Разработка противовирусных препаратов для терапии инфекции коксакивируса В3 | Волобуева

1. Романенкова Н.И., Бичурина М.А., Розаева Н.Р., Канаева О.И., Шишко Л.А., Черкасская И.В., Кириллова Л.П. Вирусы Коксаки В1—6 как этиологический фактор энтеровирусной инфекции // Журнал инфектологии. 2016. Т. 8, № 2. С. 65—71.

2. Abdelnabi R., Geraets J.A., Ma Y., Mirabelli C., Flatt J.W., Domanska A., Delang L., Jochmans D., Kumar T.A., Jayaprakash V., Sinha B.N., Leyssen P., Butcher S.J., Neyts J. A novel druggable interprotomer pocket in the capsid of rhino- and enteroviruses. PLoS Biol., 2019, vol. 17, no. 6: e3000281. doi: 10.1371/journal.pbio.3000281

3. Ang M.J., Lau Q.Y., Ng F.M., Then S.W., Poulsen A., Cheong Y.K., Ngoh Z.X., Tan Y.W., Peng J., Keller T.H., Hill J., Chu J.J., Chia C.S. Peptidomimetic ethyl propenoate covalent inhibitors of the enterovirus 71 3C protease: a P2-P4 study. J. Enzyme Inhib. Med. Chem., 2016, vol. 31, no. 2, pp. 332-339. doi: 10.3109/14756366.2015.1018245

4. Bailey J.M., Tapprich W.E. Structure of the 5‘ nontranslated region of the coxsackievirus b3 genome: chemical modification and comparative sequence analysis. J. Virol., 2007, vol. 81, no. 2, pp. 650-668. doi: 10.1128/JVI.01327-06

5. Blyszczuk P. Myocarditis in humans and in experimental animal models. Front. Cardiovasc. Med., 2019, vol. 6: 64. doi: 10.3389/fcvm.2019.00064

6. Cai Z., Shen L., Ma H., Yang J., Yang D., Chen H., Wei J., Lu Q., Wang D.W., Xiang M., Wang J. Involvement of endoplasmic reticulum stress-mediated C/EBP homologous protein activation in Coxsackievirus B3-induced acute viral myocarditis. Circ. Heart Fail., 2015, vol. 8, no. 4, pp. 809-818. doi: 10.1161/circheartfailure.114.001244

7. Chen J., Ye X., Zhang X.Y., Zhu Z., Zhang X., Xu Z., Ding Z., Zou G., Liu Q., Kong L., Jiang W., Zhu W., Cong Y., Huang Z. Coxsackievirus A10 atomic structure facilitating the discovery of a broad-spectrum inhibitor against human enteroviruses. Cell Discov., 2019, vol. 5, no. 4, 15 p. doi: 10.1038/s41421-018-0073-7

8. Cornell C.T., Kiosses W.B., Harkins S., Whitton J.L. Coxsackievirus B3 proteins directionally complement each other to down-regulate surface major histocompatibility complex class I. J. Virol., 2007, vol. 81, no. 13, pp. 6785-6797. doi: 10.1128/JVI.00198-07

9. Coyne C.B., Bergelson J.M. Virus-induced Abl and Fyn kinase signals permit coxsackievirus entry through epithelial tight junctions. Cell, 2006, vol. 124, no. 1, pp. 119-131. doi: 10.1016/j.cell.2005.10.035

10. Dunn J.J., Bradrick S.S., Chapman N.M., Tracy S.M., Romero J.R. The stem loop II within the 5‘ nontranslated region of clinical coxsackievirus B3 genomes determines cardiovirulence phenotype in a murine model. J. Infect. Dis., 2003, vol. 187, no. 10, pp. 1552-1561. doi: 10.1086/374877

11. Dutkiewicz M., Swiatkowska A., Ojdowska A., Smolska B., Dymarek-Babs T., Jasinska A., Ciesiolka J. Molecular mechanisms of genome expression of coxsackievirus B3 that belongs to enteroviruses. BioTechnologia, 2012, vol. 93, no. 4, pp. 414-423. doi: 10.5114/bta.2012.46595

12. Graci J.D., Too K., Smidansky E.D., Edathil J.P., Barr E.W., Harki D.A., Galarraga J.E., Bollinger J.M. Jr., Peterson B.R., Loakes D., Brown D.M., Cameron C.E. Lethal mutagenesis of picornaviruses with N-6-modified purine nucleoside analogues. Antimicrob. Agents Chemother., 2008, vol. 52, no. 3, pp. 971-979. doi: 10.1128/AAC.01056-07

13. Groarke J.M., Pevear D.C. Attenuated virulence of pleconaril-resistant coxsackievirus B3 variants. J. Infect. Dis., 1999, vol. 179, no. 6, pp. 1538-1541. doi: 10.1086/314758

14. Gruez A., Selisko B., Roberts M., Bricogne G., Bussetta C., Jabafi I., Coutard B., De Palma A.M., Neyts J., Canard B. The crystal structure of coxsackievirus B3 RNA-dependent RNA polymerase in complex with its protein primer VPg confirms the existence of a second VPg binding site on Picornaviridae polymerases. J. Virol., 2008, vol. 82, no. 19, pp. 9577-9590. doi: 10.1128/JVI.00631-08

15. Harki D.A., Graci J.D., Galarraga J.E., Chain W.J., Cameron C.E., Peterson B.R. Synthesis and antiviral activity of 5-substituted cytidine analogues: identification of a potent inhibitor of viral RNA-dependent RNA polymerases. J. Med. Chem., 2006, vol. 49, no. 21, pp. 6166-6169. doi: 10.1021/jm060872x

16. Hayden F.G., Herrington D.T., Coats T.L., Kim K., Cooper E.C., Villano S.A., Liu S., Hudson S., Pevear D.C., Collett M., McKinlay M. Efficacy and safety of oral pleconaril for treatment of colds due to picornaviruses in adults: results of 2 double-blind, randomized, placebo-controlled trials. Clin. Infect. Dis., 2003, vol. 36, no. 12, pp. 1523-1532. doi: 10.1086/375069

17. Jagdeo J.M., Dufour A., Klein T., Solis N., Kleifeld O., Kizhakkedathu J., Luo H., Overall C.M., Jan E. N-terminomics TAILS identifies host cell substrates of poliovirus and Coxsackievirus B3 3C proteinases that modulate virus infection. J. Virol., 2018, vol. 92, no. 8: e02211-17. doi: 10.1128/JVI.02211-17

18. Kim B.K., Cho J.H., Jeong P., Lee Y., Lim J.J., Park K.R., Eom S.H., Kim Y.C. Benserazide, the first allosteric inhibitor of Coxsackievirus B3 3C protease. FEBS Lett., 2015, vol. 589, no. 15, pp. 1795-1801. doi: 10.1016/j.febslet.2015.05.027

19. Kim B.K., Ko H., Jeon E.S., Ju E.S., Jeong L.S., Kim Y.C. 2,3,4-Trihydroxybenzyl-hydrazide analogues as novel potent coxsackievirus B3 3C protease inhibitors. Eur. J. Med. Chem., 2016, vol. 120, pp. 202-216. doi: 10.1016/j.ejmech.2016.03.085

20. Kishimoto C., Crumpacker C.S., Abelmann W.H. Ribavirin treatment of murine coxsackievirus B3 myocarditis with analyses of lymphocyte subsets. J. Am. Coll. Cardiol., 1988, vol. 12, no. 5, pp. 1334-1341. doi: 10.1016/0735-1097(88)92618-6

21. Kwon B.E., Song J.H., Song H.H., Kang J.W., Hwang S.N., Rhee K.J., Shim A., Hong E.H., Kim Y.J., Jeon S.M., Chang S.Y., Kim D.E., Cho S., Ko H.J. Antiviral activity of oroxylin A against Coxsackievirus B3 alleviates virus-induced acute pancreatic damage in mice. PLoS One, 2016, vol. 11, no. 5: e0155784. doi: 10.1371/journal.pone.0155784

22. Lee K., Kim D.E., Jang K.S., Kim S.J., Cho S., Kim C. Gemcitabine, a broad-spectrum antiviral drug, suppresses enterovirus infections through innate immunity induced by the inhibition of pyrimidine biosynthesis and nucleotide depletion. Oncotarget, 2017, vol. 8, no. 70, pp. 115315—115325. doi: 10.18632/oncotarget.23258

23. Lim B.K., Ju E.S., Lee Y.J., Jang S.A., Youn T.J., Jeon E.-S. RNA helicase (2C) inhibitor prevent enteroviral-mediated cardiomyopathy. Eur. Heart J., 2013, vol. 34, pp. 3502. doi: 10.1093/eurheartj/eht309.3502

24. Lim B.K., Yun S.H., Ju E.S., Kim B.K., Lee Y.J., Yoo D.K., Kim Y.C., Jeon E.S. Soluble coxsackievirus B3 3C protease inhibitor prevents cardiomyopathy in an experimental chronic myocarditis murine model. Virus. Res., 2015, vol. 199, 8 p. doi: 10.1016/j.virusres.2014.11.030

25. Liu Y., Wang C., Mueller S., Paul A.V., Wimmer E., Jiang P. Direct interaction between two viral proteins, the nonstructural protein 2C and the capsid protein VP3, is required for enterovirus morphogenesis. PLoS Pathog., 2010, vol. 6, no. 8: e1001066. doi: 10.1371/journal.ppat.1001066

26. Ma Y., Abdelnabi R., Delang L., Froeyen M., Luyten W., Neyts J., Mirabelli C. New class of early-stage enterovirus inhibitors with a novel mechanism of action. Antiviral Res., 2017, vol. 147, pp. 67—74. doi: 10.1016/j.antiviral.2017.10.004

27. Makarov V.A., Braun H., Richter M., Riabova O.B., Kirchmair J., Kazakova E.S., Seidel N., Wutzler P., Schmidtke M. Pyrazolopyrimidines: potent inhibitors targeting the capsid of Rhino- and Enteroviruses. Chem. Med. Chem., 2015, vol. 10, no. 10, pp. 1629-1634. doi: 10.1002/cmdc.201500304

28. Muckelbauer J.K., Kremer M., Minor I., Diana G., Dutko F.J., Groarke J., Pevear D.C., Rossmann M.G. The structure of coxsackievirus B3 at 3.5 A resolution. Structure, 1995, vol. 3, no. 7, pp. 653-667. doi: 10.1016/S0969-2126(01)00201-5

29. Ogram S.A., Boone C.D., McKenna R., Flanegan J.B. Amiloride inhibits the initiation of coxsackievirus and poliovirus RNA replication by inhibiting VPg uridylylation. Virology, 2014, vol. 464-465, pp. 87-97. doi: 10.1016/j.virol.2014.06.025

30. Patick A.K., Binford S.L., Brothers M.A., Jackson R.L., Ford C.E., Diem M.D., Maldonado F., Dragovich P.S., Zhou R., Prins T.J., Fuhrman S.A., Meador J.W., Zalman L.S., Matthews D.A., Worland S.T. In vitro antiviral activity of AG7088, a potent inhibitor of human rhinovirus 3C protease. Antimicrob. Agents Chemother., 1999, vol. 43, no. 10, pp. 2444-2450. doi: 10.1128/AAC.43.10.2444

31. Peischard S., Ho H.T., Theiss C., Strutz-Seebohm N., Seebohm G. A kidnapping story: how coxsackievirus B3 and its host cell interact. Cell Physiol. Biochem., 2019, vol. 53, no. 1, pp. 121-140. doi: 10.33594/000000125

32. Pevear D.C., Tull T.M., Seipel M.E., Groarke J.M. Activity of pleconaril against enteroviruses. Antimicrob. Agents Chemother., 1999, vol. 43, no. 9, pp. 2109-2115. doi: 10.1128/AAC.43.9.2109

33. Robinson S.M., Tsueng G., Sin J., Mangale V., Rahawi S., McIntyre L.L., Williams W., Kha N., Cruz C., Hancock B.M., Nguyen D.P., Sayen M.R., Hilton B.J., Doran K.S., Segall A.M., Wolkowicz R., Cornell C.T., Whitton J.L., Gottlieb R.A., Feuer R. Coxsackievirus B exits the host cell in shed microvesicles displaying autophagosomal markers. PLoS Pathog., 2014, vol. 10, no. 4: e1004045. doi: 10.1371/journal.ppat.1004045

34. Schmidtke M., Wutzler P., Zieger R., Riabova O.B., Makarov V.A. New pleconaril and [(biphenyloxy)propyl]isoxazole derivatives with substitutions in the central ring exhibit antiviral activity against pleconaril-resistant coxsackievirus B3. Antiviral Res., 2009, vol. 81, no. 1, pp. 56-63. doi: 10.1016/j.antiviral.2008.09.002

35. Shi. L., Xiong H., He J., Deng H., Li Q., Zhong Q., Hou W., Cheng L., Xiao H., Yang Z. Antiviral activity of arbidol against influenza A virus, respiratory syncytial virus, rhinovirus, coxsackievirus and adenovirus in vitro and in vivo. Arch. Virol., 2007, vol. 152, no. 8, pp. 1447-1455. doi: 10.1007/s00705-007-0974-5

36. Song J.H., Ahn J.H., Kim S.R., Cho S., Hong E.H., Kwon B.E., Kim D.E., Choi M., Choi H.J., Cha Y., Chang S.Y., Ko H.J. Manassantin B shows antiviral activity against coxsackievirus B3 infection by activation of the STING/TBK-1/IRF3 signalling pathway. Sci. Rep., 2019, vol. 9, no. 1: 9413. doi: 10.1038/s41598-019-45868-8

37. Strating J.R., van der Linden L., Albulescu L., Bigay J., Arita M., Delang L., Leyssen P., van der Schaar H.M., Lanke K.H., Thibaut H.J., Ulferts R., Drin G., Schlinck N., Wubbolts R.W., Sever N., Head S.A., Liu J.O., Beachy P.A., De Matteis M.A., Shair M.D., Olkkonen V.M., Neyts J., van Kuppeveld F.J. Itraconazole inhibits enterovirus replication by targeting the oxysterol-binding protein. Cell Rep., 2015, vol. 10, no. 4, pp. 600-615. doi: 10.1016/j.celrep.2014.12.054

38. Thibaut H.J., van der Linden L., Jiang P., Thys B., Canela M.D., Aguado L., Rombaut B., Wimmer E., Paul A., Perez-Perez M.J., van Kuppeveld F., Neyts J. Binding of glutathione to enterovirus capsids is essential for virion morphogenesis. PLoS Pathog., 2014, vol. 10, no. 4: e1004039. doi: 10.1371/journal.ppat.1004039

39. Ulferts R., de Boer S.M., van der Linden L., Bauer L., Lyoo H.R., Mate M.J., Lichiere J., Canard B., Lelieveld D., Omta W., Egan D., Coutard B., van Kuppeveld F.J. Screening of a library of FDA-approved drugs identifies several enterovirus replication inhibitors that target viral protein 2C. Antimicrob. Agents Chemother., 2016, vol. 60, no. 5, pp. 2627-2638. doi: 10.1128/AAC.02182-15

40. Ulferts R., van der Linden L., Thibaut H.J., Lanke K.H., Leyssen P., Coutard B., De Palma A.M., Canard B., Neyts J., van Kuppeveld F.J. Selective serotonin reuptake inhibitor fluoxetine inhibits replication of Human enteroviruses B and D by targeting viral protein 2C. Antimicrob. Agents Chemother., 2013, vol. 57, no. 4, pp. 1952-1956. doi: 10.1128/AAC.02084-12

41. Van der Linden L., Vives-Adrian L., Selisko B., Ferrer-Orta C., Liu X., Lanke K., Ulferts R., De Palma A.M., Tanchis F., Goris N., Lefebvre D., De Clercq K., Leyssen P., Lacroix C., Purstinger G., Coutard B., Canard B., Boehr D.D., Arnold J.J., Cameron C.E., Verdaguer N., Neyts J., van Kuppeveld F.J. The RNA template channel of the RNA-dependent RNA polymerase as a target for development of antiviral therapy of multiple genera within a virus family. PLoS Pathog., 2015, vol. 11, no. 3: e1004733. doi: 10.1371/journal.ppat.1004733

42. Van der Schaar H.M., Leyssen P., Thibaut H.J., de Palma A., van der Linden L., Lanke K.H., Lacroix C., Verbeken E., Conrath K., Macleod A.M., Mitchell D.R., Palmer N.J., van de Poёl H., Andrews M., Neyts J., van Kuppeveld F.J. A novel, broad-spectrum inhibitor of enterovirus replication that targets host cell factor phosphatidylinositol 4-kinase Шв. Antimicrob. Agents Chemother., 2013, vol. 57, no. 10, pp. 4971-4981. doi: 10.1128/AAC.01175-13

43. Xia H., Wang P., Wang G.C., Yang J., Sun X., Wu W., Qiu Y., Shu T., Zhao X., Yin L., Qin C.F., Hu Y., Zhou X. Human enterovirus nonstructural protein 2C ATPase functions as both an RNA helicase and ATP-independent RNA chaperone. PLoS Pathog., 2015, vol. 11, no. 7: e1005067. doi: 10.1371/journal.ppat.1005067

44. Yun S.H., Lee W.G., Kim Y.C., Ju E.S., Lim B.K., Choi J.O., Kim D.K., Jeon E.S. Antiviral activity of coxsackievirus B3 3C protease inhibitor in experimental murine myocarditis. J. Infect. Dis., 2012, vol. 205, no. 3, pp. 491—497. doi: 10.1093/infdis/jir745

45. Zautner A.E., Jahn B., Hammerschmidt E., Wutzler P., Schmidtke M. N- and 6-O-sulfated heparan sulfates mediate internalization of coxsackievirus B3 variant PD into CHO-K1 cells. J. Virol., 2006, vol. 80, no. 13,pp. 6629— 6636. doi: 10.1128/JVI.01988-05

46. Zhang Y., Cao W., Xie Y.H., Yang Q., Li X.Q., Liu X.X., Wang S.W. The comparison of a-bromo-4-chlorocinnamaldehyde and cinnamaldehyde on coxsackie virus B3-induced myocarditis and their mechanisms. Int. Immunopharmacol., 2012, vol. 14, no. 1, pp. 107-113. doi: 10.1016/j.intimp.2012.06.007

Энтеровирусная инфекция у детей

Энтеровирусные инфекции – это группа заболеваний, в основе причин которых лежит несколько разновидностей вирусов. Вызывают заболевание вирусы Коксаки, полиовирусы и ЕСНО (экхо).

После перенесенной энтеровирусной инфекции образуется стойкий пожизненный иммунитет, однако, он сероспецифичен. Это значит, что иммунитет образуется только к тому серологическому типу вируса, которым переболел ребенок и не защищает его от других разновидностей этих вирусов. Поэтому энтеровирусной инфекцией ребенок может болеть несколько раз за свою жизнь. Так же эта особенность не позволяет разработать вакцину, чтобы защитить наших детей от данного заболевания. Заболевание имеет сезонность: вспышки заболевания чаще всего наблюдаются в летне-осенний период.

Причины заражения энтеровирусной инфекцией.

Заражение происходит несколькими путями. Вирусы в окружающую среду могут попадать от больного ребенка или от ребенка, который является вирусоносителем. У вирусоносителей нет никаких проявлений заболеваний, однако вирусы находятся в кишечнике и выделяются в окружающую среду с калом. Такое состояние может наблюдаться у переболевших детей после клинического выздоровления либо у детей, у которых вирус попал в организм, но не смог вызвать заболевание из-за сильного иммунитета ребенка. Вирусоносительство может сохраняться на протяжении 5 месяцев.

Попав в окружающую среду, вирусы могут сохраняться довольно долго, так как хорошо переносят неблагоприятное воздействие. Хорошо сохраняются вирусы в воде и почве, при замораживании могут выживать на протяжении нескольких лет, устойчивы к действию дезинфицирующих средств (при воздействии растворов высокой концентрации фенола, хлора, формалина вирусы начинают погибать только через три часа), однако восприимчивы к действию высоких температур (при нагревании до 45ºС погибают через 45-60 секунд).

Как передается энтеровирусная инфекция.

Механизм передачи может быть воздушно-капельный (при чихании и кашле с капельками слюны от больного ребенка к здоровому) и фекально-оральный при не соблюдении правил личной гигиены. Чаще всего заражение происходит через воду, при употреблении сырой (не кипяченой) воды. Так же возможно заражение детей через игрушки, если дети их берут в рот. Болеют чаще всего дети в возрасте от 3 до 10 лет. У детей, находящихся на грудном вскармливании, в организме присутствует иммунитет, полученный от матери через грудное молоко, однако, этот иммунитет не стойкий и после прекращения грудного вскармливания быстро исчезает.

Симптомы энтеровирусной инфекции.

В организм вирусы попадают через рот или верхние дыхательные пути. Попав в организм ребенка, вирусы мигрируют в лимфатические узлы, где они оседают и начинают размножаться. Дальнейшее развитие заболевания связано со многими факторами, такими как вирулентность (способность вируса противостоять защитным свойствам организма), тропизмом (склонностью поражать отдельные ткани и органы) вируса и состоянием иммунитета ребенка.

У энтеровирусных инфекций есть как схожие проявления, так и различные, в зависимости от вида и серотипа. Инкубационный период (период от попадания вируса в организм ребенка, до появления первых клинических признаков) у всех энтеровирусных инфекций одинаковый – от 1 до 10 дней (чаще 2-5 дней).

Заболевание начинается остро — с повышения температуры тела до 38-39º С. Температура чаще всего держится 3-5 дней, после чего снижается до нормальных цифр. Очень часто температура имеет волнообразное течение: 2-3 дня держится температура, после чего снижается и 2-3 дня находится на нормальных цифрах, затем снова поднимается на 1-2 дня и вновь нормализуется уже окончательно. При повышении температуры ребенок ощущает слабость, сонливость, может наблюдаться головная боль, тошнота, рвота. При снижении температуры тела все эти симптомы проходят, однако при повторном повышении могут вернуться. Также увеличиваются шейные и подчелюстные лимфоузлы, так как в них происходит размножение вирусов.

В зависимости от того, какие органы больше всего поражаются, выделяют несколько форм энтеровирусной инфекции. Энтеровирусы могут поражать: центральную и периферическую нервные системы, слизистую ротоглотки, слизистую глаз, кожу, мышцы, сердце, слизистую кишечника, печень, у мальчиков возможно поражение яичек.

При поражении слизистой ротоглотки происходит развитиеэнтеровирусной ангины. Она проявляется повышением температуры тела, общей интоксикацией (слабость, головная боль, сонливость) и наличием везикулярной сыпи в виде пузырьков, заполненных жидкостью, на слизистой ротоглотки и миндалинах. Пузырьки эти лопаются, на их месте образуются язвочки, заполненные белым налетом. После выздоровления на месте язвочек не остается никаких следов.

При поражении глаз развивается конъюнктивит. Он может быть одно- и двусторонним. Проявляется в виде светобоязни, слезотечения, покраснения и припухлости глаз. Возможно наличие кровоизлияний в конъюнктиву глаза.

При поражении мышц развивается миозит – боли в мышцах. Боли появляются на фоне повышения температуры. Болезненность наблюдается в грудной клетке, руках и ногах. Появление болей в мышцах, как и температуры, может носить волнообразный характер. При снижении температуры тела боли уменьшаются или исчезают совсем.

При поражении слизистой кишечника (энтерит) наблюдается наличие жидкого стула. Стул обычной окраски (желтый или коричневый), жидкий, без патологических (слизь, кровь) примесей. Появление жидкого стула может быть как на фоне повышение температуры, так, и изолировано (без повышения температуры тела).

Энтеровирусные инфекции могут поражать различные участки сердца. Так при поражении мышечного слоя развивается миокардит, при поражении внутреннего слоя с захватом клапанов сердца, развивается эндокардит, при поражении внешней оболочки сердца –перикардит. У ребенка может наблюдаться: повышенная утомляемость, слабость, учащенное сердцебиение, падение артериального давления, нарушения ритма (блокады, экстрасистолы), боли за грудиной.

При поражении нервной системы могут развиваться энцефалиты, менингиты. У ребенка наблюдается: сильная головная боль, тошнота, рвота, повышение температуры тела, судороги, парезы и параличи, потеря сознания.

При поражении печени развивается острый гепатит. Он характеризуется увеличением печени, чувством тяжести в правом подреберье, болью в этом месте. Возможно появление тошноты, изжоги, слабости, повышения температуры тела.

При поражении кожи возможно появление экзантемы– гиперемия (красное окрашивание) кожи, чаще всего на верхней половине туловища (голова, грудь, руки), не приподнимается над уровнем кожи, появляется одномоментно.

У мальчиков возможно наличие воспаления в яичках с развитием орхита. Чаще всего такое состояние развивается через 2-3 недели после начала заболевания с другими проявлениями (ангина, жидкий стул и другие). Заболевание довольно быстро проходит и не несет никаких последствий, однако, в редких случаях возможно развитие в половозрелом возрасте аспермии (отсутствие спермы).

Также существуют врожденные формы энтеровирусной инфекции, когда вирусы попадают в организм ребенка через плаценту от матери. Обычно такое состояние имеет доброкачественное течение и излечивается самостоятельно, однако в некоторых случаях энтеровирусная инфекция может вызвать прерывание беременности (выкидыш) и развитие у ребенка синдрома внезапной смерти (смерть ребенка наступает на фоне полного здоровья).

Очень редко возможно поражение почек, поджелудочной железы, легких. Поражение различных органов и систем может наблюдаться как изолированное, так и сочетанное.

Лечение энтеровирусной инфекции.

Специфического лечения энтеровирусной инфекции не существует. Лечение проводят в домашних условиях, госпитализация показана при наличии поражения нервной системы, сердца, высокой температуры, которая долго не поддается снижению при использовании жаропонижающих средств. Ребенку показан постельный режим на весь период повышения температуры тела.

Питание должно быть легким, богатым белками. Необходимо достаточное количество жидкости: кипяченая вода, минеральная вода без газов, компоты, соки, морсы.

Лечение проводят симптоматически в зависимости от проявлений инфекции — ангина, конъюнктивит, миозит, жидкий стул, поражения сердца, энцефалиты, менингиты, гепатит, экзантема, орхит. В некоторых случаях (ангина, понос, конъюнктивит…) проводят профилактику бактериальных осложнений.

Дети изолируются на весь период заболевания. В детском коллективе могут находиться после исчезновения всех симптомов заболевания.

Профилактика энтеровирусной инфекции.

Для профилактики необходимо соблюдение правил личной гигиены: мыть руки после посещения туалета, прогулки на улице, пить только кипяченую воду или воду из заводской бутылки, недопустимо использование для питья ребенка воды из открытого источника (река, озеро).

Специфической вакцины против энтеровирусной инфекции не существует, так как в окружающей среде присутствует большое количество серотипов этих вирусов.

Роспотребнадзор объяснил, как не заразиться вирусом Коксаки — Общество

Санитарно-карантинный контроль за рейсами, прибывающими из Турции, усилен в некоторых российских аэропортах. Это произошло, в частности, в аэропорту Пулково и в Екатеринбурге, сообщили ТАСС представители региональных управлений службы. Чем опасен вирус Коксаки, который и стал причиной принятых мер, — в материале ТАСС.

Коксаки — опасный для человека РНК-содержащий энтеровирус. В зависимости от своей разновидности (их существует несколько десятков), может вызывать различные клинические проявления: от легкого повышения температуры до серозного вирусного менингита. Существуют бессимптомные формы заболевания. Часто вызывает энтеровирусный везикулярный стоматит (также называется синдромом рука — нога — рот, англ. Hand, foot and mouth disease, HFMD).

Описание, лечение

Вирус Коксаки (Coxsackievirus), как и другие энтеровирусы, хорошо размножается в желудочно-кишечном тракте. Распространяется различными путями: воздушно- капельным, пищевым, контактным, водным.

Долгое время вирус сохраняется на предметах обихода, продуктах питания (в том числе фруктах), а также в бассейнах и т. д. Быстро погибает при кипячении зараженной воды или одежды. Источником заболевания являются больные и вирусоносители.

Наиболее уязвимы к вирусу дети в возрасте до 14 лет. Инкубационный период — до шести дней. Заболевание, как правило, начинается с резкого подъема температуры тела до 39-40 градусов, наблюдается головная боль, рвота, воспаление слизистых оболочек.

Лечение, при отсутствии осложнений, подразумевает постельный режим, прием симптоматических препаратов (в том числе противовоспалительных при сильной температуре), обильное питье. При начале энцефалита, HFMD (проявляется сыпью на руках и ногах и герпетической ангиной) и других осложнений, требуются госпитализация.

При отсутствии осложнений симптомы болезни полностью проходят за одну-две недели.

История вируса

Вирус был открыт и описан в конце 1940-х гг. в США врачами Джилбертом Дэллфордом и Грейс Сиклз, которые занимались поиском вакцины от полиомиелита. Получил название в честь небольшого городка Коксаки в штате Нью- Йорк, расположенного на реке Гудзон, — в нем впервые были обнаружены образцы вируса.

Менингит и энтеровирусный везикулярный стоматит могут быть вызваны не только вирусом Коксаки. Поэтому точной статистики о смертности из-за этого вируса не существует. Наиболее крупные вспышки HFMD, которые произошли в том числе из-за вируса Коксаки, в последние годы регистрировались в Малайзии (1997, 34 погибших; 2006, 7 погибших), Китае (2008, 42 погибших; 2009, 18 погибших; 2012, 8 погибших) и Вьетнаме (2008, 11 погибших).

Материал подготовлен по данным ТАСС-Досье 

 

 

Информация по энтеровирусной инфекции. | Городская детская поликника №6

Энтеровирусные инфекции у детей — острые инфекционные заболевания, возбудителями которых служат кишечные вирусы (энтеровирусы) из семейства пикорнавирусов. Клинические проявления энтеровирусной инфекции у детей полиморфны; заболевание может протекать в следующих формах: катаральной, гастроэнтеритической, энтеровирусной лихорадки, энтеровирусной экзантемы, герпангины, серозного менингита, миокардита, энцефаломиокардита новорожденных, конъюнктивита, увеита и др. Для обнаружения вирусов в биологических жидкостях используются методы ПЦР, ИФА, РПГА. Этиопатогенетическое лечение энтеровирусной инфекции у детей проводится интерферонами, иммуноглобулинами и другими препаратами.

• Причины энтеровирусной инфекции у детей
• Классификация энтеровирусной инфекции у детей
• Симптомы энтеровирусной инфекции у детей
• Диагностика энтеровирусной инфекции у детей
• Лечение энтеровирусной инфекции у детей
• Прогноз и профилактика энтеровирусной инфекции у детей
• Цены на лечение

Энтеровирусная инфекция у детей

Энтеровирусные инфекции у детей – обширная группа заболеваний, вызываемых РНК-содержащими неполиомиелитными вирусами (Коксаки, ECHO, неклассифицированными энтеровирусами человека) и полиовирусом. В силу специфичности вызываемых поражений, полиомиелит стоит несколько обособленно в ряду энтеровирусных инфекций у детей, поэтому рассматривается нами отдельно. В рамках данного обзора остановимся на энтеровирусных инфекциях неполиомиелитной этиологии, распространенных среди детей.
Наряду с ОРВИ, энтеровирусные инфекции встречаются в педиатрии довольно часто. Ежегодно среди общего количества больных энтеровирусной инфекцией удельный вес детей составляет 80-90%; из них половина случаев заболевания приходится на детей младшего возраста. Учитывая полиморфизм клинических проявлений, энтеровирусные инфекции у детей представляют интерес не только для специалистов в области инфекционных болезней, но иневрологии, гастроэнтерологии, кардиологии, офтальмологии, отоларингологии.

Причины энтеровирусной инфекции у детей

Возбудителями энтеровирусных инфекций неполиомиелитной этиологии у детей выступают вирусы Коксаки А (24 серотипа), Коксаки В (6 серотипов), ECHO (34 серотипа) и неклассифицированные энтеровирусы человека 68-71 серотпипов. Всех неполиомиелитных энтеровирусов объединяет устойчивость к низким температурам (замораживанию, оттаиванию) и быстрая инактивация в условиях высокой температуры (при кипячении) или воздействии хлорсодержащих растворов, йода, формалина, перекиси водорода, УФО.
Источниками энтеровирусной инфекции могут служить дети и взрослые, являющиеся вирусоносителями или больными манифестной формой заболевания. Передача инфекции от человека к человеку осуществляется воздушно-капельным или фекально-оральным путями; реже отмечается трансплацентарная передача. Сезонные подъемы заболеваемости энтеровирусными инфекциями среди детей отмечаются в конце лета – начале осени. Наибольшая заболеваемость регистрируется среди детей в возрасте от 3 до 10 лет. Взрослые и дети старшего возраста заболевают реже, что объясняется наличием у них иммунитета, сформировавшегося вследствие бессимптомной инфекции. Наряду со спорадическими случаями и эпидемическими вспышками энтеровирусной инфекции в детских коллективах, встречаются крупные эпидемии, поражающие целые регионы.
Проникновение энтеровирусов в организм происходит через слизистые оболочки пищеварительного и респираторного тракта. Репликация вирусов происходит в лимфоидной ткани, эпителии ротоглотки и ЖКТ, поэтому ранними клиническими проявлениями энтеровирусной инфекции у ребенка могут быть герпетическая ангина, фарингит, диарея и пр. Дальнейшее распространение вирусов по организму происходит гематогенным путем. Обладая органотропностью, энтеровирусы могут поражать нервную ткань, мышцы, покровные ткани, сосуды глаз и т. д. После перенесенной энтеровирусной инфекции у детей формируется типоспецифический иммунитет к тому серологическому типу вируса, которым было вызвано заболевание.

Классификация энтеровирусной инфекции у детей

В зависимости ведущего клинического синдрома, различают типичные и атипичные энтеровирусные инфекции у детей. Типичные формы могут проявляться в виде изолированных или комбинированных поражений: герпетической ангины, катара верхних дыхательных путей,гастроэнтерита, эпидемической миалгии, энтеровирусной лихорадки, энтеровирусной экзантемы, гепатита. Поражение нервной системы при энтеровирусной инфекции у детей может протекать по типу энцефалита, серозного менингита, энцефаломиокардита новорожденных, параличей; поражение сердца – в виде миокардита и перикардита; поражение глаз – в виде геморрагического конъюнктивита и увеита; поражение мочеполовой системы – в форме геморрагического цистита, орхита, эпидидимита. К атипичным формам энтеровирусной инфекции у детей относятся случаи стертого и бессимптомного течения.
С учетом выраженности клинических признаков энтеровирусная инфекция у детей может иметь легкое, среднетяжелое и тяжелое течение. Критериями степени тяжести выступают выраженность местных изменений и интоксикационного синдрома. По характеру течения энтеровирусные инфекции у детей подразделяются на неосложненные и осложненные.

Симптомы энтеровирусной инфекции у детей

Несмотря на полиморфизм клинических проявлений, течению различных энтеровирусных инфекций у детей свойственны некоторые общие черты. Длительность инкубационного периода составляет от 2 до 10 дней (в среднем 2-4 дня). Манифестация заболевания происходит остро, с высокой лихорадки (39-40 °С), озноба, головной боли, слабости, нарушения сна, отсутствия аппетита, повторной рвоты.
При любой форме энтеровирусной инфекции у детей отмечается гиперемия кожи лица, шеи и верхней половины туловища, инъекция сосудов конъюнктивы и склеры. Возможно появление полиморфной пятнисто-папулезной сыпи, гиперемии слизистой миндалин дужек и задней стенки глотки, шейного лимфаденита. Считается, что внутриутробное инфицирование энетровирусами может послужить причиной синдрома внезапной детской смерти. Также доказана связь между энтеровирусной инфекцией у детей и развитием сахарного диабета 1 типа.
Кроме общей симптоматики, в клинике различных форм энтеровирусной инфекции у детей присутствуют свои специфические проявления.
Энтеровирусная лихорадка у детей (малая болезнь, летний грипп, трехдневная лихорадка) вызывается разными серотипами вирусов Коксаки и ECHO. Для инфекции характерна острая манифестация с лихорадки, миалгии, умеренных катаральных явлений. У ребенка выражены общие признаки энтеровирусной инфекции: инъекция сосудов склер, гиперемия лица, увеличение лимфоузлов и др.; может отмечаться увеличение печени и селезенки. Данная форма энтеровирусной инфекции у детей протекает легко, обычно не более 2-4 дней. В редких случаях энтеровирусная лихорадка продолжается 1-1,5 недели или имеет волнообразное течение.
Кишечная (гастроэнтеритическая) форма энтеровирусной инфекции чаще встречается у детей до 3-х лет. Заболевание протекает с незначительными катаральными явлениями (ринитом, заложенностью носа, гиперемией слизистых ротоглотки, кашлем) и диспепсическим синдромом (диареей, рвотой, метеоризмом). Тяжелая интоксикация, дегидратация и явленияколита не свойственны. Продолжительность кишечной формы энтеровирусной инфекции у детей составляет 1-2 недели.
Катаральная (респираторная) форма энтеровирусной инфекции у детей протекает по типу ОРЗ. Отмечается кратковременная лихорадка, ринофарингит, ларингит. Возможно развитие синдрома ложного крупа.
Энтеровирусная экзантема, ассоциированная с ECHO и Коксаки-вирусами, характеризуется появлением на высоте лихорадки кожной сыпи. По характеру сыпь может напоминать таковую при скарлатине, кори или краснухе; элементы располагаются преимущественно на коже лица и туловища. Реже встречаются пузырьковые высыпания в полости рта, напоминающие герпес(пузырчатка полости рта). Течение энтеровирусной инфекции у детей благоприятное; сыпь и лихорадка исчезают в течение 1-2 дней.
Эпидемическая миалгия (болезнь Борнхольма, плевродиния) – энтеровирусная инфекция у детей, вызываемая Коксаки и ECHO-вирусами. Ведущим проявлением заболевания служат интенсивные мышечные боли, сопровождающие высокую лихорадку. Чаще дети жалуются на боли в грудной клетке и верхней половине живота, реже – в спине и конечностях. При движении боли усиливаются, вызывая побледнение кожных покровов, обильное потоотделение, тахипноэ. Эпидемическая миалгия требует проведения дифференциальной диагностики с плевритом,острым аппендицитом или перитонитом. Вне болевого приступа дети чувствуют себя значительно лучше. Данная форма энтеровирусной инфекции у детей нередко протекает совместно с герпангиной и серозным менингитом.
Серозный менингит является типичной формой энтеровирусной инфекции у детей. Клиническая картина характеризуется высокой температурой тела, сильной головной болью, повторной рвотой, беспокойством и возбуждением ребенка, бредом и судорогами. Со стороны респираторного тракта отмечаются явления фарингита. С первых дней выражены менингеальные симптомы: положительные симптомы Брудзинского и Кернига, ригидность мышц затылка. Обычно через 3-5 дней симптоматика регрессирует, однако постинфекционная астенияи остаточные явления могут сохраняться в течение 2-3 месяцев.
Полиомиелитоподобная (паралитическая) форма энтеровирусной инфекции у детей является одной из наиболее тяжелых. Как и при полиомиелите, повреждение передних рогов спинного мозга может приводить к развитию вялых параличей и парезов нижних конечностей. В легких случаях прихрамывающая походка, слабость в ногах, снижение мышечного тонуса являются обратимыми и постепенно исчезают через 4-8 недель. При тяжелых формах энтеровирусной инфекции у детей возможен летальный исход вследствие нарушением функции дыхательного и сосудодвигательного центров.
Энцефаломиокардит новорожденных вызывается вирусами Коксаки типа В и характерен длянедоношенных и детей первых месяцев жизни. На фоне общей симптоматики (вялости, отказа от груди, субфебрилитета) нарастают явления сердечной недостаточности (тахикардия, одышка, цианоз, аритмия, расширение границ сердца и печени). При энцефалите развивается выбухание родничков и судороги. Летальность при данной форме энтеровирусной инфекции среди детей достигает 60-80%.
Геморрагический конъюнктивит вызывается энтеровирусом типа 70. Проявляется светобоязнью, слезотечением, ощущением инородного тела в глазах. Объективно определяются отек и гиперемия конъюнктивы, точечные кровоизлияния. При присоединении вторичной инфекции может развиваться бактериальный конъюнктивит, кератит. Обычно все симптомы энтеровирусной инфекции у детей стихают через 10-14 дней.
Энтеровирусный увеит преимущественно поражает детей 1-го года жизни. Данная форма энтеровирусной инфекции протекает с лихорадкой, интоксикацией, кишечным и респираторным синдромом. Поражение сосудистой оболочки глаза носит стойкий характер и может привести к дистрофии радужки, помутнению роговицы, развитию увеальной катаракты и глаукомы, субатрофии глазного яблока.
Особенности течения герпетической ангины проанализированы в соответствующем обзоре.

Диагностика энтеровирусной инфекции у детей

Энтеровирусные инфекции у детей диагностируются на основании типичного симптомокомплекса с учетом сезонности и эпидемиологических данных. Обязательным для установления диагноза является лабораторное подтверждение энтеровирусной инфекции у детей: обнаружение РНК энтеровируса методом ПЦР, определение титра специфических антител с помощью ИФА, РСК или РПГА и др.
Лабораторная верификация возбудителей может проводиться в различных биологических жидкостях: в крови, отделяемом конъюнктивы, смыве из носоглотки, соскобах с кожных высыпаний, образцах фекалий, спинномозговой жидкости (при наличии показаний длялюмбальной пункции), биоптатах органов и др.
В зависимости от ведущего клинического синдрома дети могут нуждаться в консультации педиатра, детского кардиолога, детского невролога, детского отоларинголога, детского офтальмолога и др. специалистов.
Различные формы энтеровирусной инфекции у детей требуют проведения дифференциальной диагностики с полиомиелитом, корью, краснухой, скарлатиной, эпидемическим паротитом, ОРВИ, ОКИ.
Лечение энтеровирусной инфекции у детей
Лечение легких изолированных форм энтеровирусной инфекции у детей проводится амбулаторно; госпитализация требуется при серозном менингите, энцефалите, миокардите, тяжелых комбинированных поражениях. В лихорадочном периоде показаны покой, постельный режим, достаточный питьевой режим.
Этиопатогенетическая терапия энтеровирусной инфекции у детей включает применение рекомбинантных интерферонов (альфа интерферона), интерфероногенов ( оксодигидроакридинилацетата, меглюмина акридонацетата), полиспецифических иммуноглобулинов (при тяжелом течении).
При миокардите, менингите и др. формах показано назначение глюкокортикостероидов. Одновременно проводится симптоматическое лечение (прием жаропонижающих, дезинтоксикационная терапия, орошение полости носа, полоскание зева и др.).

Прогноз и профилактика энтеровирусной инфекции у детей

В большинстве случаев энтеровирусная инфекция у детей заканчивается реконвалесценцией. Наиболее серьезными в отношении прогноза являются энтеровирусные энцефалиты, энцефаломиокардиты новорожденных, менингиты, генерализованная инфекция, присоединение бактериальных осложнений.
Дети, заболевшие энтеровирусной инфекцией, подлежат изоляции; на контактных лиц накладывается карантин на 2 недели. В эпидемиологическом очаге проводятся дезинфекционные мероприятия. Ввиду большого разнообразия энтеровирусов специфическая вакцина против инфекции не разработана. Неспецифическая профилактика включаетэндоназальную инстилляцию лейкоцитарного интерферона детям и взрослым, контактировавшим с больным энтеровирусной инфекцией.
Источник: http://www.krasotaimedicina.ru/diseases/children/enterovirus-infection

Скачать данную статью.

Симптомы и лечение инфекции, вызванной вирусом Коксаки

Вирус Коксаки относится к семейству энтеровирусов (кишечные вирусы). Он представляет собой РНК-содержащий вирус. Впервые он был выделен в США в 1950 году из фекалий детей, которые болели инфекцией с клиническими симптомами, напоминающими паралитическую форму полиомиелита. На сегодняшний вирус Коксаки разделяется на 2 группы – вирус А и В, каждая из которых содержит серогруппы, отличающиеся по антигенным свойствам.  Размеры вирусной частицы варьируют от 18 до 30 нм. В окружающей среде они достаточно устойчивы, в фекалиях и водопроводной воде могут сохраняться длительное время (около 780 дней), но они являются чувствительными к действию солнечных лучей и растворов дезинфицирующих веществ (хлорная известь, хлорамин), которые уничтожают их практически мгновенно. При кипячении погибают в течение 20 минут.

Эпидемиология инфекции

Источником вируса является больной или носитель (более опасен в эпидемическом отношении) вируса. Основным механизмом передачи вируса Коксаки является воздушно-капельное или алиментарное (с пищей) инфицирование. Этот механизм передачи инфекции реализуется через общую посуду (особенно в садиках), загрязненную воду, немытые руки, овощи или фрукты. Крайне редко встречается трансплацентарный путь передачи от матери плоду. Восприимчивыми к инфекции являются дети в возрасте от 3 до 10 лет (инфицирование происходит чаще всего в 4-6 лет). Эта инфекция распространена в странах с умеренным климатом, где заболеваемость выше летом и осенью. После перенесенной инфекции устойчивый иммунитет не формируется.

Дети в возрасте до 6 месяцев практически невосприимчивы к вирусу Коксаки. Это связано с тем, что в их крови циркулируют материнские антитела, переданные во время внутриутробного развития через плаценту. Длительность активности материнских антител в среднем полгода, что объясняет невосприимчивость ребенка к большинству инфекций в течение этого времени. Также частично антитела передаются ребенку с грудным молоком. После перенесенной инфекции у ребенка достаточный иммунитет не формируется. Это означает, что при последующем попадании вируса в организм — ребенок может заболеть повторно, но сама патология будет протекать легче.

Механизм развития инфекции

Входными воротами (место проникновения в организм) для вируса Коксаки являются слизистые глотки и тонкого кишечника. Вирус является только внутриклеточным паразитом. После попадания в организм, в механизме развития инфекции можно выделить несколько этапов:

• Первичная репликация (размножение) и накопление вирусных частиц в клетках слизистых оболочек глотки, полости носа, тонкого кишечника и в лимфоидной ткани этих органов.
• Вирусемия – после накопления определенного порогового объема вируса он выходит в системный кровоток, где некоторое время циркулирует.
• Диссеминация (распространение) вируса в организме – вирусные частицы оседают в различных органах, проникают в их клетки, где приводят к развитию воспалительного процесса. Разные серологические типы вируса Коксаки обладают различной тропностью к тканям. Наибольшее количество вируса паразитирует и реплицируется в нервных клетках (нейроциты), поперечнополосатых мышцах, коже и внутренних органах (печень, почки).
• Активизация иммунной системы, которая посредством Т-лимфоцитов (клетки иммунной системы) уничтожает вирус и зараженные им клетки.

В зависимости от особенностей серологического типа вируса и индивидуальных особенностей организма ребенка, инфекционный процесс заканчивается полным выздоровлением с уничтожением всех вирусных частиц иммунной системой, переходом в хронический процесс с длительным сохранением вируса во внутренних органах и нейроцитах или вирусоносительством.

Проявления вируса Коксаки

Время от заражения до развития первых симптомов составляет от 2 до 10 дней. Начало заболевания обычно острое, с подъемом температуры тела до 39° С, резким ухудшением общего самочувствия, болью в мышцах и головной болью. Обычно такая симптоматика соответствует вирусемии – массовый выход вирусных частиц в системный кровоток. Общая интоксикация в детском возрасте характеризует практически все инфекционные заболевания. Симптомы, указывающие на вирус Коксаки, развиваются уже через день от начала заболевания, они включают:

• Появление маленьких болезненных пузырьков и язвочек (до 2 мм в диаметре) на слизистой оболочке рта, в большей степени на внутренней поверхности щек. Также возможно заболевание горла с появлением пузырьков на миндалинах.
• Формирование небольших везикул (пузырьки с жидкостью) на ладонях, подошвенных поверхностях стоп, между пальцами. Такие элементы сыпи напоминают ветрянку. Затем они в небольшом количестве могут появляться на коже рук (предплечья) и ягодиц.
• Зуд на коже при инфекции вирусом Коксаки отсутствует.
• Температура сохраняется несколько дней, затем нормализуется (при условии классического течения инфекции).
• Диспепсический синдром – развитие поноса, рвоты. Понос может быть до 5-10 раз в день, стул при этом жидкий, водянистый без патологических примесей (кровь, слизь или гной).

Такие симптомы развиваются в большинстве случаев течения инфекции.

 

В связи с развитием сыпи на руках, ногах и во рту ребенка, инфекцию, вызванную вирусом Коксаки, еще называют «руки-ноги-рот» инфекцией.

В зависимости от преобладания какого-либо симптома, выделяют несколько клинических форм этого заболевания:

• Герпангина – преимущественное развитие сыпи на слизистой полости рта и миндалинах.
• Эпидемическая миалгия  — ведущим симптомом является развитие боли во всех группах мышц.
• Патология нервной системы – поражение оболочек головного мозга (серозный менингит). Более тяжелая форма инфекции с развитием выраженной головной боли, тяжелой интоксикацией. Некоторые серотипы вируса Коксаки могут привести к развитию временных параличей мышц ног (напоминают полиомиелит).
• Энтеровирусная лихорадка – характеризуется отсутствием специфических симптомов, отмечается только подъем температуры тела и плохое общее самочувствие ребенка.
• Энтеровирусная экзантема – основным проявлением инфекции является появление сыпи на коже.

Наличие тех или иных симптомов инфекции зависит от типа вируса и индивидуальных особенностей ребенка.

При повышении температуры и выраженной головной боли, необходимо обязательно проверить наличие ригидности затылочных мышц, указывающих на менингит. Для этого нужно в положении ребенка на спине, попытаться поднять его голову рукой и максимально наклонить ее вперед. В случае наличия ригидности затылочных мышц будет чувствоваться значительное сопротивление наклону головы.

Диагностика

Для точного определения инфицирования ребенка вирусом Коксаки, проводится лабораторное исследование, которое включает:

• Выявление вируса в смывах из носоглотки и в испражнениях с помощью ПЦР (полимеразная цепная реакция) – наиболее точный метод диагностики, с помощью которого определяется генотип вируса.
• Определение активности антител к вирусу в крови – проводится с помощью серологического исследования, диагностическим критерием является повышение титра (активности) антител в 4 раза и более.

На сегодняшний день при спорадических (единичных) случаях заболевания лабораторная диагностика не проводится.

Как лечить вирус у детей

Лечение детей включает общие мероприятия (постельный режим на весь период интоксикации, диета с достаточным количеством жидкости и витаминов). Также используется ряд лекарственных средств, который включает:

• В случае наличия язвочек во рту и если есть болезнь горла, лечение включает использование местных антисептиков (леденцы от боли в горле, полоскание раствором фурацилина).
• Сыпь на коже обрабатывается фукарцином или раствором бриллиантовой зелени (зеленка) для профилактики присоединения бактериальной инфекции.
• Противовоспалительные средства для снижения боли в мышцах, головной боли и температуры – для детей оптимальными препаратами являются Ибупрофен и детский парацетамол в возрастных дозировках. Разовую дозу можно давать не чаще 3-4 раз в сутки после еды.
• Обильное питье и растворы для оральной регидратации применяются в случае выраженной диареи и рвоты (Регидрон).
• Противовирусные средства используются только при тяжелом течении инфекции (Амиксин).

Заметное улучшение состояния обычно наступает уже через 2-3 дня, в случае ухудшения состояния, появления признаков менингита (ригидность затылочных мышц), необходимо немедленно обратиться к врачу.

Антибиотики для лечения вируса Коксаки не используются, так как в отношении вирусов они абсолютно неэффективны. Их может назначить только врач у маленьких детей для профилактики бактериальных осложнений.

Прогноз при инфекционном процессе, вызванном вирусом Коксаки в основном благоприятный. В редких случаях могут развиваться осложнения в виде обезвоживания (дегидратация), менингита или энцефалита (воспаление головного мозга).

Источник: Просто о медицине

симптомы, лечение и пути передачи

Насколько опасен этот вирус, его симптомы, лечение и возможные пути заражения – читайте дальше.

Симптомы вируса Коксаки

Инкубационный период этого вируса составляет от 2 до 10 дней. Первые признаки вируса Коксаки напоминают простуду или грипп: ухудшение общего самочувствия, ломота в мышцах и резкое повышение температуры до 39-40 градусов.

Читайте также: Вирус Коксаки в Украине в 2019: все, что известно о болезни

Далее на теле появляются маленькие пузырьки с жидкостью. Чаще всего их можно заметить во рту, на ладонях и ступнях ног. Также эти пузырьки могут появляться на предплечье и на половых органах. Они не чешутся, но вызывают болевые ощущения.

Из-за Коксаки на теле появляются пузырьки

Также Коксаки влияет на желудочно-кишечный тракт — у человека начинается сильная диарея (до 5-10 раз в день) и рвота.

Вирус Коксаки может дать и осложнения. Иногда он может привести к воспалению центральной нервной системы, вирусному менингиту, параличу, перикардиту (воспаление наружной оболочки сердца и околосердечной сумки), миокардиту (заболевание сердечной мышцы), а также развитию диабета I степени.

Пути заражения Коксаки

Опасность этого вируса заключается еще и в том, что вирус очень быстро распространяется. Чаще всего им заражаются дети, однако его могут подцепить и взрослые. Вирус может быть в загрязненной воде, в сточных водах, а также в человеческих экскрементах и слюне. То есть он может передаваться воздушно-капельным путем.

Лечение и профилактика

Вирус проходит в течение двух недель. Его реально вылечить и в домашних условиях. Однако, очень опасны его симптомы, в частности высокая температура и диарея, и возможные осложнения. Поэтому медики настоятельно советуют при первых симптомах обратиться к врачу.

Пока нет вакцины от вируса Коксаки, поэтому его профилактика заключается в стандартных правилах гигиены, например, тщательное мытье рук после туалета и перед едой, если вы знаете об опасности, то лучше не контактировать с загрязненной водой и инфицированными людьми.

вирус Коксаки в Таиланде При этом непосредственно вирус Коксаки

Никакой эпидемии нет, вирус Коксаки  был, есть и будет. Он встречается на Турецком побережье, в Италии, Испании, и Тайланде, и даже в России. Признаки энтеровирусной инфекции обнаруживаются у восьми человек на 10 тысяч выехавших. При этом непосредственно вирус Коксаки диагностируют лишь у 60% из них. То есть диагноз Коксаки, на 10 тысяч туристов приходится не больше 5 заболевших. Смешные цифры. Ни о какой эпидемии говорить не приходится. Тем не менее знать врага надо в лицо, поэтому мы опишем симптоматику и лечение Коксаки вируса.

Коронавирус из Китая

Вирус Коксаки – это группа из 30 активных энтеровирусов, которые размножаются в желудочно-кишечном тракте ребенка. Впервые заболевание было диагностировано в маленьком городке США Коксаки, и благодаря высокому уровню заразности быстро облетело весь земной шар.

Второе название заболевания – сидром «рука-нога-рот». Зачастую эта патология встречается у детей до 5 лет, и крайне редко у взрослых. После перенесения заболевания, вызванного вирусом Коксаки, у человека образуется стойкий иммунитет к инфекции и повторное заражение исключено.

Большая группа данных вирусных частиц разделяется на два класса: А-тип и В-тип, которые содержат в себе до 20 вирусов каждая. Различие состоит в том, какие осложнения появляются после перенесения инфекций, инициированных одним из двух типов вируса Коксаки.

Вирусы Коксаки (лат. Coxsackievirus) — несколько серотипов РНК-содержащих энтеровирусов, которые хорошо размножаются в желудочно-кишечном тракте. 29 серотипов вирусов Коксаки сейчас относят к трём видам энтеровирусов: Enterovirus A, В и С. Вирусы Коксаки являются одной из основных причин возникновения асептического менингита. После перенесенной манифестной или инаппарантной инфекции развивается стойкий типоспецифический иммунитет.

Чаще всего люди заражаются вирусами Коксаки через загрязнённые продукты, предметы быта, воду. Но инфекция передаётся и воздушно-капельным путём от вирусоносителя здоровому человеку — поэтому её вспышки бывают не только в бедных, но и во вполне благополучных странах мира.

Наиболее подвержены заражению дети в возрасте примерно до 10 лет. Взрослые болеют редко.

Самые страшные заболевания в Таиланде…

вирус Коксаки

Инкубационный период длится несколько дней. Затем у пациента наступает повышение температуры до 39-400, возможны многократная рвота, диарея, появление сыпи на руках, ногах, груди и лице. Пациент ощущает головную боль, слабость. Поражается слизистая глотки, что затрудняет приём пищи. При стандартном течении болезни её симптомы исчезают за одну—две недели. Кроме особых случаев заражения вирусом типа B (способным вызвать серьёзные осложнения), специальное лечение не требуется. Помощь больному сводится к облегчению текущего состояния: снижению температуры, предупреждению обезвоживания, снятия зуда и отека лосьонами Калмосан или Каламин, созданию приемлемых гигиенических условий; антибиотики не применяются.

Вирусы Коксаки типа A обычно инфицируют кожу и слизистые оболочки, вызывают острый геморрагический конъюнктивит, энтеровирусный везикулярный стоматит с экзантемой, заболевания верхних дыхательных путей и асептический менингит, а также заболевания горла (герпангина).

Вирусы Коксаки типа В инфицируют сердце, плевру, печень и поджелудочную железу, вызывают миокардит, перикардит и гепатит (воспаление печени, не связанное с гепатотропными вирусами). Инфекция сердца может вызывать перикардиальную эффузию.

Вирусом Коксаки инфицируется рано или поздно более 95% людей в мире, в основном это происходит еще в детском возрасте. Энтеровирусные инфекции в большинстве случаев поражают детей раннего возраста (до 5 лет). У взрослых данная инфекция выявляется достаточно редко, что связано с тем, что к взрослому возрасту человек уже перенес данный вирус и имеет к нему специфические антитела. Коксаки не поражает детей до 3-месячного возраста, кроме случаев врожденной инфекции, переданной от матери во время беременности или родов. Материнское молоко защищает малыша от Коксаки и его тяжелого течения на протяжении всего периода грудного вскармливания – все дело в материнских иммуноглобулинах. Вирусом Коксаки заразиться очень легко, инфицируется до 85-90% контактных с заразными больными. Поэтому очень часто фиксируются вспышки и эпидемии данной инфекции, особенно в дошкольных детских коллективах. В детских учреждениях могут объявить карантин. Коксаки часто проявляется синдромом «руки-ноги-рот». Синдром получил свое название из-за типичных высыпаний, которые покрывают эти части тела. Коксаки часто проявляется как «летний грипп», «кишечный вирус», «герпетическая ангина». Это связано с особенностью и многообразием его клинической картины. Как и многие вирусы, вирус Коксаки негативно влияет на иммунитет, снижая защитные силы к другим вирусам и бактериям. Вирус Коксаки особенно опасен для детей до двухлетнего возраста, беременных женщин, ВИЧ-позитивных и людей с различными иммунодефицитами. Коксаки – это не герпетическая инфекция, как многие думают, хоть эти вирусные патологии часто очень похожи по клиническим проявлениям.

Это интересно

Медицинская помощь, хирургическая помощь, консультации

Лим Б.К., Цзю-Эс, Лаосский Д.Х., Юн Ш., Ли Й.Дж., Ким Д.К. и др. Разработка системы диагностики энтеровирусов для диагностики вирусного миокардита у человека. Микробиол Иммунол . 2013 Апрель 57 (4): 281-7. [Медлайн].

Muehlenbachs A, Bhatnagar J, Zaki SR. Тканевый тропизм, патология и патогенез энтеровирусной инфекции. Дж. Патол . 2014 11 сентября [Medline].

Kadambari S, Bukasa A, Okike IO, Pebody R, Brown D, Gallimore C.Энтеровирусные инфекции в Англии и Уэльсе, 2000-2011 гг .: влияние расширенной молекулярной диагностики. Clin Microbiol Infect . 2014 г. 4 июля [Medline].

Хецуриани Н., Ламонте А., Оберсте М.С. и др. Неонатальные энтеровирусные инфекции, зарегистрированные в национальной системе эпиднадзора за энтеровирусами в Соединенных Штатах, 1983-2003 гг. Pediatr Infect Dis J . 2006 25 октября (10): 889-93. [Медлайн].

Стюарт К.Л., Чу Е.Ю., Introcaso CE, Шаффер А., Джеймс В.Д.Заболевание рук и ног, вызванное вирусом Коксаки А6. JAMA Dermatol . 2013 декабрь 149 (12): 1419-21. [Медлайн].

Кинг Р.Л., Лорч С.А., Коэн Д.М. и др. Регулярное тестирование спинномозговой жидкости с энтеровирусной полимеразной цепной реакцией сокращает количество госпитализаций и использование антибиотиков у младенцев в возрасте 90 дней и младше. Педиатрия . 2007 Сентябрь 120 (3): 489-96. [Медлайн].

Шифф GM, Шервуд младший. Клиническая активность плеконарила при экспериментально индуцированной респираторной инфекции, вызванной вирусом Коксаки А21. J Заразить Dis . 2000 Январь 181 (1): 20-6. [Медлайн].

Брунетти Л., ДеСантис ER. Лечение вирусного миокардита, вызванного вирусом Коксаки B. Am J Health Syst Pharm . 2008 15 января. 65 (2): 132-7. [Медлайн].

Юэ-Чун Л., ЛиШа Г., Цзян-Хуа Р., Пэн-Линь Ю., Цзя-Фэн Л., Цзи-Фей Т. и др. Защитные эффекты карведилола на мышиной модели с вирусным миокардитом, индуцированным вирусом Коксаки В3. J Cardiovas Pharmacol .Янв / 2008. 51: 92-98. [Медлайн].

Shi L, Xiong H, He J, et al. Противовирусная активность арбидола против вируса гриппа A, респираторно-синцитиального вируса, риновируса, вируса Коксаки и аденовируса in vitro и in vivo. Arch Virol . 2007. 152 (8): 1447-55. [Медлайн].

Ang LW, Koh BK, Chan KP, Chua LT, James L, Goh KT. Эпидемиология и борьба с болезнями рук, ящура и рта в Сингапуре, 2001-2007 гг. Ann Acad Med Singapore .2009 Февраль 38 (2): 106-12. [Медлайн].

Bergman I, Painter MJ, Wald ER, et al. Исход у детей с энтеровирусным менингитом первого года жизни. J Педиатр . 1987 май. 110 (5): 705-9. [Медлайн].

Берлин Л.Е., Рорабо М.Л., Хелдрих Ф. и др. Асептический менингит у детей младше 2 лет: диагностика и этиология. J Заразить Dis . 1993 Октябрь 168 (4): 888-92. [Медлайн].

Cheung CT, Deisher TA, Luo H, et al.Нейтрализующее лечение анти-4-1BBL улучшает сердечную функцию при вирусном миокардите. Лаборатория Инвест . 2007 Июль 87 (7): 651-61. [Медлайн].

Даган Р., Жениста Ж.А., Менегус М.А. Связь клинических проявлений, лабораторных данных и серотипов вируса с наличием менингита у госпитализированных младенцев с энтеровирусной инфекцией. J Педиатр . 1988 декабрь 113 (6): 975-8. [Медлайн].

Даган Р., Менегус Массачусетс. Комбинация четырех типов клеток для быстрого обнаружения энтеровирусов в клинических образцах. J Med Virol . 1986 июля 19 (3): 219-28. [Медлайн].

Дульбекко Р., Гинзберг Х. Вирусология . 2-е изд. 1988. 207-209.

Эпиднадзор за энтеровирусами — США, 2002-2004 гг. MMWR Morb Mortal Wkly Rep . 2006 17 февраля. 55 (6): 153-6. [Медлайн].

Джайдан Х., Хобер Д. Роль вируса Коксаки B4 в патогенезе диабета 1 типа. Метаб. Диабета . 2008, декабрь 34 (6, часть 1): 537-48.[Медлайн].

Джениста Дж. А., Пауэлл КР, Менегус Массачусетс. Эпидемиология неонатальной энтеровирусной инфекции. J Педиатр . 1984 Май. 104 (5): 685-90. [Медлайн].

Левинсон В., Явец Э. Медицинская микробиология и иммунология: экспертиза и проверка совета . 6-е изд. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: McGraw Hill Text; 2000. 238-239.

Мао Ц., Ван И, Яо Х, Бянь Л., Ву Х, Сюй М. и др. Вирус Коксаки A16: эпидемиология, диагностика и вакцина. Hum Vaccin Immunother . 2014 10 февраля (2): 360-7. [Медлайн].

Modlin JF. Вирусы Коксаки, эховирусы, новые энтеровирусы и пареховирусы. Принципы и практика инфекционных заболеваний Манделла, Дугласа и Беннета . 7-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Черчилль-Ливингстон; 2009. 2353-2365.

Мур М. Центры по контролю за заболеваниями. Энтеровирусное заболевание в США, 1970–1979 гг. J Заразить Dis .1982 Июль 146 (1): 103-8. [Медлайн].

Моренс Д.М., Палланш Массачусетс. Эпидемиология. Инфекции, вызванные энтеровирусами человека . 1995. 1:

.

Морган Н.Г., Ричардсон С.Дж. Энтеровирусы как возбудители диабета 1 типа: незавершенные дела или безнадежная причина? Trends Endocrinol Metab . 2014 28 августа. [Medline].

Палланш М.А., Андерсон Л.Дж. Вирус Коксаки, эховирус и другие энтеровирусы. Горбач С.Л., изд. Инфекционные болезни .2-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: WB Saunders Co; 1998. 2164-2170.

Piqueur MA, Verstrepen WA, Bruynseels P, Mertens AH. Улучшение анализа RT-PCR в реальном времени для обнаружения РНК энтеровируса. Вирол J . 2009 г. 7 июля, 6:95. [Медлайн]. [Полный текст].

Рантала Х., Ухари М. Возникновение детского энцефалита: популяционное исследование. Pediatr Infect Dis J . 1989 июл.8 (7): 426-30. [Медлайн].

Richer MJ, Horwitz MS.Инфекция, вызванная вирусом Коксаки, как фактор окружающей среды в этиологии диабета 1 типа. Аутоиммунная Ред. . 2009 июн.8 (7): 611-5. [Медлайн].

Рорабо М.Л., Берлин Л.Е., Хелдрих Ф. и др. Асептический менингит у детей младше 2 лет: острые заболевания и неврологические осложнения. Педиатрия . 1993 августа 92 (2): 206-11. [Медлайн].

Rotbart HA. Терапия Плеконарилом потенциально опасных для жизни энтеровирусных инфекций. 36-е ежегодное собрание Американского общества инфекционистов . 1998.

Rotbart HA. Плеконарил для лечения энтеровирусных и риновирусных инфекций. Инфекция Мед . 2000. 17: 488.

Rotbart HA. Лечение пикорнавирусных инфекций. Антивирусная защита . 2002 Февраль 53 (2): 83-98. [Медлайн].

Rotbart HA, Ahmed A, Hickey S, et al. Диагностика энтеровирусной инфекции методом полимеразной цепной реакции на нескольких типах образцов. Pediatr Infect Dis J . 1997 г., 16 (4): 409-11. [Медлайн].

Rotbart HA, McCracken GH Jr, Whitley RJ и др. Клиническое значение энтеровирусов при тяжелых летних фебрильных заболеваниях детей. Pediatr Infect Dis J . 1999, 18 октября (10): 869-74. [Медлайн].

Rotbart HA, Webster AD. Лечение потенциально опасных для жизни энтеровирусных инфекций плеконарилом. Clin Infect Dis . 2001 15 января.32 (2): 228-35. [Медлайн].

Заутер П., Хобер Д. Механизмы и результаты антителозависимого усиления вирусных инфекций и роль в патогенезе заболеваний, вызванных вирусом Коксаки B. Микробы заражают . 2009 г., 11 (4): 443-51. [Медлайн].

Сойер М.Х., Голландия Д., Эйнтаблиан Н. и др. Диагностика энтеровирусной инфекции центральной нервной системы с помощью полимеразной цепной реакции во время крупной общественной вспышки. Pediatr Infect Dis J .1994 13 марта (3): 177-82. [Медлайн].

Тебрюгге М., Кертис Н. Энтеровирусные инфекции у новорожденных. Semin Fetal Neonatal Med . 2009 14 августа (4): 222-7. [Медлайн].

Ворошилова М.К., Чумаков М.П. Полиомиелитоподобные свойства вирусов группы AB-IV Coxsackie A7. Прог Мед Вирол . 1959. 2: 106.

Веллер Т.Х., Эндерс Дж. Ф., Бэкингем М. и др. Этиология эпидемической плевродинии: исследование двух вирусов, выделенных из типичной вспышки. Дж Иммунол . 1950 Сентябрь 65 (3): 337-46. [Медлайн].

Йунг В.С., Роулинсон В.Д., Крейг М.Э. Энтеровирусная инфекция и сахарный диабет 1 типа: систематический обзор и метаанализ наблюдательных молекулярных исследований. BMJ . 3 февраля 2011. 342: 1-9. [Медлайн]. [Полный текст].

Teo FM, Chu JJ. Диагностика энтеровирусов человека, вызывающих заболевания рук, ягодиц и рта. Expert Rev Anti Infect Ther . 2016. 14 (5): 443-5.[Медлайн].

Луго Д., Крогстад ​​П. Энтеровирусы в начале 21 века: новые проявления и проблемы. Curr Opin Pediatr . 2016 28 февраля (1): 107-13. [Медлайн].

Таппени М. Вирусный менингит и энцефалит. Crit Care Nurs Clin North Am . 2013 Сентябрь 25 (3): 363-80. [Медлайн].

Борсанёва М., Кубасчикова Л., Сармирова С., Вари С. Г., Бопегамейдж С. Оценка метода взятия мазков без транспортной среды для ПЦР-диагностики инфекций, вызванных вирусом Коксаки. Дж. Вироловые методы . 2018 Апрель 254: 18-20. [Медлайн].

Эспозито С., Принципи Н. Заболевания рук, ящура: современные знания о клинических проявлениях, эпидемиологии, этиологии и профилактике. евро J Clin Microbiol Infect Dis . 2018 марта 37 (3): 391-398. [Медлайн].

Кокс Б., Левент Ф. Болезни рук, ног и рта. JAMA . 2018 декабря 18.320 (23): 2492. [Медлайн].

Garmaroudi FS, Marchant D, Hendry R, ​​Luo H, Yang D, Ye X и др.Репликация и патогенез вируса Коксаки В3. Микробиол будущего . 2015. 10 (4): 629-53. [Медлайн].

Харвала Х., Броберг Э., Беншоп К. и др. Рекомендации по диагностике и характеристике энтеровирусов в Европе и за ее пределами. Дж. Клин Вирол . 2018 Апрель 101: 11-17. [Медлайн].

Шабани А., Макванди М., Самарбафзаде А., Теймури А., Расти М., Карами С. и др. Инфекция эховирусом 30 и вирусом Коксаки A9 среди новорожденных с сепсисом в Иране. Иран Дж. Микробиол . 2018 10 августа (4): 258-265. [Медлайн].

Ван М., Рен Кью, Чжан З., Чжан Л., Карр М.Дж., Ли Дж. И др. Быстрое определение генотипов энтеровирусов ящура, кисты и рта с помощью мультиплексной ПЦР. Дж. Вироловые методы . 2018 Август 258: 7-12. [Медлайн].

CDC. Неполиомиелитный энтеровирус: вспышки и эпиднадзор. CDC. Доступно по адресу https://www.cdc.gov/non-polio-enterovirus/outbreaks-surveillance.html. 14 ноября 2018 г .; Доступ: 6 декабря 2019 г.

CDC. Неполиомиелитный энтеровирус: для медицинских работников. CDC. Доступно по адресу https://www.cdc.gov/non-polio-enterovirus/hcp.html. 14 ноября 2018 г .; Дата обращения: 6 декабря 2019 г.

CDC. Острый вялый миелит: исследование AFM. CDC. Доступно по адресу https://www.cdc.gov/acute-flaccid-myelitis/afm-investigation.html. 4 ноября 2019 г .; Дата обращения: 6 декабря 2019 г.

Болезни рук, ящура

Болезнь рук, ног и рта (HFMD) — это вирусная инфекция, которая вызывает сыпь или волдыри на руках и ногах, а также во рту или вокруг него.Есть два типа вирусов, вызывающих HFMD, и симптомы различаются в зависимости от вируса.

HFMD в основном поражает детей в возрасте до 10 лет, но также может поражать подростков. Он легко передается от одного человека к другому. Можно заразиться вирусом более одного раза, но симптомы будут менее серьезными.

HFMD не связан с ящуром, который встречается у животных.

Признаки и симптомы HFMD

Симптомы обычно появляются через три-семь дней после заражения и могут длиться от семи до 10 дней.Если у вашего ребенка HFMD, он может чувствовать усталость, повышенную температуру и сыпь. В зависимости от того, каким вирусом заражен ваш ребенок, кожная сыпь может выглядеть так:

• Маленькие овальные белые волдыри на ладонях, подошвах стоп, а также во рту. У вашего ребенка могут быть боли во рту и горле, что приводит к плохому аппетиту или риску обезвоживания (питье и еда могут быть болезненными из-за волдырей во рту).
• Красная кожная сыпь с коричневой чешуей на ней. Сыпь появляется на внешних руках, руках, ногах, ступнях, вокруг рта и верхней части ягодиц.Ствол обычно относительно чистый. Иногда появляются волдыри, но обычно они не во рту, и ваш ребенок может есть и пить как обычно.

Волдыри не должны чесаться, как волдыри при ветряной оспе. Если у вашего ребенка экзема, HFMD может вызвать обострение экземы и потенциально инфицирование бактериями.

Как распространяется HFMD?

HFMD чаще всего вызывается вирусом Коксаки.Основной путь распространения HFMD — это контакт с жидкостью внутри волдырей или с каплями, распространяемыми при чихании и кашле. Вирус также может присутствовать в испражнениях (фекалиях) в течение нескольких недель после выздоровления.

Для предотвращения распространения HFMD:

• Тщательно мойте руки после прикосновения к жидкостям организма ребенка. Это включает в себя прикосновение к волдырям, помощь в высморкавании, смену подгузников или помощь с туалетом.
• Убедитесь, что ваш ребенок не пользуется общими предметами, такими как столовые приборы, чашки для питья, полотенца, зубные щетки и одежда.
• Не позволяйте ребенку ходить в школу, детский сад или детский сад до тех пор, пока вся жидкость в его волдырях не высохнет.

Уход на дому

HFMD — это вирусная инфекция, которая редко вызывает дальнейшие осложнения. Антибиотики не действуют на вирусы и не назначаются детям с HFMD. HFMD поправится сама по себе, но есть способы заботиться о своем ребенке дома:

• Если ваш ребенок испытывает боль или дискомфорт, дайте ему обезболивающее, например парацетамол или ибупрофен.Не давайте аспирин. Смотрите наш информационный бюллетень Обезболивание для детей.
• Давайте ребенку часто пить воду или раствор для пероральной регидратации, чтобы предотвратить обезвоживание.
• Дайте волдырям высохнуть естественным путем. Не протыкайте и не сжимайте их.
• Если ваш ребенок плохо себя чувствует, у него жар и кожная сыпь (маленькие ярко-красные пятна или пурпурные пятна или синяки необъяснимого характера), которые не приобретают цвет кожи (бледнеют) при нажатии на него, это может быть признаком менингококковой инфекции. (см. наш информационный бюллетень Менингококковая инфекция).

Ключевые моменты, которые нужно запомнить

• HFMD — легкое заболевание, которое вылечит само по себе.
• Два типа вирусов вызывают HFMD, и сыпь зависит от того, какой вирус есть у вашего ребенка.
• HFMD легко передается от человека к человеку.

Для получения дополнительной информации

Общие вопросы, которые задают нашим врачам

Опасен ли HFMD для беременных?

HFMD не представляет опасности для беременных женщин и их будущих детей.

У моего ребенка все еще волдыри. Сможет ли она вернуться в школу?

Если жидкость в волдырях высохла, ваш ребенок может вернуться в школу.

Разработано отделениями неотложной помощи и инфекционного контроля Королевской детской больницы. Мы признательны потребителям и опекунам RCH.

Отзыв написан в феврале 2018 г.

Kids Health Info поддерживается Фондом Королевской детской больницы.Чтобы сделать пожертвование, посетите www.rchfoundation.org.au.

Индивидуальный случай: инфекция, вызванная вирусом Коксаки B

Пациент

Фигура. Эритродермия правой стопы.

24-летний мужчина, практикующий секс с мужчинами (МСМ), получавший доконтактную профилактику. (PrEP) поступил в конце января с пятидневной лихорадкой, головной болью, недомоганием, артралгией, одинофагия, сыпь, диарея, тошнота и дискомфорт в животе.При поступлении описал сыпь как зудящая и не поддается лечению противоаллергическими препаратами, отпускаемыми без рецепта. Он сообщил о нескольких недавних незащищенных сексуальных контактах. У него было строгое соблюдение режима PrEP, своевременные прививки и отсутствие воспоминаний о контактах с больными. Его физический осмотр было значимым для лихорадки 39 ° C, диффузной ретикуломакулярной сыпи, эритродермии. на ладонях и подошвах, а также при диффузных лимфаденопатиях (рисунок).

Первоначальное обследование показало эозинофилию 7,3% (референсный диапазон от 0 до 5%) без лейкоцитоза, гипербилирубинемия (уровень билирубина, 3,1 мг / дл; референсный диапазон, ≤1,2 мг / дл) с прямое преобладание билирубина, повышенный уровень аминотрансферазы (аспартатаминотрансфераза уровень, 44 Ед / л [контрольный диапазон, <40 Ед / л]; уровень аланинаминотрансферазы, 155 Ед / л [эталонный диапазон от 7 до 45 Ед / л]), уровень щелочной фосфатазы 129 Ед / л (эталонный диапазон от 35 до 137 Ед / л) и аномальный анализ мочи с пиурией.Посев крови и мочи были отрицательными. Рентген грудной клетки и КТ головы в норме. Обширная инфекционная Обследование включало тестирование на ВИЧ, вирус Эпштейна-Барра, цитомегаловирус, грипп А. и B, респираторно-синцитиальный вирус (RSV), гонорея, хламидиоз, вирус Коксаки А, и гепатит A, B и C. Дальнейшее обследование было значительным для выявления вируса Коксаки. B4 (CVB4) с титрами 1:80.Пациент прошел поддерживающую терапию и выписан. домой после разрешения лихорадки.

Диагноз

У этого пациента была диагностирована острая межсезонная инфекция CVB4, не связанная со вспышкой. Вирусы Коксаки — это энтеровирусы с малой РНК, которые являются членами семейства Picornaviridae . Большинство случаев заражения происходит в результате вспышек в летний и осенний сезоны. и передаются фекально-оральным путем.Инкубационный период от трех до шести. дней. Тяжесть широко варьируется от легкой степени и гриппоподобного или мононуклеозоподобного синдромов. к фатальным неврологическим и / или сердечным проявлениям. Общие симптомы включают: лихорадка, головная боль, желудочно-кишечные симптомы и пятнисто-папулезная сыпь с сохранением ладони / подошвы (в отличие от болезни рук и ног, обычно вызываемой вирусом Коксаки A16, вирусом Коксаки A6 и энтеровирус 71).По данным Национальной системы надзора за энтеровирусами, наиболее распространенные клинические синдромы, связанные с CVB4, включают асептический менингит. (44%), респираторные симптомы (20%), энцефалит (14%), миокардит и перикардит (6%) и неспецифическая лихорадочная сыпь. Почти 100% пациентов с инфекциями CVB4 сообщили лихорадка, 80% сообщили о фарингите и 25% сообщили о сыпи. Ректальные мазки положительные у 70–80% пациентов независимо от симптомов, а в литературе описывается изоляция CVB4 в придатке яичка.

Симптомы нашего пациента, особенно синдром, подобный мононуклеозу с лихорадкой и сыпь, не щадящая ладони и подошвы, а также факторы риска, о которых сообщалось, привели к длительному дифференциал инфекций, включая первичную ВИЧ-инфекцию, ранний сифилис, инфекционный мононуклеоз и острый уретрит. Неинфекционные причины, такие как синдром DRESS или также учитывались аутоиммунные заболевания.Хотя рибавирин доказал свою эффективность против CVB4 его использование рекомендуется только для лечения острого миокардита. Хотя инфекции, вызванные вирусом Коксаки (как A, так и B), являются причиной около 20% 25% вирусных миокардитов, только от 4% до 6% пациентов с инфекцией CVB4 при миокардите. Есть противоречивые сообщения о проникновении через гематоэнцефалический барьер. рибавирина, поэтому препарат не рекомендуется систематически для лечения неврологических заболеваний. осложнения инфекций, вызванных вирусом Коксаки.Рекомендуемое лечение для легких форм CVB4 случаях — поддерживающая терапия. Из-за выделения вируса со стулом на срок до 8 недель это необходимо проконсультировать пациентов о фекально-оральном пути передачи и важности гигиены рук.

Жемчуг

• Инфекции, вызванные вирусом Коксаки, хотя и часто встречаются у детей, могут проявляться у взрослых, имитирующих синдром, подобный мононуклеозу, но инфекции также могут быть тяжелыми, с неврологическими и / или сердечные осложнения.
• Поскольку вирус Коксаки может выделяться со стулом в течение восьми недель, консультирование является обязательным. для предотвращения распространения вируса.

Доктор Франк работает госпиталистом в Медицинской школе Университета Колорадо в Денвере. Доктор Пфайфер — ординатор-уролог в Университете штата Юта в Солт-Лейк-Сити.

Другие кейсы в этом выпуске

ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ КОКСАКИ — Руководство пациента

Обзор

Вирусы Коксаки происходят из кишечника (энтеровирусы).

Они являются частой причиной ангины, особенно у детей.

У половины заболевших нет никаких симптомов. Симптомы включают боль в горле, жар и боли.

Легкие случаи проходят в течение 7-10 дней.

Лечение обычно состоит из покоя, жидкости и симптоматического лечения боли в горле.

Антибиотики неэффективны, вакцины нет.

Более серьезные, но редкие инфекции, вызываемые вирусом Коксаки, включают инфекции мышц, мозга и сердца.

Другие варианты включают болезнь рук, ног и рта, язвы на горле и во рту, боли в мышцах или проблемы с глазами.

Новорожденные дети нуждаются в особом уходе, если у них развивается серьезный случай вируса Коксаки.

При тяжелых симптомах требуется консультация врача, чтобы исключить более серьезные разновидности вируса.

Мытье рук — лучшая профилактическая мера.

Что такое вирус Коксаки?

Вирусы Коксаки — частая причина боли в горле, особенно у детей, часто весной и летом. Типичными симптомами являются жар, а в некоторых случаях боль в горле и языке.

Вирусы Коксаки очень распространены и образуют набор вирусов, называемых энтеровирусами, которые происходят из пищеварительного тракта человека.К другим штаммам энтеровирусов относятся полиомиелит и гепатит А.

Вирусы Коксаки очень выносливы — они передаются через слюну, например, при кашле, или через фекалии на немытых руках и поверхностях. Они выживают несколько дней вне тела, даже в замороженных условиях на открытом воздухе.

Насколько это распространено?

Хотя любой человек подвержен риску заражения вирусами Коксаки, чаще всего страдают дети. Половина всех инфицированных детей не проявляет никаких симптомов.У некоторых симптомы очень легкие или просто жарко. У других могут возникнуть другие осложнения, вызывающие боль в глазах, груди или животе.

В редких случаях вирусы могут вызывать: мышечную инфекцию, известную как миозит; менингит, при котором жидкость, окружающая мозг, заражается; или инфекция головного мозга, известная как энцефалит. Сердечный миозит (инфекция сердечной мышцы) может быть смертельным для новорожденных.

Каковы симптомы?

У большинства больных симптомы вообще не проявляются.Те, кто ощущает симптомы, обычно ощущают легкие симптомы гриппа, включая жар, головные и мышечные боли и, возможно, сыпь. Обычно возникает легкая боль в горле, иногда присутствует тошнота или боль в животе.

У некоторых детей развивается заболевание, известное как болезнь рук, ног и рта, при котором маленькие болезненные волдыри появляются во рту, на языке и на внутренней стороне щек, а также на ладонях и подошвах ног.

У других появляются болезненные волдыри и язвы на задней стенке глотки, известные как герпангина.Они могут появиться на миндалинах и мягком небе — мягкой мясистой части неба.

Некоторые страдают болью в груди при дыхании.

Другие разновидности вируса Коксаки включают миозит, мышечную инфекцию; менингит, инфекция оболочек головного мозга; и энцефалит, инфекция головного мозга. Это может быть опасно, а в некоторых случаях — смертельно.

Как долго продлятся симптомы вируса?

Продолжительность симптомов зависит от конкретного типа вируса Коксаки.

В большинстве случаев симптомы исчезают через 7-10 дней, причем первые 3 дня или около того являются худшими. В некоторых случаях лихорадка приходит и уходит — она ​​появляется на один день, а через несколько дней появляется снова.

Какие состояния связаны с вирусами Коксаки?

Хотя вирус Коксаки обычно вызывает легкие симптомы, с ним связаны более серьезные состояния:

Вирус Коксаки является частой причиной геморрагического конъюнктивита — инфекции, поражающей белки глаз.При этом состоянии глазная боль начинается внезапно, с нечеткостью зрения, слезотечением и непереносимостью света. Белки глаз выглядят красными и опухшими.

Болезнь Борнхольма, также известная как плевродиния, представляет собой разновидность инфекции, вызванной вирусом Коксаки. Это приводит к спазму мышц в мышцах груди и верхней части живота.

Новорожденные дети могут заразиться от матери, что приведет к миокардиту — инфекции сердечной мышцы. У них поднимается температура в течение двух недель после рождения, и у них затрудняется дыхание.Они плохо питаются и малоподвижны, а иногда имеют слабую синюю окраску кожи, губ и ногтей из-за недостатка кислорода в крови. Это состояние может быть фатальным, поэтому необходима медицинская помощь.

Как диагностировать и лечить?

Лучше всего обратиться за медицинской помощью и пройти обследование, чтобы исключить другие состояния, которые могут быть очень похожими и потенциально опасными.

Сначала можно взять мазок из зева, чтобы исключить бактериальную инфекцию, такую ​​как ангина.

Антибиотики не эффективны, так как это вирусная, а не бактериальная инфекция.

Большинство детей полностью выздоравливают после нескольких дней отдыха. Наиболее эффективное лечение включает отдых, обильное питье и облегчение болезненных симптомов. Ледяные блоки, молочные коктейли и подобная прохладная мягкая пища помогают облегчить боль в горле и увеличить потребление жидкости. Полоскание горла теплой соленой водой также может облегчить боль в горле.

Обычно жар и дискомфорт можно уменьшить с помощью обезболивающих, содержащих ацетаминофен или ибупрофен. Врач может порекомендовать подходящие для детей лекарства, такие как тайленол.

АСПИРИН НЕ СЛЕДУЕТ ПРИМЕНЯТЬ ДЕТЯМ ДО 12 ЛЕТ.

Когда опасен вирус Коксаки?

Наиболее тяжелые формы вируса Коксаки могут привести к летальному исходу, особенно у новорожденных. К этим формам относятся миокардит (мышечная инфекция) и энцефалит (инфекция головного мозга). Больничная помощь нужна даже детям старшего возраста.

При появлении у новорожденного ребенка следует немедленно обратиться за медицинской помощью:

• лихорадка
• трудности с кормлением
• низкий аппетит
• рвота
• диарея
• судороги
• затрудненное дыхание
• чрезмерная сонливость.

Если у ребенка нет лихорадки, но есть что-либо из следующего, обратитесь за медицинской помощью:

• сильная боль в горле
• красные опухшие слезящиеся глаза
• язвы во рту или на коже
• сильная мышечная боль в грудь и живот
• одышка и боль в груди
• сильные головные боли с рвотой, сонливостью, судорогами или спутанностью сознания
• болью в яичках.

Если во время беременности поднимается температура, следует обратиться за медицинской помощью, особенно в преддверии срока родов.

Как это распространяется и можно ли его предотвратить?

Вирус Коксаки передается со слюной или фекалиями. Вспышки чаще случаются в теплом климате и сезоне. Когда происходит вспышка заболевания, наибольшему риску подвергаются маленькие дети. Дети старшего возраста могут подвергаться заражению вирусом Коксаки, находясь в тесной среде, такой как школьные лагеря и детские сады.

Вакцины отсутствуют. Простое мытье рук — лучшая профилактика. Тщательное мытье рук после смены подгузников и перед приготовлением пищи может помочь остановить распространение инфекции. Очень может помочь обучение маленьких детей привычке часто мыть руки, особенно после туалета и перед едой.

Вирус Коксаки B — Фонд безопасной питьевой воды

Что такое вирус Коксаки B?

Вирус Коксаки был впервые выделен в Коксаки, штат Нью-Йорк, в 1948 году.Существует шесть
различных вирусов Коксаки B, каждый из которых отвечает за различные симптомы и заболевания.
Вирусы Коксаки B ответственны за многочисленные случаи инфекций центральной нервной системы
у младенцев и детей, а также инфекции сердечной мышцы как у детей
, так и у взрослых. Эти вирусы являются наиболее распространенным возбудителем миокардита (воспаление
мышечных стенок сердца) и дилатационной кардиомиопатии (группа заболеваний
, при которых сердечная мышца ослаблена и не может эффективно перекачивать кровь, что приводит к расширению камер сердца
).

Каковы симптомы и время инкубации?

Человеческие инфекции, вызванные вирусом Коксаки B, распространены и часто протекают бессимптомно (без симптомов). Болезни могут вызывать симптомы, варьирующиеся от легких желудочно-кишечных расстройств (заболевания желудка или кишечника) до паралича, сердечных повреждений и врожденных дефектов, хотя субклинические и легкие инфекции являются наиболее распространенными. Для заражения вирусом Коксаки B характерны: лихорадка, утомляемость, недомогание (дискомфорт в теле) и боли в груди.Время инкубации большинства вирусов Коксаки составляет 2-10 дней, а симптомы со стороны сердца обычно возникают примерно через две недели после вирусной инфекции.

Коксаки В отвечает за начало многих заболеваний, некоторые из которых включают: простуду, плевродинию (внезапные приступы боли и болезненности мышц между ребрами), асептический менингит (воспаление оболочек, окружающих головной и спинной мозг). пуповина), инфекции верхних дыхательных путей (носоглотка, ротовая полость и горло), миокардит и перикардит (воспаление перепончатого мешка, который окружает и защищает сердце).Известно также, что вирусы Коксаки B вызывают: энцефалит (воспаление головного мозга), вялый моторный паралич (паралич с потерей мышечного тонуса), экзантему (появление высыпаний на коже), сыпь, пневмонию (воспаление легких) и т. Д. генерализованное заболевание новорожденного.

Как долго длятся симптомы?

Продолжительность заражения вирусом Коксаки варьируется и зависит от конкретного типа инфекции. При лихорадке Коксаки без каких-либо других симптомов температура тела обычно возвращается к норме в течение трех-пяти дней.При плевродинии жар и мышечные боли обычно продолжаются от одного до двух дней.

Как диагностируется?

Врачи диагностируют вирус Коксаки, проводя обследование и проверяя характерные симптомы болезни. Кал и жидкости из задней стенки глотки также могут быть проверены, чтобы определить, присутствует ли вирус.

Подвержен ли я серьезному риску заболевания?

Инфекция сердца вирусом Коксаки B может привести к вирусному миокардиту — воспалительному заболеванию сердца, которое может вызвать сердечную недостаточность.Заболевание обычно не приводит к смерти, но может произойти необратимое повреждение сердца. Обычно нет долгосрочных осложнений от легких заболеваний / симптомов, вызванных вирусом Коксаки B. Однако некоторые пациенты с параличом могут не полностью выздороветь. Тем, у кого из-за миокардита развивается дилатационная кардиомиопатия (сердечная недостаточность), потребуется длительный уход за своими симптомами.

Coxsackievirus A16 — обзор

Рис. 7.19 и 7.20

Кисть-ящура — наиболее известное клиническое проявление энтеровирусной инфекции.Основные серотипы, связанные с этим заболеванием, включают вирус Коксаки A16, A6 и A10, а также энтеровирус 71. Заболевание встречается во всем мире, при этом крупные вспышки отмечены в Азиатско-Тихоокеанском регионе за последние несколько десятилетий. Большинство пациентов, у которых развивается ящура, моложе 10 лет, и в школах и детских садах часто возникают эпидемии. В регионах с умеренным климатом вспышки обычно происходят летом или в начале осени. Передача заболевания происходит фекально-оральным путем, слюной или респираторными выделениями.

Ранние клинические проявления заболевания рук, ног и рта включают лихорадку, недомогание, плохой аппетит и боль в горле. Впоследствии, в течение нескольких дней, у пациента обычно развивается энантема ротовой полости; часто вовлекаемые узлы включают слизистую оболочку щеки, слизистую оболочку губ и язык. Поражения полости рта выглядят как зоны эритемы, которые затем превращаются в пузырьки, которые разрываются, образуя болезненные язвы. Кроме того, у пациента обычно появляется кожная сыпь. Классически экзантема включает ладони, подошвы и пальцы; однако также может наблюдаться более распространенное или, иногда, периоральное поражение кожи.Кожные поражения имеют тенденцию быть болезненными и могут проявляться в виде небольших эритематозных пятен, которые превращаются в пузырьки или папулы. Энантема и экзантема обычно рассасываются в течение 7-10 дней. Однако у некоторых пациентов через несколько недель появляются изменения ногтей (например, горизонтальные бороздки или гребни, известные как линии Бо , выпадение ногтей).

Большинство случаев заболевания кистей и ягодиц протекают в легкой форме и лечатся с помощью поддерживающих мер (например, жаропонижающих и анальгетических средств нонаспирина, поддержания адекватной гидратации и питания).Однако существует вероятность серьезных осложнений (таких как сильное обезвоживание, менингит, паралич, энцефалит ствола мозга, нейрогенный отек легких, мозжечковая атаксия) и смерти. В частности, сообщалось о значительной заболеваемости и смертности во время азиатских вспышек инфекции, вызванной энтеровирусом 71. Пациенты с тяжелым заболеванием могут получать внутривенную терапию иммуноглобулинами, хотя необходимы дальнейшие исследования. Профилактические меры по поводу ящура и рта включают мытье рук, дезинфекцию поверхностей и предметов, а также не разрешать больным детям посещать школу или детский сад.

Флуоксетин — мощный ингибитор репликации вируса Коксаки

РЕФЕРАТ

В настоящее время не существует противовирусных препаратов для лечения энтеровирусных инфекций, которые часто являются серьезными и потенциально опасными для жизни. Молекулярный скрининг библиотек малых молекул выявил флуоксетин, селективный ингибитор обратного захвата серотонина, как мощный ингибитор репликации вируса Коксаки. Флуоксетин не влиял ни на проникновение вируса, ни на трансляцию вирусного генома.Вместо этого флуоксетин и его метаболит норфлуоксетин заметно снижали синтез вирусной РНК и белка. Ввиду его благоприятных фармакокинетических характеристик и профиля безопасности флуоксетин требует дополнительных исследований в качестве потенциального противовирусного агента при энтеровирусных инфекциях.

ВВЕДЕНИЕ

Человеческие энтеровирусы являются представителями рода, содержащего более 100 серологически отличных малых безоболочечных РНК-вирусов, ответственных за полиомиелит, энцефалит, миокардит, молниеносный сепсис у новорожденных и другие опасные для жизни инфекции (8).Иммунизация практически устранила циркуляцию полиовирусов, архетипа этого рода, но другие энтеровирусы продолжают вызывать значительную заболеваемость и смертность в Соединенных Штатах и ​​во всем мире.

Недавние вспышки энтеровируса 71 (EV71) и вируса Коксаки B1 (CVB1) подчеркивают опасность для здоровья людей, которую представляют энтеровирусы. EV71 был причиной многочисленных эпидемий инфекций центральной нервной системы в Европе и Азиатско-Тихоокеанском регионе за последние 15 лет (4, 5, 24, 26, 27).Хотя инфекция EV71 может быть легкой или нераспознанной, энцефалит ствола головного мозга и некардиогенный отек легких стали причиной многих смертельных случаев во время азиатских вспышек в период с 1997 по 2010 год. Недавняя вспышка миокардита, вызванного вирусом Коксаки B1 (CVB1) в США, также подчеркнула изменчивость энтеровирусов и их эпидемический потенциал. . CVB1 был первоначально выделен в 1948 году недалеко от Коксаки, штат Нью-Йорк, но новый вариант CVB1 появился в 2007 году и был обнаружен почти в 50 сайтах в США. Большие группы случаев произошли в Чикаго, штат Иллинойс, и Лос-Анджелесе, штат Калифорния, включая случаи сепсиса, миокардита и смерти новорожденных (6, 42, 45).С тех пор CVB1 стал наиболее часто определяемым энтеровирусом в США (7).

Энтеровирусы демонстрируют высокую степень генетической изменчивости в последовательностях их капсидных генов, а иммунитет является специфичным для серотипа, что исключает стратегию вакцинации, которая была бы направлена ​​на все патогенные неполиомирные энтеровирусы. Однако энтеровирусы демонстрируют значительную генетическую консервативность во внутреннем сайте входа в рибосому (IRES), необходимом для независимой от кэп трансляции вирусного генома в единый полипротеин и в кодирующих доменах для неструктурных вирусных белков, которые происходят из него путем автопротеолитического расщепления (30). –32).Эти особенности и структурная консервативность белков капсида и структуры вирионов различных энтеровирусов (14) позволяют предположить, что возможно создание антиэнтеровирусных агентов широкого спектра действия.

В настоящее время нет доступных противовирусных агентов для этих часто встречающихся патогенов. Ни один из десятков противовирусных препаратов, эффективных против ВИЧ, вируса гепатита В или С, вируса гриппа, вирусов герпеса или других вирусов, не обладает активностью против энтеровирусов. Исследовательский антиэнтеровирусный агент плеконарил (34) был исключен из дальнейших клинических разработок и исследований, за исключением продолжающегося испытания с участием 45 новорожденных с синдромом энтеровирусного сепсиса (испытание 106 группы совместных противовирусных исследований; клинические испытания.идентификатор gov NCT00031512). В настоящее время проводятся клинические испытания аналогичного капсид-связывающего препарата, BTA-798, для лечения взрослых астматиков с симптоматической инфекцией риновирусов человека, которые в настоящее время таксономически включены в род энтеровирусов. В научной и медицинской литературе были обнаружены и описаны дополнительные соединения, которые подавляют рост энтеровирусов, но их полезность остается в значительной степени неизученной (12, 38). На данный момент лечение серьезных и опасных для жизни энтеровирусных инфекций состоит из поддерживающей терапии, включая, при необходимости, лечение припадков, кровотечений и дыхательной недостаточности.Иногда вводят внутривенный иммуноглобулин от объединенных доноров в надежде ограничить репликацию вируса.

В поисках дополнительных противовирусных агентов мы провели скрининг различных библиотек малых молекул и идентифицировали ранее неизвестные ингибиторы репликации энтеровирусов. Интересно, что флуоксетин, селективный ингибитор обратного захвата серотонина, продемонстрировал мощную противовирусную активность против различных серотипов энтеровирусов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Клетки и вирусы.Клетки HeLa-RW были щедро предоставлены Линдси Уиттон (Исследовательский институт Скриппса, Ла-Хойя, Калифорния). Как описано ранее (29), запасы CVB-h4 и CVB3, экспрессирующие усиленный зеленый флуоресцентный белок (CVB3-EGFP), получали путем трансфекции клеток HeLa-RW плазмидой, экспрессирующей полимеразу Т7 (pAR3126) и плазмидными клонами вирусного генома ( 13, 20). CVB3-h4 очень быстро завершает свой жизненный цикл в этих клетках, достигая пиковых вирусных титров через 6 часов после заражения (20, 36). Изолят CVB1, выделенный во время вспышки 2007 г. (42, 45), щедро предоставили Стэн Шульман и Сяотянь Чжэн (Медицинская школа им. Файнберга Северо-Западного университета, Чикаго, Иллинойс).Клинические изоляты CVB2 и CVB3-MCH (21) были предоставлены Лабораторией клинической микробиологии Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе. Титры вирусов определяли с помощью анализа бляшек с использованием клеток HeLa-RW (29).

Первичный скрининговый анализ. Мы провели скрининг на новые ингибиторы репликации энтеровирусов, используя анализ для мониторинга жизнеспособности клеток и выявления энтеровирусного цитопатического эффекта (CPE) путем модификации анализа, описанного Gong et al. (16). Перед добавлением библиотечных соединений 20 мкл культуральной среды на лунку разливали в 384-луночные планшеты для микротитрования (Greiner One) и 0.Добавляли 5 мкл 1 мМ раствора тестируемого соединения в диметилсульфоксиде (ДМСО) с использованием специального булавочного инструмента V&P на 500 нл (Сан-Диего, Калифорния). В лунки с отрицательным контролем добавляли 0,5 мкл одного ДМСО. Клетки HeLa-RW и вирус CVB3-h4 были смешаны, и 20 мкл были добавлены в планшеты для достижения соотношения 3000 клеток / лунка и 20 БОЕ CVB-h4 / лунка, что соответствует множественности инфекции (MOI) 0,007. Гуанидин, хорошо известный ингибитор CVB3 (12, 33), использовали в качестве положительного контроля в конечной концентрации 10 мМ, что привело к полной защите от цитопатических эффектов инфекции CVB3.Планшеты инкубировали в инкубаторе для культур клеток при 37 ° C в течение 48 часов. Цитопатический эффект (ЦПЭ), индуцированный репликацией CBV3-h4, был обнаружен и количественно определен с использованием реагента ATPLite 1-Step (Perkin Elmer) для оценки жизнеспособности клеток. В конце периода инкубации в каждую лунку добавляли 25 мкл реагента ATPLite 1-Step и планшет закрывали прозрачной пленкой. Сигналы люминесценции на планшете сразу считывали с помощью ридера FLUOstar Optima (BMG Labtech, Inc., Кэри, Северная Каролина). Коэффициент Z ‘анализа был больше 0.5, и хиты с противовирусной активностью более 50% от противовирусной активности положительных контролей были выбраны для последующего наблюдения.

Здесь мы представляем результат проверки Химической библиотеки Прествика. Эта библиотека содержит 1120 химических соединений высокой чистоты (включая многие одобренные FDA препараты), выбранных из-за структурного разнообразия и широкого спектра клинических применений.

Определение противовирусных EC ₅₀ и CC ₅₀ флуоксетина и норфлуоксетина. Флуоксетин и норфлуоксетин были приобретены у Sigma-Aldrich и растворены в ДМСО для достижения начальной концентрации 20 мМ, которую затем разводили сериями по 2 штуки. -кратные разведения до самой низкой концентрации 38 нМ.Используя тот же одностадийный анализ ATPLite на 384-луночном планшете, мы также оценили жизнеспособность клеток в присутствии серийно разведенных химических соединений, чтобы определить 50% цитотоксическую концентрацию (CC ₅₀ ), определяемую как снижение на 50% свечение по сравнению с контрольными лунками. 50% эффективная концентрация (EC ₅₀ ) была определена как концентрация соединения, которая приводит к сохранению 50% значений люминесценции инфицированных клеток. Индекс селективности (SI) рассчитывали для каждого соединения как SI = CC ₅₀ / EC ₅₀ .

Анализ IRES-опосредованной трансляции. Бицистронный вектор экспрессии был сконструирован путем амплификации 5′-нетранслируемой области (5 ‘UTR) CVB3 / 28 (39), миокардитного штамма CVB3, и вставки его в сайт множественного клонирования плазмиды pDL-N (41), подаренной Асимом Дасгуптой. В этой конструкции за промотором цитомегаловируса (CMV) следует люцифераза Renilla, за которой следует термостабильная шпилька, последовательность 5’-UTR и ген люциферазы светлячка. Клетки HeLa-RW высевали в 96-луночный микротитровальный планшет и на следующий день трансфицировали этой двойной люциферазной репортерной плазмидой с использованием реагента для трансфекции Bio T (Bioland Scientific) в соответствии с инструкциями производителя.Через 48 часов после трансфекции соединения добавляли к трансфицированным клеткам в концентрации 6,25 мкМ, эффективная концентрация была выбрана на основании данных EC ₅₀ и CC ₅₀ . В контрольные лунки добавляли только ДМСО. Через 72 часа после трансфекции клетки трижды промывали фосфатно-солевым буфером (PBS), и измерения уровней двойной люциферазы проводили с использованием системы анализа репортерной двойной люциферазы Promega в соответствии с инструкциями производителя.Для стабильной трансфекции использовали селекционную среду с 1 мг / мл G418 для отбора клеток, стабильно трансфицированных плазмидой и впоследствии поддерживаемых в среде с 1 мг / мл G418.

Определение противовирусной активности путем ингибирования EGFP-экспрессирующего рекомбинантного CVB 3. Клетки HeLa-RW высевали по 30 000 клеток на лунку в 96-луночном микротитровальном планшете в 100 мкл среды и культивировали в течение ночи. На следующий день клетки инфицировали рекомбинантным CVB3, экспрессирующим EGFP, с MOI, равным 1.Соединения добавляли к клеткам через 0, 1 и 2 часа после заражения в концентрации 6,25 мкМ. В контрольные лунки добавляли только ДМСО. Через шесть часов после инокуляции вирусом клетки фиксировали 1% формальдегидом и окрашивали DAPI (4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндол) в течение 5 минут. Клетки промывали 3 раза PBS перед анализом с использованием микроскопа высокого содержания ImageXpress Micro (Molecular Devices).

Тест на прямую вирулицидную активность. Флуоксетин (или разбавитель ДМСО) добавляли к вирусным запасам CVB3-h4 до достижения конечной концентрации 10 мкМ.После инкубации при 37 ° C в течение 1 ч препарат серийно разводили и титр вируса определяли с помощью анализа бляшек, как описано ранее (29).

Анализы репликации вирусов. Чтобы оценить влияние норфлуоксетина и флуоксетина на репликацию энтеровирусов, 1 × 10 ⁵ клеток HeLa-RW в 1 мл DMEM с 10% фетальной бычьей сывороткой (FBS) помещали в каждую лунку с 24 лунками. планшеты и инкубировали в течение ночи при 37 ° C. Через 24 ч в лунки добавляли лекарственные соединения для достижения желаемых концентраций.Через 30 мин при 37 ° C добавляли исходный вирус CVB-h4 для достижения MOI, равного 1, и планшеты снова помещали в инкубатор при 37 ° C. Через 6 ч среду отсасывали из лунок, слои клеток промывали PBS, а затем поднимали 100 мкл трипсина (2,5%). Трипсин инактивировали 400 мкл среды на основе среды Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM), и переносили в пробирки с завинчивающейся крышкой. Клетки дважды промывали и затем ресуспендировали в PBS, аликвоты замораживали при -80 ° C перед титрованием вируса или ПЦР с обратной транскрипцией (RT-PCR) и анализом иммуноблоттинга.

(i) Количественное определение вирусной РНК с помощью ОТ-ПЦР. Вирусную РНК экстрагировали из осадка клеток с помощью коммерческого набора Qiagen RNEasy и количественно оценивали с помощью ПЦР с обратной транскриптазой в реальном времени (ОТ-ПЦР) с использованием коммерческих реагентов и праймеров Applied Biosystems SYBR green описано другими (10). Для получения количественных стандартов вирусная РНК была синтезирована из линеаризованного ph4 (20), количественно определена спектрофотометрией и серийно разведена.

(ii) Обнаружение вирусного белка иммуноблотом. Осадки клеток ресуспендировали в PBS и лизировали в буфере для образцов додецилсульфата лития (LDS) Invitrogen NuPAGE.Затем лизированные клетки гомогенизировали пропусканием через иглы малого диаметра для сдвига клеточной ДНК и разделяли с помощью SDS-PAGE с использованием 12% -ных гелей Bis-Tris (Invitrogen NuPAGE). Белки переносили на нейлоновую мембрану и блокировали в обезжиренном молоке, а белки вируса Коксаки детектировали иммуноблоттингом с антисывороткой, полученной от ATCC (V030-501-560), с использованием хемилюминесцентного субстрата (Thermo Scientific SuperSignal; West Pico).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Идентификация новых низкомолекулярных ингибиторов репликации CVB3.Пытаясь идентифицировать низкомолекулярные ингибиторы энтеровирусных инфекций, мы использовали описанный ранее молекулярный скрининговый анализ (16), основанный на защите клеток от цитотоксических эффектов вирусной инфекции. Клетки HeLa-RW высевали в 384-луночные планшеты, содержащие эти соединения, и инфицировали при низкой множественности инфицирования CVB3-h4, молекулярным клоном вируса Коксаки B3 (CVB3) (20). CVB3 был выбран, поскольку он постоянно появлялся среди 15 наиболее часто регистрируемых энтеровирусов в Соединенных Штатах, с расчетным уровнем летальности 5.4% (19). Известно, что этот специфический штамм CVB3 вызывает тяжелый миокардит у мышей (20, 36), и мы недавно обнаружили, что он вызывает обширный миокардит и диссеминированную инфекцию у яванских макак (C.E. Cammock et al., Представлено для публикации).

Через 48 часов жизнеспособность клеток оценивали с использованием реагента, содержащего люциферазу, ATPLite 1-Step (Perkin Elmer), который был оптимизирован для использования в анализах высокопроизводительного скрининга (HTS). Фактор Z ‘, оценка качества скрининговых анализов (46), контролировали в каждом планшете.Среди других библиотек малых молекул мы проверили противовирусную активность Prestwick Chemical Library, состоящую в общей сложности из четырех 384-луночных микротитровальных библиотек, содержащих 1120 одобренных FDA лекарств и других соединений. Z’-факторы планшетов для скрининга находились в диапазоне от 0,5 до 0,7, что указывает на надежность анализа. Соединения, которые сильно защищали клетки от литического воздействия инфекции CVB3-h4 (значения люминесценции> 50% значений положительного контроля), были классифицированы как начальные попадания (рис.1).

Рис. 1

Схема подхода молекулярного скрининга. Значения люминесценции, управляемой АТФ, показаны для соединений в Химической библиотеке Прествика. Значения нормализованы для максимальной люминесценции, наблюдаемой в лунках с положительным контролем (гуанидин HCl) в каждом 384-луночном планшете. Лунки отрицательного контроля на каждом планшете включали ДМСО; обратите внимание на низкий уровень люминесценции. Указаны первичные пораженные соединения, которые вызывают нормализованные уровни люминесценции выше порогового значения в 50% от уровней люминесценции положительных контролей.Все соединения тестировали при конечной концентрации 12,5 мкМ.

На первичном скрининге мы идентифицировали 8 соединений, показывающих эффективность ингибирования 30%, и 7 из них, показывающих эффективность 50%, с показателем эффективности 0,7% и 0,5% соответственно. Эти соединения включали гидрохлорид мефлохина, дибукаин, гидрохлорид флуоксетина, дигидрохлорид флупентиксола, гидрохлорид зуклопентиксола, циклогексимид и токсичный растительный алкалоид ликорин гидрохлорид. Флуоксетин был выбран для дальнейшего исследования.Мы также исследовали противовирусную активность норфлуоксетина, основного метаболита флуоксетина, поскольку он присутствует в сыворотке крови в концентрациях, близких к эквимолярным по отношению к флуоксетину во время терапии.

Флуоксетин и норфлуоксетин подавляют репликацию энтеровирусов в установленных терапевтических концентрациях. Используя модификацию нашего скринингового анализа, мы определили клеточную токсичность и противовирусную активность флуоксетина и норфлуоксетина в широком диапазоне концентраций, фланкирующих концентрации в плазме, достигнутые во время хронической терапии по психиатрическим показаниям. (9, 25).Готовили серию 2-кратных разведений, охватывающих диапазон концентраций лекарственного средства от 380 пМ до 200 мкМ, и добавляли в тестовые лунки перед добавлением клеток и CVB3-h4. И флуоксетин, и норфлуоксетин имели ЕС ₅₀ s, равное 2,3 мкМ, и CC ₅₀ , равное 25 мкМ (рис. 2A и B), в результате чего индекс селективности составлял приблизительно 10. Пиковая противовирусная активность обоих соединений была достигнута при концентрации 6,25 мкМ.

Рис. 2

Противовирусная активность флуоксетина и норфлуоксетина. (A) Противовирусные ЕС ₅₀ s для флуоксетина (Fluox) и норфлуоксетина (Norf) определяли путем сравнения жизнеспособности через 48 часов после заражения CVB3 (нормализовано по сравнению с клетками, инфицированными CVB3 в присутствии гуанидина).Анализ, аналогичный первичному анализу HTS, основанный на ATPLite 1-Step, был применен для определения EC ₅₀ и CC ₅₀ соединений. Конечный диапазон концентраций составлял от 0,38 нМ до ~ 200 мкМ (числа рядом с символами представляют концентрации в мкМ), и каждую концентрацию тестировали в трех экземплярах. Средние значения и стандартные отклонения трех повторов показаны в виде символов с полосами ошибок. (B) Подобно определению EC ₅₀ , определения CC ₅₀ для флуоксетина и норфлуоксетина определяли путем определения относительной люминесценции люциферазы неинфицированных клеток HeLa по сравнению с необработанными контрольными лунками (только DMSO).(C) Расчетное значение EC ₅₀ для флуоксетина, как определено с помощью анализа уменьшения бляшек. Клетки в реплицируемых лунках инфицировали CVB3 через 30 мин после добавления флуоксетина в указанных концентрациях. Через 6 часов клетки собирали и определяли титр внутриклеточного вируса с помощью анализа бляшек с лимитирующим разведением. Символы представляют отдельные определения, и показаны два отдельных эксперимента. (D) Снижение вирусного титра обработкой инфицированных клеток флуоксетином и норфлуоксетином.Клетки в реплицируемых лунках инфицировали CVB3 через 30 мин после добавления лекарств в эффективной концентрации 6,25 мкМ. Через 6 часов клетки собирали и определяли титр внутриклеточного вируса с помощью анализа бляшек с лимитирующим разведением. Средние значения и стандартные отклонения трех повторов показаны заштрихованными полосами и полосами ошибок соответственно.

Мы использовали анализ снижения титра вируса, чтобы подтвердить эти результаты. Для количественного определения количества CVB3-h4, продуцируемого клетками HeLa-RW после предварительной обработки флуоксетином и норфлуоксетином перед инфицированием, использовали обычные анализы бляшек при MOI, равном 1.Гуанидин, известный мощный ингибитор репликации энтеровируса (2), использовали в качестве положительного контроля. Флуоксетин подавлял репликацию CVB3 с расчетным значением EC ₅₀ примерно на 2 мкМ (рис. 2C), а флуоксетин и норфлуоксетин снижали титры вирусов более чем на 3 порядка. Флуоксетин и норфлуоксетин также защищали клетки Vero от цитолиза после инфицирования CVB3-h4 (данные не показаны).

Мы добавляли флуоксетин непосредственно к исходным вирусам и инкубировали их в течение 1 часа при 37 ° C, чтобы определить, оказывает ли соединение прямое вирулицидное действие.Инфекционный титр, определенный с помощью анализа бляшек, не изменился при этом воздействии (идентичные результаты в двух отдельных экспериментах; данные не показаны).

Ингибирование накопления вирусной РНК и вирусного белка флуоксетином и норфлуоксетином. Чтобы лучше понять подавление репликации энтеровирусов флуоксетином и норфлуоксетином, мы оценили их глобальное влияние на синтез вирусного белка и РНК. Мы инфицировали клетки с высокой множественностью инфекции CVB3-h4 и собирали общую клеточную РНК и белок через 6 часов.Иммуноблоттинг выявил полное отсутствие детектируемого вирусного белка (рис. 3А). Анализ RT-PCR показал, что оба соединения заметно снижали количество РНК CVB3 в этот момент времени более чем в 1000 раз по сравнению с необработанными клетками (рис. 3B). Эти эффекты были сопоставимы по величине с эффектом гуанидина HCl, который мешает активность вирусного белка 2C, подавляя тем самым образование отрицательной вирусной РНК (2, 33).

Рис. 3

Анализы противовирусной активности. (A) Иммуноблот-определение вирусного капсидного белка через 6 часов после заражения CVB3-h4; вирусный белок не обнаруживается в клетках, обработанных флуоксетином (Fluox) и норфлуоксетином (Norf).Обнаружение иммуноблотом белка глицил-тРНК-синтеазы (GlyRS) (домашнего белка) показано как контроль загрузки. (B) RT-PCR обнаружение РНК CVB3 в клетках, обработанных гуанидином (Guan) или флуоксетином, за 30 минут до инокуляции культур клеток. Символы представляют отдельные определения, и показаны два отдельных эксперимента. (C) Двойной люциферазный анализ Renilla и люциферазы светлячка в клетках, трансфицированных плазмидой, кодирующей бицистронную РНК с люциферазой светлячка, экспрессируемой под контролем IRES CVB3.Значения рядом с столбиками представляют собой средние показания люминесценции дублированных образцов для люциферазы Renilla и люциферазы светлячков, соответственно. Значения ложно-трансфицированных клеток HeLa составляют 0,3 и 0,1 для люциферазы Renilla и люциферазы светлячка соответственно. Показан представитель двух отдельных экспериментов с аналогичными результатами.

Флуоксетин и норфлуоксетин нацелены на раннюю стадию заражения CVB3 после проникновения вируса. Анализ ОТ-ПЦР был использован для определения того, блокируют ли эти два соединения проникновение CVB3 в клетки или трансляцию вирусного генома, поскольку это ключевые начальные шаги в Жизненный цикл энтеровируса (44).Мы обнаружили, что аналогичные количества вирусной РНК первоначально были обнаружены в клетках, предварительно обработанных флуоксетином за 30 минут до заражения, по сравнению с необработанными клетками (рис. 3B). Впоследствии вирусная РНК заметно увеличилась в необработанных клетках, в то время как уровни вирусной РНК оставались довольно постоянными в клетках, обработанных гуанидином или флуоксетином. И флуоксетин, и норфлуоксетин ингибировали репликацию CVB3, даже если они были добавлены через 2 часа после заражения. Аналогичные результаты были получены, когда мы использовали вирус CVB3-h4 в анализе уменьшения бляшек (данные не показаны).

Мы использовали двойную люциферазную репортерную систему, чтобы изучить возможность того, что флуоксетин и норфлуоксетин мешают трансляции вирусного генома РНК под контролем вирусного внутреннего сайта входа в рибосому (IRES). Мы добавляли соединения к клеткам HeLa через 24 часа после трансфекции бицистронной конструкцией, в которой люциферазы Renilla и светлячка экспрессируются с помощью кэп-зависимых и IRES-опосредованных рибосомных механизмов, соответственно. Через 48 ч после трансфекции ни флуоксетин, ни норфлуоксетин не снижали экспрессию люциферазы светлячков (рис.3С). Точно так же относительная экспрессия люциферазы светлячков и люциферазы Renilla в клетках, стабильно трансфицированных этой плазмидной конструкцией, не подвергалась влиянию добавления норфлуоксетина или флуоксетина в культуральную среду (данные не показаны).

Эти данные показывают, что на вход CVB3 и трансляцию вирусной РНК не влияют норфлуоксетин или флуоксетин, и что репликация вируса затрудняется на последующей внутриклеточной стадии репликации вируса. В качестве дополнительного подтверждающего анализа мы инфицировали клетки HeLa-RW CVB3-EGFP и добавляли норфлуоксетин или флуоксетин одновременно с инфекцией или после нее.Оба соединения подавляли экспрессию EGFP в этом рекомбинантном вирусе даже при добавлении через 2 часа после инокуляции (таблица 1).

Таблица 1

Флуоресценция EGFP клеток HeLa, инфицированных CVB3-EGFP

Флуоксетин и норфлуоксетин обладают противовирусной активностью в отношении других вирусов Коксаки группы В. Чтобы подтвердить, что противовирусная активность флуоксетина не ограничивается штаммом CVB3, используемым в нашем скрининговом анализе, мы провели анализы снижения титра вируса с использованием дополнительных изолятов вируса Коксаки B (B1, B2 и B3), включая два штамма, которые известны как миокардитные у людей.Флуоксетин последовательно снижал количество вируса, продуцируемого после инфицирования клеток, на 3–4 порядка величины (рис. 4).

Рис. 4

Флуоксетин подавляет репликацию клинических изолятов вирусов Коксаки от B1 до B3. Клетки HeLa-RW инфицировали клиническими изолятами трех серотипов вирусов Коксаки при множественности инфицирования приблизительно 1 с предварительной обработкой или без нее за 30 минут до 6 мкМ флуоксетина (Fluox). Через 6 ч клетки собирали и определяли титр внутриклеточного вируса с помощью анализа бляшек с лимитирующим разведением.Средние значения трех определений показаны на гистограмме, а стандартные отклонения показаны в виде столбцов ошибок.

ОБСУЖДЕНИЕ

Мы использовали подход молекулярного скрининга для поиска низкомолекулярных ингибиторов энтеровирусов. В первичном скрининге мы использовали низкий MOI 0,007 для инфекции и 48-часовой инкубационный период, отдавая предпочтение соединениям с низкой токсичностью и умеренной или низкой противовирусной активностью. Из 1120 соединений в Химической библиотеке Прествика семь [ликорин гидрохлорид, дибукаин, мефлохина гидрохлорид, флупентиксол дигидрохлорид цис — ( Z ), цуклопентиксол гидрохлорид, циклогексимид и флуоксетин гидрохлорид ингибируют по меньшей мере 50% -ное действие цис-гидрохлорида]. в нашем скрининговом анализе.

Ликорина гидрохлорид, растительный алкалоид, ранее было показано, что он ингибирует репликацию полиовируса in vitro (17, 43), но, как известно, является высокотоксичным для клеток млекопитающих. Известно также, что циклогексимид подавляет репликацию полиовируса, но является мощным ингибитором клеточной трансляции (40). Дибукаин и мефлохин являются производными хинолона. Дибукаин (также известный как цинхокаин) является мощным ингибитором холинэстеразы плазмы и в настоящее время используется в качестве обезболивающего крема для местного применения для облегчения боли, связанной с геморроем, в то время как мефлохин является широко используемым противомалярийным препаратом.Дигидрохлорид флупентиксола (также известный как флупентиксол) и гидрохлорид зуклопентиксола являются близкородственными тиоксантеновыми антипсихотическими препаратами, которые действуют как антагонисты рецепторов допамина, серотонина, адреналина и гистамина. Несмотря на то, что эти нейролептики эффективны в качестве нейролептиков, хроническое использование этих нейролептиков сопряжено с риском дискразий крови и антипирамидных побочных эффектов. Флуоксетин классифицируется как селективный ингибитор захвата серотонина, хотя он также взаимодействует с мембранными рецепторами других нейромедиаторов.Флуоксетин одобрен Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США для лечения большого депрессивного расстройства, обсессивно-компульсивного расстройства, нервной булимии и панического расстройства, и его профиль безопасности при длительном применении хорошо известен.

Мы применили четыре отдельных вторичных скрининговых анализа для подтверждения противовирусной активности флуоксетина и норфлуоксетина. В частности, наши данные продемонстрировали, что как флуоксетин, так и его метаболит норфлуоксетин заметно снижали репликацию вирусного генома и полностью блокировали синтез вирусного белка.Репликация вируса оказалась полностью исключенной в анализе, основанном на обнаружении экспрессии зеленого флуоресцентного белка из рекомбинантного варианта CVB3 (CVB3-EGFP). Наиболее важно то, что продукция инфекционных вирионов CVB3, обнаруженная с помощью анализов бляшек, была снижена примерно на 4 порядка. Эта противовирусная активность также наблюдалась у трех других штаммов вируса Коксаки B, включая штамм CVB1, выделенный во время общенациональной вспышки случаев заболевания новорожденных в 2007 году (42), и вариант миокардита CVB3, выделенный у ребенка со смертельным миокардитом (21).Следует отметить, что флуоксетин и его in vivo метаболит норфлуоксетин достигли EC ₅₀ с, сравнимых с концентрациями в сыворотке, достигнутыми при стационарном дозировании флуоксетина. В частности, Chouinard измерил средние стационарные концентрации в сыворотке 1,6 мкМ и 1,0 мкМ во время хронической терапии депрессии (9). Принимая во внимание очень длительные периоды полураспада флуоксетина (от 1 до 3 дней) и норфлуоксетина (от 7 до 15 дней) в устойчивом состоянии (25), ингибирующие концентрации обоих соединений, вероятно, будут присутствовать в течение всего интервала дозирования.

Механизм противовирусной активности флуоксетина неясен. Соединение ( RS ) — N -метил-3-фенил-3- [4- (трифторметил) фенокси] пропан-1-амин) не имеет структурной гомологии с другими известными ингибиторами энтеровирусов или родов в пределах пикорнавирусов. семья (12, 37). Можно предположить, что флуоксетин и норфлуоксетин могут блокировать проникновение вируса, основываясь на их взаимодействии с рецепторами, связанными с G-белком клеточной поверхности, для дофамина, серотонина и других нейротрансмиттеров (3).Однако RT-PCR обнаружение вирусной РНК и эксперименты по времени добавления показали, что соединение не препятствовало проникновению вируса, что указывает на внутриклеточный сайт действия. В настоящее время основа противовирусных эффектов флуоксетина остается неясной, хотя было показано, что он влияет на транскрипцию широкого спектра клеточных генов и изменяет уровни микроРНК (23, 28).

Самой ранней отдельной стадией после проникновения вируса является IRES-опосредованная трансляция одного полипротеина из вирусного генома.Флуоксетин не препятствовал трансляции бицистронной мРНК, что позволяет предположить, что могут быть затронуты последующие этапы жизненного цикла пикорнавируса, включая перестройку клеточных мембран вирусными белками 2BC или 3A или синтез вирусной РНК путем ингибирования активности NTPase / геликазы. белка 2C (2), среди других возможностей.

Наше исследование имеет несколько ограничений, включая наше исследование только ограниченного подмножества энтеровирусов. Хотя вирусы Коксаки B1, B2 и B3 составляют 11% всех энтеровирусов, обнаруженных на сайтах Национальной системы эпиднадзора за энтеровирусами в период с 1970 по 2005 гг. (19), и 25% всех серотипов, зарегистрированных в период с 2006 по 2008 гг. (7), они представители рода энтеровируса человека B (HEV-B); Для определения истинной широты противовирусной активности флуоксетина потребуются дополнительные исследования.

Более того, попытки «перепрофилировать» флуоксетин в качестве противовирусного средства могут быть ограничены неневрологическими эффектами его ингибирования захвата серотонина и фармакологическими эффектами, не соответствующими мишени. Селективные ингибиторы захвата серотонина также были связаны с повышенным риском кровотечения при приеме с ингибиторами функции тромбоцитов, вероятно, из-за участия серотонина в активации тромбоцитов (1, 11, 22). Это может оказаться помехой, поскольку энтеровирусные инфекции связаны с кровотечением, особенно у новорожденных.Флуоксетин также связан с биохимическими активностями, помимо ингибирования захвата серотонина, включая противовоспалительные эффекты и ингибирование высвобождения цитокинов в ответ на стимуляцию Toll-подобных рецепторов (35). К счастью, сообщений об обострении вирусных инфекций при одновременном приеме флуоксетина, который часто применяется у людей с ВИЧ-инфекцией, нет (15, 18).

В заключение, эти исследования выявили неожиданную противовирусную активность широко применяемого лекарственного средства флуоксетина и его основного метаболита, норфлуоксетина.Понимание их механизмов действия против вирусов Коксаки расширит наше понимание репликации энтеровирусов и приведет к оценке их потенциальной клинической применимости для лечения серьезных энтеровирусных инфекций.

БЛАГОДАРНОСТИ

Работа поддержана грантами Детского фонда «Сегодня и завтра» и Программы нанопедиатрии Департамента педиатрии Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе.

Мы благодарим Винни Вонг и Чонсан Ли за ценную техническую помощь и благодарим Лауру Шихан за помощь в подготовке рукописи.

FOOTNOTES

• Получено 14 мая 2012 г.
• Возвращено для модификации 6 июня 2012 г.
• Принято 22 июня 2012 г.
• Принято рукопись размещена в Интернете 2 июля 2012 г.

• Авторское право © 2012, Американское общество Микробиология.

  No related posts.