, предназначенное для сжатия матрицы до желаемой толщины.

Что такое терапия фибрином тромбоцитов?

При терапии фибрином тромбоцитов используется мембрана PRF для ускорения заживления.

Болезненно ли PRF?

Это так же безболезненно, как и обычный анализ крови.

Как работает PRF для заживления?

PRF обеспечивает концентрированное высвобождение заживляющих белков, создает основу для прямого заживления, а также формирует более эффективную сеть для взаимодействия клеток с другими клетками и тканями.Из-за высокой концентрации тромбоцитов и лейкоцитов в мембране PRF фибрин высвобождает факторы роста в течение 14 дней после размещения. Это когда организм восстанавливается и нуждается в дополнительной помощи.

Есть ли побочные эффекты или осложнения от PRF?

PRF использует вашу собственную кровь, без каких-либо добавок. Снижение риска аллергии или побочных эффектов, потому что ваши собственные концентрированные тромбоциты с их собственными уникальными способностями к исцелению просто повторно вводятся в месте рецессии десны.

Какие типы состояний лечятся PRF?

В настоящее время PRF используется для стоматологических и челюстно-лицевых хирургических процедур, включая рецессию десен, зубные имплантаты, дефекты костей, экстракционные лунки, увеличение пазух и зубных гребней, дефекты неба и атрофию верхнечелюстной кости.

Система

IntraSpin — BioHorizons

Глобальная штаб-квартира
2300 Riverchase Center
Бирмингем, AL 35244
США

тел: 888.246,8338
тел: 205.967.7880
факс: 205.870.0304

Отправить письмо

BioHorizons Canada
Янтарная улица, 21, кв. №6
Маркхэм, Онтарио L3R 4Z3
Канада

тел: 866.468,8338
факс: 905.944.1894

Отправить письмо

BioHorizons Chile, S.A.
Средний. Manquehue Norte 1337 Офис 31
Vitacura
Сантьяго
Чили

тел: +56 (2) 23619519
факс: +56 (2) 361.9521

Отправить письмо

BioHorizons Italia Srl
Via Ettore Cristoni, 88
40033 Casalecchio di Reno (BO) Италия

numero verde +800.063.040
тел. +39.051.59.07.00
факс +39.051.57.61.06

Отправить письмо

BioHorizons Мексика
Краковия № 72 Торре B, Офис: BGO-07, полковник Сан-Анхель
CP: 01000, Сьюдад-де-Мексико, Альваро-Обрегон, CDMX

тел.800 953 0498

Отправить письмо

Испанский офис
BioHorizons Испания
Calle Oruro, 9
28016 Мадрид,
Испания

тел: +34.91.713.10.84
факс: +34.91.355.83.75

Отправить письмо

BioHorizons Camlog UK и Ирландия
Ричмонд Хаус
Олдбери-роуд,
Брэкнелл
Berkshire RG12 8TQ
Великобритания

тел: +44 (0) 1344 752560
факс: +44 (0) 1344 868049

Отправить письмо .

No related posts.