Мембрана prf: PRF-мембраны для быстрого заживления в Одинцово и Звенигороде

Содержание

Что же из себя представляют PRF-материалы

С каждым годом в нашу профессиональную среду внедряются все более совершенные и качественные продукты, которые заметно улучшают процесс и исход стоматологического лечения. Одним их таких новшеств, используемых в нашей клинике, является центрифуга, с помощью которого мы имеем возможность изготовить в специальных пробирках A-PRF и i-PRF.

Что же из себя представляют PRF-материалы?

PRF — platelet-rich fibrin, или фибрин обогащенный тромбоцитами — терапевтическая методика, повышающая эффективность оперативного вмешательства, облегчающая послеоперационный и реабилитационный период.

В чем особенность этой методики?

Препарат богат клетками крови и факторами роста, которые способствуют успешному восстановлению твердой и мягкой тканей человека и, таким образом, происходит стимуляция заживления операционной раны. Стоит отметить то, что препарат не вызывает аллергических реакций, потому что материал является аутогенным, то есть принадлежит непосредственно тому пациенту, которому будет применена данная методика.

Каким образом получают PRF-материалы?

Чтобы получить материал, необходимо произвести забор крови пациента из вены. Процедура схожа с обычным забором крови для сдачи анализов. Кровь собирают в пробирку прямо в стоматологическом кресле и далее помещают в специальный аппарат-центрифугу, в которой происходит образование A-PRF (мембрана) или I-PRF (фибриновый клей). Чтобы получить тот или иной вид материала, врач заранее задает необходимые параметры на аппарате.

A-PRF-advanced platelet rich fibrin или улучшенный вид PRF — представляет из себя сгусток-мембрану, которую после центрифугирования помещают в подготовительный бокс, чтобы получить средство для регенерации заданной толщины, безопасное для здоровья, которое легко обрабатывать, ушивать и разрезать.

I-PRF-injectable platelet rich fibrin или инъекционный вид PRF — тягучая жидкость (фибриновый клей), используемая при костных пластиках для «склеивания» костного материала и образования единого конгломерата.

Основной эффект этих материалов — стимуляция роста кровеносных сосудов. Именно поэтому сфера применения достаточно обширна, потому что в любой манипуляции важно обеспечить должное питание зоны вмешательства.

Каковы показания применения PRF-материалов:

  • имплантация
  • синус-лифтинг
  • лечение пародонтита и пародонтальных дефектов
  • при пластике мягких тканей как соединительнотканный трансплантат, например закрытие рецессий десны (оголения корня зуба)
  • при костнопластических операциях
  • после удаления зубов (заживление ран, лунок), чтобы иметь возможность сохранить объем, высоту и форму кости
  • профилактика и лечение альвеолитов

Каковы противопоказания:

  • инфекционные заболевания (гепатиты, ВИЧ)
  • проблемы обмена веществ
  • сахарный диабет
  • непереносимость антикоагулянта
  • опухолевые новообразования

Применение PRF-мембран — «Фортуна»

ЦЕНЫ НА ХИРУРГИЧЕСКУЮ СТОМАТОЛОГИЮ

Еще совсем недавно, после хирургического вмешательства, например, удаления зубов «мудрости», синус-лифтинга или лоскутной операции, пациента ждал долгий и неприятный период реабилитации. Однако, современный уровень развития медицины (применение PRF-мембран) уже сегодня позволяет заметно сокращать срок восстановительного периода после различных хирургических вмешательств.

PRF (ПРФ)-мембраны способствуют быстрому заживлению и восстановлению после хирургического лечения.

В нашей стоматологической клинике (рядом с Петропавловским храмом, недалеко от станции метро Киевская) с успехом применяется новая технология, целью которой является ускорение темпов восстановления тканей и снижение болезненных ощущений – A-PRF или создание биосовместимой PRF-мембраны.

Что такое PRF-мембрана?

PRF – это богатый тромбоцитами фибрин (волокно). Его специальным образом получают из концентрата тромбоцитов крови самого пациента. На этапе обследования кровь пациента отбирается в пробирку из периферической вены (как при обычном анализе) и помещается в центрифугу, где и происходит её разделение на  эритроциты, сгусток PRF (фибриновый сгусток) и свободную от тромбоцитов плазму.

Фибриновая мембрана имеет высокий потенциал к стимуляции роста костной и мягких тканей пациента, так как богата лейкоцитами и факторами роста клеток, выстилающих стенки сосудов.  Благодаря этому, использование PRF-мембраны стало настоящим прорывом в хирургической стоматологии.

Применение PRF-мембран в хирургической стоматологии:

  1. После обычного и сложного удаления зубов. На месте удаленного зуба образовывается лунка и поэтому для быстрого её заживления накладывают PRF-мембрану. Факторы роста, содержащиеся в PRF-мембране напрямую влияют на скорость заживление раны, рубцевание и образование минерализованных тканей, а послеоперационный период проходит безболезненно.
  2. При синус-лифтинге перед имплантацией. PRF-мембрана позволяет ускорить процесс остеоинтерграции. Также мембрана служит дополнительной мерой защиты, позволяющей обеспечить оптимальные условия для полной регенерации костной ткани.
  3. При имплантации. PRF-мембрана покрывает костную ткань вокруг имплантов, способствует более быстрому и надежному приживлению конструкции.
  4. В пародонтологии – при лечении рецессии десны, при лоскутных операциях, при наращивании десны. PRF-мембрана способствует быстрому заживлению и восстановлению мягких тканей.

Основные преимущества использования PRF-мембран:

  • уменьшается отечность;
  • сводятся к минимуму болезненные ощущения;
  • снижается вероятность возникновения воспалительных процессов;
  • сокращается общая  длительность реабилитационного периода, что доказано клинически.

В нашей клинике технология A-PRF применяется опытными стоматологами-хирургами, которые прошли специальное обучение и знают все нюансы работы с PRF-мембранами.

Приходите! Будем рады сделать Ваше лечение более совершенным и комфортным!

Виды услуг Грн
Удаление зуба обычное 350 — 550
Удаление зуба «мудрости» от 800
Сложное удаление зуба, ретинированного 1700 — 3000
Удаление зачатков 8 зубов (1 зуб) 2700
Вскрытие абсцесса, дренирование 500
Пластика уздечки губы 1500
Пластика уздечки языка 1700
Лоскутная операция в области 1 зуба 700
Гингивэктомия в области 1 зуба 250
Вестибулопластика 3000
Пластика губы  местными тканями 15000
Пластика неба  местными тканями 15000
Ревизия гайморовой пазухи 6500
Синус-лифтинг 1 стороны 10000
Удаление кисты (одонтогенной, фолликулярной, радикулярной и д.р.) от 2500

Навигация по записям

Использование мембран из плазмы крови пациента при наращивании костной ткани челюсти

 

Плазма крови пациента достаточно широко используется в медицине. При помощи специального оборудования (центрифуги) кровь делится на фракции или составляющие: непосредственно плазму – жидкость, которая имеет желтоватый цвет и содержит большое количество фибрина; фибриновый сгусток, обогащенный тромбоцитами. И еще одна часть, самая густая – это смесь лейкоцитов и эритроцитов. Именно плазма, а также фибриновый сгусток активно применяются в стоматологии.

Данная технология называется PRF (Platelet Rich Fibrin), что переводится именно как «тромбоцитарный фибрин» или фибрин, обогащенный тромбоцитами. Фибрин – это белок, который отвечает за закупоривание сосудов при повреждении. Тромбоциты – клетки, отвечающие за заживление ран и ускорение роста клеток. Таким образом, мембраны, созданные из плазмы крови пациента с содержанием фибрина и тромбоцитов, позволяют заметно ускорить регенерацию клеток и тканей при различных хирургических вмешательствах.

Эта технология применяется в Европе и США уже более 30 лет. Но в России считается инновационной. Применение плазмы крови – это эффективное дополнение при имплантации, удалении зубов, хирургической пластике десен, а также в совокупности с подсадкой искусственных заменителей костной ткани.

Показания
  • ускорение заживления тканей при проведении синус-лифтинга или при подсадке костных блоков,
  • пластика слизистых полости рта, лечение пародонтита и пародонтоза,
  • активация роста клеток костной ткани после удаления зубов,
  • установка имплантов и одновременное наращивание кости,
  • проведение различных хирургических операций.
Противопоказания
  • злокачественные образования,
  • системные заболевания крови, которые не позволяют провести выделение тромбоцитарной плазмы, либо ее применение будет не эффективно,
  • острые нарушения иммунитета, инфекционные заболевания в острой стадии,
  • антибактериальная терапия,
  • психические отклонения.

Преимущества использования плазмы крови

Применение PRF-мембран позволяет провести естественную стимуляцию роста клеток челюстной кости или тканей пародонта, что заметно ускоряет процессы их роста. Реабилитация и приживление имплантов или костного материала происходит быстрее, а риски воспалительных процессов значительно снижаются.

Использование плазмы крови положительно влияет на следующие процессы:

  • ускорение роста клеток костной ткани после вживления имплантов,
  • отсутствие аллергических реакций, которые могут возникнуть при использовании искусственных материалов,
  • быстрое заживление мягких слизистых после установки дентальных имплантов или проведения пластических операций,
  • профилактика риска периимплантита после установки имплантатов,
  • уменьшение отека тканей, снижение болезненности после проведения любых хирургических вмешательств,
  • быстрое восстановление тканей после удаления зуба,
  • уменьшение воспаления при проведении кюретажа десен и прочищении десневых карманов.

Мнение эксперта

Намдаков Николай Владимирович Челюстно-лицевой хирург, имплантолог, ортопед
Стаж работы 17+
«Специалисты нашей клиники в течение многих лет активно используют в работе данную технологию – прошли необходимое обучение и знают гематологию, понимают механизмы свертывания крови. Поэтому трудностей в работе с данным оборудованием у нас не возникает. У каждого человека свои особенности как организма, так и кровеносной системы, поэтому мы используем строго индивидуальный подход даже в таком вопросе, как получение PRF-мембран».

Технология проведения и особенности подготовки

Подготовка к проведению процедуры не имеет каких-то специфических особенностей. Самое главное – исключить накануне жирную и острую пищу, алкоголь. Желательно также хорошо выспаться. Забор крови не проводится на фоне приема антибактериальных препаратов – необходимо дождаться окончания терапии.

Процедура занимает немного времени и проводится следующим образом:

  1. проводится забор крови из вены непосредственно в клинике,
  2. пробирки помещаются в центрифугу. Выделение фракций занимает от 10-15 минут до получаса или даже 40 минут (зависит от пациента, поскольку скорость оседания тромбоцитов у каждого человека разная),
  3. из пробирки забирается густая плазма – такую мембрану можно разрезать, ушивать, использоваться в различных техниках. Она размещается в необходимом количестве во время проведения хирургических операций.

Готовые мембраны хранятся в течение максимум 4 часов, поэтому забор крови и ее обработка проводятся непосредственно в день установки имплантов или проведения других хирургических вмешательств.

Недостатки методики

Методика не имеет недостатков. Единственное, что можно выделить – это увеличение стоимости. Тем не менее, мембраны очень эффективны, делают процесс хирургических вмешательств более комфортным для пациента и снижают риски послеоперационных осложнений. А в ряде ситуаций использование данной технологии обходится даже дешевле, чем проведение классической костной пластики.

При проведении костной пластики с использованием мембран, полученных из плазмы крови, в клинике Smile-at-Once также применяются специальные активаторы роста (PrefGel и Emdogein от компании Straumann), которые обеспечивают очищение полости и дополнительную стимуляцию роста костной и десневой ткани, что необходимо для ускорения процесса приживления имплантатов, особенно при применении методов одноэтапной имплантации с немедленной нагрузкой.


1 Толстов Д.А., Богдан В.Г. Тромбоцитарные концентраты: классификация, технологии получения, биологические эффекты, 2012.

Методика I-PRF

A-PRF и I-PRF — это методика, при помощи которой получают тромбоциты с высоким содержанием фибрина (фибриновой пленки)

Биологическая мембрана

A-PRF и I-PRF-это методика, при помощи которой получают тромбоциты с высоким содержанием фибрина (фибриновой пленки)

Тромбоциты— это форменные элементы крови, маленькие кровяные пластинки, которые образуются в красном костном мозге. Если тромбоцит соприкасается с поверхностью, отличающейся от эндотелия (внутренняя поверхность сосудов), у него появляется до 10 отростков, которые в 5–10 раз превышают размер самого тромбоцита. Таким образом, клетки «закрывают» раны и останавливают кровотечение.

Именно тромбоциты инициируют клеточное деление и содержат факторы роста(белковые молекулы, регулирующие деление и выживание клеток).
Фибрин— это высокомолекулярный белок, который играют важнейшую роль в предотвращении воспалительного процесса. Он защищает организм от распространения болезнетворных агентов и токсинов, т.е. не даёт воспалению распространиться.

Наиболее часто задаваемые пациентами вопросы
Для чего нужна данная технология (показания)?
I-PRF — биологическая мембрана, которая снижает риски постоперационных осложнений и используется:
-при костной пластике
-при закрытии перфораций (открытый синус-лифтинг)
-при пластике мягких тканей
-для сохранения костной ткани в лунках после удаления зубов
-для профилактики альвеолита
-для существенного снижения себестоимости костной пластики.

Самое важное- I-PRF позволяет заменить любые искусственные мембраны и получить биосовместимую мембрану с очень низкой себестоимостью
Данный метод способствует быстрому заживлению и восстановлению прооперированного участка, образованию новых кровеносных сосудов, необходимых для приживления костного трансплантата. I-PRF используют в косметологии, стоматологии, хирургии!

Безопасна ли данная технология для организма?
Абсолютно безопасна
Для получения фибриновой пленки используется кровь самого пациента. Т.е. ее восстанавливающие свойства увеличиваются. Важно, что данная технология прошла многочисленные исследования, многократные апробации и признана официально.

Какие преимущества у PRF технологии?
-полная безопасность
-значительное сокращение сроков заживления после хирургического вмешательства
-значительное ускорение сроков имплантации
-аллергические реакции полностью исключены
-полная естественность процесса получения фибриновой пленки, т.к. она получается из крови самого пациента
-безболезненность проведения процедуры
-отсутствие противопоказаний к проведению манипуляции

PRF (PRP) заметно повышает уровень комфорта стоматологического лечения: сокращает сроки заживления и тем самым минимизирует связанные с этим болезненные, дискомфортные ощущения.Иными словами, болит теперь недолго

PRF в стоматологии

Сегодня при проведении ряда хирургических манипуляций – синус-лифтинге, скуловой имплантации, сложном удалении зубов – используется технология ускоренного восстановления кости и слизистой с помощью биосовместимых фибриновых мембран. Данные мембраны получают из компонентов венозной крови пациента в соответствии с протоколом.

Что такое PRF

Технология PRF представляет собой закрытие оголенной кости челюсти фибриновым сгустком с целью профилактики развития воспалительной реакции и ускорения процессов заживления. В результате мы имеем восстановление слизистой и костной ткани спустя два-четыре месяца.

PRF (Platelet rich fibrin) — это богатый тромбоцитами фибрин, получаемый из крови пациента непосредственно перед проведением операции.

Тромбоциты – это элементы крови, которые осуществляют гемостатическую функцию, а также запускают процессы восстановления тканей. Фибрин является белком, который образуется из фибриногена под действием фермента тромбина; конечный продукт свертывания крови.

Для того, чтобы изготовить фибрин согласно технологическому процессу, венозную кровь забирают в стерильную вакуумную пробирку. Далее кровь помещается в центрифугу, в результате чего образуются жидкая эритроцитарная и твердая фибриновая фракция.

PRF – это отработанная и проверенная временем технология, эффективность которой доказана множеством клинических исследований по всему миру. Приоритетное направление применения – стимуляция роста тканей и ускорение регенерации после стоматологических хирургических методик.

К преимуществам технологии PRF относят:

  • сокращение сроков восстановления после удаления зубов и кист, проведения синус-лифтинга, костной пластики;
  • улучшение приживаемости после проведения скуловой имплантации;
  • профилактика развития воспалительной реакции в послеоперационной ране;
  • полное исключение любых проявлений аллергии;
  • натуральность мембраны, обусловленная получением из собственной крови пациента, исключение отторжения организмом.

Беременность и период лактации не являются противопоказаниями к применению PRF. Все решается индивидуально на консультативном приеме.

Методики PRF

Специалисты DENTISTRY в своей практической деятельности успешно применяют обе технологии PRF. Выбор той или иной методики зависит от клинической ситуации.

Первая методика маркируется аббревиатурой A-PRF («А» — advanced – улучшенный). В этом случае используется застывший сгусток фибрина, полученного в стеклянной пробирке в результате центрифугирования в течение 8-10 минут. В ходе операции в область раны закладывается сгусток фибрина и только потом накладываются швы. В итоге удается избежать осложнений, кроме того, стимулируется регенерация костной ткани. Технология A-PRF предотвращает развитие атрофических процессов, в связи с чем допускается проведение имплантации спустя 1,5-2 месяца. В частности, с помощью технологии A-PRF удается добиться сохранения альвеолярной лунки – области челюсти, в которой размещается зуб.

Методика A-PRF применяется не только в ходе операции удаления зубов. Технология успешно зарекомендовала себя при проведении имплантации, синус-лифтинга и аугументации кости, а также в хирургической пародонтологии. Используемый фибриновый сгусток является связующим материалом, ускоряющим остеоинтеграцию и заживление. Кроме того, он способствует уменьшению воспаления и росту сосудов.

Другая технология – инъекционная, i-PRF. Забор крови производится в пластиковую пробирку, в которой после 2-3 минут в центрифуге образуется фракция незастывшего жидкого фибрина. Готовый к использованию фибрин является абсолютно чистым и гипоаллергенным.

Жидкий фибрин шприцом извлекают из пробирки и используют в ходе операции. Введение незастывшего фибрина в поврежденные ткани стимулирует сосудистый рост. В нашей клинике технология i-PRF применяется перед проведением имплантации или пластики десны.

Таким образом, достоинства технология PRF – это простота, экономичность и безопасность.

Плазмотерапия с помощью мембран A-PRF — Стоматологический Центр «FREEDENTS»

Метод A-PRF — это применение богатой тромбоцитами плазмы крови пациента в виде мембран.
С помощью аппарата PRF (Platelet Rich Fibrin)  изготавливаются мембраны A-PRF (фибрин обогащённый тромбоцитами  А — повышенного типа) , насыщенные факторами роста .
Метод применяется в хирургической стоматологии , хирургической пародонтологии , имплантологии, костной пластике и челюстно-лицевой хирургии.

 

Когда показано применение мембран A-PRF :
-при пародонтите тяжёлой степени
-при подвижности зубов
-при альвеолите
-при лечении периимплантита
-в лунку удаленного зуба для быстрого заживления
-при имплантация зубов для улучшения приживаемости имплантата
-при костной пластике
-при операции синус-лифтинг
-при проведении операции остеосинтез.

Противопоказания:
-злокачественные новообразования
-системные заболевания крови
-психические заболевания

Что происходит после процедуры:
-снижение подвижности зубов
-устранение неприятного запаха изо рта
-ускорение заживления лунок удаленных зубов
-купирование боли
-снижается риск отторжения имплантатов
-улучшается приживляемость имплантатов
-ускоряется восстановление костной ткани
-стимулируется регенерация тканей и т .д

После применения мембран плазмы  происходит стимуляция клеток роста , в итоге улучшается кровоток, тканевое дыхание и обменные процессы в тканях введения, стимулируется прорастание новых капилляров, формируется коллаген и происходит укрепление костной ткани, снижается воспалительный процесс.

Как проводится:

1. Проводится забор крови из вены пациента в специальные пробирки , затем они сразу помещаются в центрифугу и  в течение нескольких  минут происходит мягкое отделение плазмы от других элементов крови и насыщение плазмы тромбоцитами, без добавления других каких-либо химических ингридиентов .

В итоге мы получаем готовую и безопасную плазму из собственной крови пациента, богатую факторами роста  в виде мембран .

2. Затем мембраны вносятся в необходимые участки и ткани .

Рекомендации накануне приёма :

Накануне перед процедурой нельзя принимать антибиотики, алкоголь, жирную и жареную пищу, строго исключить стрессы и желательно хорошо выспаться  — тогда мы получим плазму из вашей крови высокого качества .

 

Применение PRF-мембран и I-PRF-мембран — Стоматология Народная

Наверняка, те, кто сталкивался с удалением зубов «мудрости» или с проведением лоскутной операцией, знают, что после проведения подобных хирургических вмешательств, всегда следует долгий и крайне неприятный период реабилитации. Но благодаря современным технологиям в медицине период восстановления тканей существенно сократился. Новая технология на основе PRF и I-PRF-мембран позволяет сократить реабилитационный периода к минимуму. Такая технология является абсолютно безопасной, поскольку проводится она с использованием плазмы, полученной из вашей крови. Подобный подход уже довольно продолжительное время пользуется несменной популярностью у лучших мировых стоматологов. Например, применение мембран в восстановительном процессе активно практикуется хирургами в Европе и США уже более 35 лет и считается стандартной при проведении любых операций. У нас же применение PRF и I-PRF мембран считается инновационным подходом. Пациенты, которые уже успели опробовать метод, остались довольны результатом.

Применение тромбоцитарных мембран не является полноценной заменой костной пластике. Но они довольно активно используются в качестве дополнения синус-лифтингу, пересадке костных блоков и т.д. Применения PRF и I-PRF мембран – это эффективный и безопасный метод защиты после проведения операций и в период реабилитации. А все благодаря тромбоцитам которые активируют регенерацию клеток и тканей.

Плазма, полученная непосредственно из крови самого пациента имеет широкое применение. Как же её получают? Все очень просто: собранную из вены кровь помещают в центрифугу, после чего она делится на три основные части: плазму, сгусток фибрина и смесь лейкоцитов и эритроцитов.

Для стоматологической хирургии применяются именно плазма и фибриновый сгусток, так как в ней содержится все необходимые элементы для ускоренного заживления поврежденных тканей.

PRF – это аббревиатура от Platelet Rich Fibrin, что дословно переводится как фибрин (белок), обогащенный тромбоцитами. У вас, наверняка, возник вопрос, что же такое этот фибрин? Это белок, который находится в плазме каждого из нас, благодаря нему происходит закупорка и сосудов в случае их механического повреждения (прокола или пореза). А тромбоциты – это клетки, которые отвечают за заживление любых ран и ускоренную регенерацию тканей. Таким образом, PRF-мембраны, созданные непосредственно из плазмы самого пациента, помогают заметно ускорить процессы регенерации клеток и тканей, после проведения различных хирургических вмешательств. Плюс, это на 100% безопасная процедура, поскольку мембрана производится из собственной крови пациента, поэтому и отторжение попросту невозможно.

Показания

• Ускоренная регенерации тканей в процессе проведения синус-лифтинга или посадки костных блоков;

• Установка имплантов;

• Проведение пластики слизистой рта;

• PRF-мембраны применяются во время лечения пародонтита или пародонтоза;

• Ускорение восстановление тканей и даже клеток после удаления зуба;

• Восстановительный процесс после любых операций.

Противопоказания

• Любые злокачественные образования на слизистой оболочке;

• Заболевания крови, из-за которых будет невозможно выделить тромбоциты и плазму, либо их применение не принесет никакого эффекта;

• Сильные нарушения иммунитета;

• Любые инфекционные заболевания, особенно в острой форме;

• Любые психические отклонения, которые могут мешать проведению процедуры.

Преимущества применения плазмы из крови пациента

С того момента как в стоматологии начали применять PRF-мембраны, у хирургов появилась возможность проводить по-настоящему естественное и безопасное восстановление клеток челюстной кости или даже тканей парадонта. Также многие пациенты отмечают, что реабилитационный период и приживление имплантатов происходит значительно быстрее, а возможность появления воспалительных процессов практически ровна нулю.

Применение плазмы из крови человека оказывает следующие положительные эффекты:

• Ускоряет рост костной ткани после вживления имплантата;

• Предотвращает возможность проявления любой аллергической реакции, а это довольно распространенная проблема в случае с применением синтетических материалов;

• Скорость регенерации слизистой после установки дентальных имплантов увеличивается в разы;

• Минимизация риска возникновения переимплатита после установки имплантов;

• Значительное снижение отечности тканей;

• Заметное уменьшение болевых ощущений после операций любых сложностей;

• Высокая скорость заживления тканей, после удаления зубов;

• Заметное уменьшение воспалительных процессов.

Суть проведения процедуры и особенности подготовки пациента к ней

Выделить что-то особенное в процессе подготовки к данной процедуре нельзя. Главное требование к пациенту – за несколько дней до операции отказаться от острой и жирной пищи, а также алкогольных напитков. Плюс, необходимо хорошо выспаться – отменное самочувствие ключ к удачному проведению процедуры. ВАЖНО! Врач не сможет взять у вас кровь если в данный момент вы принимаете антибактериальные препараты.

Сама процедура длится недолго:

• У пациента проводиться забор крови из вены;

• Пробирку с кровью помещают в центрифуг. Далее происходит разделение фракций, это может занять от 10 до 30 минут, в некоторых случаях до 40 минут. Это обусловлено тем, что каждый человек имеет разную концентрацию тромбоцитов;

• Далее изымается плазма, которую в дальнейшем можно резать и ушивать. Во время операционного вмешательства такая мембрана наносится непосредственно на поверхность поврежденных тканей.

Готовая мембрана может храниться не более 4-х часов после ее извлечения из пробирки, поэтому забор крови в обязательном порядке проводиться непосредственно день в день с запланированным хирургических вмешательством.

404 — Страница не найдена — Implant Practice US

CE Вебинар Основная информация:

Каждый часовой виртуальный веб-семинар, модерируемый MedMark Media, приравнивается к одному зачету непрерывного образования (CE). Кредит доступен всем, кто зарегистрировался на веб-семинар и успешно прошел викторину из десяти вопросов через онлайн-систему нашего издания.

Зарегистрированные лица могут присутствовать на веб-семинаре в прямом эфире в указанную дату и время, используя ссылку для присоединения GoToWebinar, предоставленную по электронной почте с любого устройства с подключением к Интернету.Для лучшего просмотра презентации рекомендуется использовать ноутбук или настольный компьютер. Если вы используете мобильный телефон или планшет, мы рекомендуем использовать приложение GoToWebinar вместо веб-браузера, чтобы упростить использование платформы веб-семинара. Регистранты также будут иметь доступ к просмотру воспроизведения в удобное для них время по ссылке, отправленной им по электронной почте в течение 24 часов после указанной даты и времени прямой трансляции, которые размещены на веб-сайте нашей публикации.

Если зарегистрировавшиеся хотят задать вопрос или получить дальнейшие разъяснения, они могут ввести свои вопросы или комментарии в поле для вопросов системы вебинаров.Модератор несколько раз напоминает участникам до и после презентации использовать поле для вопросов. Вопросы задаются в конце презентации не менее десяти минут. Если возникают какие-либо вопросы, на которые невозможно ответить в отведенное время, мы передаем вопрос вместе с адресом электронной почты регистранта докладчику, чтобы он ответил напрямую.

Регистрантам необходимо будет либо войти в систему (предыдущий участник вебинара), либо зарегистрироваться (участник первого вебинара) в нашей системе викторин CE на веб-сайте нашей публикации.Пользователи, зарегистрировавшиеся на всех вебинарах CE, могут использовать этот аккаунт бесплатно. Викторина из десяти вопросов связана на странице воспроизведения под видео, а также доступна непосредственно через панель управления CE после входа в систему.

После успешного завершения викторины появляется кнопка для загрузки сертификата в формате PDF. Копия сертификата CE также отправляется по электронной почте на адрес, указанный в учетной записи CE. Чтобы обеспечить доставку электронных писем о кредитах CE, пожалуйста:

  • Проверьте папку со спамом / нежелательной почтой в своей учетной записи электронной почты.
  • Укажите subsc[email protected] в своей почтовой платформе.

Если у регистранта возникают проблемы с доступом к онлайн-семинару, воспроизведению, тесту CE или сертификату, мы можем помочь по электронной почте, в чате и по телефону. Мы можем предоставить простые шаги со снимками экрана о том, как перейти к викторинам вебинара CE и пройти их.

Заявление об отказе от ответственности: срок действия веб-семинара истекает через 2 года с даты начала проведения. Провайдер CE проявляет разумную осторожность при выборе и предоставлении точного контента.Однако предоставленный CE не выполняет независимую проверку содержания или материалов. Любое мнение, выраженное в материалах, принадлежит докладчику, а не поставщику CE. Учебные материалы предназначены для дополнения, но не заменяют знания, навыки, опыт и суждения квалифицированного специалиста в области здравоохранения.

404 — Страница не найдена — Implant Practice US

CE Вебинар Основная информация:

Каждый часовой виртуальный веб-семинар, модерируемый MedMark Media, приравнивается к одному зачету непрерывного образования (CE).Кредит доступен всем, кто зарегистрировался на веб-семинар и успешно прошел викторину из десяти вопросов через онлайн-систему нашего издания.

Зарегистрированные лица могут присутствовать на веб-семинаре в прямом эфире в указанную дату и время, используя ссылку для присоединения GoToWebinar, предоставленную по электронной почте с любого устройства с подключением к Интернету. Для лучшего просмотра презентации рекомендуется использовать ноутбук или настольный компьютер. Если вы используете мобильный телефон или планшет, мы рекомендуем использовать приложение GoToWebinar вместо веб-браузера, чтобы упростить использование платформы веб-семинара.Регистранты также будут иметь доступ к просмотру воспроизведения в удобное для них время по ссылке, отправленной им по электронной почте в течение 24 часов после указанной даты и времени прямой трансляции, которые размещены на веб-сайте нашей публикации.

Если зарегистрировавшиеся хотят задать вопрос или получить дальнейшие разъяснения, они могут ввести свои вопросы или комментарии в поле для вопросов системы вебинаров. Модератор несколько раз напоминает участникам до и после презентации использовать поле для вопросов. Вопросы задаются в конце презентации не менее десяти минут.Если возникают какие-либо вопросы, на которые невозможно ответить в отведенное время, мы передаем вопрос вместе с адресом электронной почты регистранта докладчику, чтобы он ответил напрямую.

Регистрантам необходимо будет либо войти в систему (предыдущий участник вебинара), либо зарегистрироваться (участник первого вебинара) в нашей системе викторин CE на веб-сайте нашей публикации. Пользователи, зарегистрировавшиеся на всех вебинарах CE, могут использовать этот аккаунт бесплатно. Викторина из десяти вопросов связана на странице воспроизведения под видео, а также доступна непосредственно через панель управления CE после входа в систему.

После успешного завершения викторины появляется кнопка для загрузки сертификата в формате PDF. Копия сертификата CE также отправляется по электронной почте на адрес, указанный в учетной записи CE. Чтобы обеспечить доставку электронных писем о кредитах CE, пожалуйста:

  • Проверьте папку со спамом / нежелательной почтой в своей учетной записи электронной почты.
  • Укажите [email protected] в своей почтовой платформе.

Если у регистранта возникают проблемы с доступом к онлайн-семинару, воспроизведению, тесту CE или сертификату, мы можем помочь по электронной почте, в чате и по телефону.Мы можем предоставить простые шаги со снимками экрана о том, как перейти к викторинам вебинара CE и пройти их.

Заявление об отказе от ответственности: срок действия веб-семинара истекает через 2 года с даты начала проведения. Провайдер CE проявляет разумную осторожность при выборе и предоставлении точного контента. Однако предоставленный CE не выполняет независимую проверку содержания или материалов. Любое мнение, выраженное в материалах, принадлежит докладчику, а не поставщику CE. Учебные материалы предназначены для дополнения, но не заменяют знания, навыки, опыт и суждения квалифицированного специалиста в области здравоохранения.

Применение богатого тромбоцитами фибрина в стоматологии: обзор литературы

Abstract

Разработка биоактивных хирургических добавок для регулирования воспаления и увеличения скорости процесса заживления является одной из важнейших задач клинических исследований. В этом смысле богатый тромбоцитами фибрин (PRF) представляется естественной и удовлетворительной альтернативой с благоприятными результатами и низкими рисками. В следующем обзоре делается попытка обобщить соответствующую литературу, касающуюся техники использования PRF, с акцентом на ее приготовление, преимущества и недостатки ее использования в клинических применениях.PRF отдельно или в сочетании с другими биоматериалами, по-видимому, имеет несколько преимуществ и показаний как для медицины, так и для стоматологии, поскольку это минимально инвазивный метод с низким риском и удовлетворительными клиническими результатами.

Ключевые слова: Тромбоциты, фибрин, богатый тромбоцитами фибрин, регенерация кости, хирургия полости рта

Введение

Разработка биоактивных хирургических добавок, которые используются для регуляции воспаления и увеличения скорости процесса заживления [1 ], является одной из самых сложных задач в клинических исследованиях.В этом смысле заживление — сложный процесс, который включает клеточную организацию, химические сигналы и внеклеточный матрикс для восстановления тканей [2]. Понимание процесса заживления все еще неполное, но хорошо известно, что тромбоциты играют важную роль как в процессах гемостаза, так и в процессах заживления ран [3].

Регенеративный потенциал тромбоцитов был представлен в 70-х годах [4], когда было обнаружено, что они содержат факторы роста, которые отвечают за увеличение выработки коллагена, митоз клеток, рост кровеносных сосудов, привлечение других клеток, которые мигрируют к месту повреждения. , индукция дифференцировки клеток и др. [5].

Одним из последних нововведений в оральной хирургии является использование концентратов тромбоцитов для in vivo приложений тканевой инженерии: 1) богатая тромбоцитами плазма (PRP) и 2) богатый тромбоцитами фибрин (PRF). Концентраты тромбоцитов представляют собой концентрированную суспензию факторов роста, содержащихся в тромбоцитах, которые действуют как биоактивные хирургические добавки, которые применяются локально для ускорения заживления ран [5].

Whitman et al [6] в 1997 году первыми внедрили использование богатой тромбоцитами плазмы при хирургических вмешательствах в полости рта, сообщив о больших преимуществах, поскольку она увеличивает количество остеопрогениторных клеток в костной ткани хозяина и костном трансплантате.Однако его использование также представляет риск, поскольку бычий тромбин, который используется для обработки PRP, может генерировать антитела к факторам V, XI и тромбину, которые могут вызывать коагулопатии, которые могут угрожать жизни [5].

С другой стороны, PRF был впервые использован в 2001 году Choukroun et al. [7], особенно в челюстно-лицевой хирургии, и в настоящее время рассматривается как концентрат тромбоцитов нового поколения. Он состоит из матрицы аутологичного фибрина [1] и имеет ряд преимуществ перед PRP, включая более легкое приготовление и отсутствие необходимости в химических манипуляциях с кровью, что делает его строго аутологичным препаратом [5].

В следующем обзоре делается попытка обобщить соответствующую литературу, касающуюся техники использования фибрина, обогащенного тромбоцитами (PRF), с акцентом на его получение, преимущества и недостатки его использования в клинических применениях.

Тромбоциты и фибрин

Тромбоциты — вторые по численности тельца в крови [8]. Это цитоплазматические фрагменты, у которых отсутствует ядро, полученное из мегакариоцитов [9,10]. Их продолжительность жизни составляет от 7 до 10 дней [10], а нормальная концентрация в периферической крови составляет 150-450 × 10 9 / л [8].Эти неактивированные тромбоциты представляют собой двояковыпуклые дискоидные структуры в форме линзы с размерами приблизительно 2,0-4,0 на 0,5 мкм и средним объемом 7-11 фл [8].

Тромбоциты образованы периферической областью, которая соответствует фосфолипидной мембране, ряду микротрубочек и очень обширной канальцевой системе, соединяющей поверхность с цитоплазмой. В цитоплазме можно идентифицировать гранулы гликогена, митохондрии, лизосомы, пероксисомы и различные типы включений, включая альфа и плотные гранулы [11].Альфа-гранулы — это крупные макромолекулы, которые составляют 15% от общего объема тромбоцитов [10]. Они содержат специфические для тромбоцитов и неспецифические для тромбоцитов белки (фибриноген, фибронектин, тромбоспондин, факторы роста и др.) [11]. Кроме того, плотные гранулы имеют высокое содержание кальция, неорганического фосфора, АДФ, АТФ и серотонина [11]. Однако наиболее важными элементами тромбоцитов для достижения процессов заживления и восстановления являются лейкоциты и факторы роста, последние — полипептиды, которые участвуют в дифференцировке, пролиферации, миграции и клеточном метаболизме [12].

Факторы роста стимулируют и привлекают стволовые клетки к месту повреждения, способствуя митозу клеток и вызывая ангиогенез и остеогенез [13]. Эти факторы роста после активации тромбоцитами, захваченными фибриновым матриксом, продемонстрировали стимуляцию митогенного ответа клеток надкостницы для достижения заживления кости [14]. Цитокины также высвобождаются из тромбоцитов, они ответственны за модуляцию активации тромбоцитов и пролиферации и дифференцировки лейкоцитов, играя важную роль в иммунологии, в частности, в механизме воспаления [13].

Кроме того, фибрин представляет собой мостиковую молекулу, которая обеспечивает ряд клеточных взаимодействий и обеспечивает временную матрицу, в которой клетки могут пролиферировать, организовывать и выполнять свои функции, главным образом, в участках, пострадавших от повреждения или воспаления [15]. Фибрин обеспечивает матрицу для миграции фибробластов и эндотелиальных клеток, которые участвуют в процессе ангиогенеза и отвечают за заживление новых тканей [3]. Формирование фибриновой сети является результатом превращения растворимого фибриногена — большого гликопротеина — в растворимый фибрин под действием тромбина и фактора XIIIa [16].Этот процесс можно разделить на три стадии: 1) протеолиз фибриногена тромбином; 2) полимеризация мономеров фибрина; 3) стабилизация фибрина фактором XIIIa [17].

Фибрин может иметь множество вариаций в своей структуре из-за различных физиологических ситуаций, таких как концентрация ионов кальция и фибриногена и его качество. Более того, фибрин может изменять свою структуру у пациентов с некоторыми сопутствующими заболеваниями, такими как диабет и нефротический синдром, среди прочих [18].

Фибрин, богатый тромбоцитами

PRF состоит из аутологичного фибринового матрикса, богатого лейкоцитами и тромбоцитами [1,13], состоящего из тетрамолекулярной структуры с цитокинами, тромбоцитами, цитокинами и стволовыми клетками внутри него [11,19] , который действует как биоразлагаемый каркас [20], который способствует развитию микроваскуляризации и способен направлять миграцию эпителиальных клеток к своей поверхности [19,21]. Кроме того, PRF может служить средством переноса клеток, участвующих в регенерации тканей [22], и, по-видимому, имеет устойчивое высвобождение факторов роста [23] в период от 1 до 4 недель, стимулируя среду для заживления ран в значительном количестве. времени [24].Он имеет сложную структуру прочного фибринового матрикса с благоприятными механическими свойствами и медленно ремоделируется, подобно сгустку крови [24]. Некоторые исследования [25-28] продемонстрировали, что PRF является лечебным биоматериалом с большим потенциалом для регенерации костей и мягких тканей без воспалительных реакций и может использоваться отдельно или в сочетании с костными трансплантатами, способствуя гемостазу, росту и созреванию костей. Этот аутологичный матрикс продемонстрировал в исследованиях in vitro большой потенциал для увеличения прикрепления клеток [24] и стимуляции пролиферации и дифференцировки остеобластов [29].Dohan et al. [21,30] заявили, что PRF обладает иммунологическими и антибактериальными свойствами, может приводить к дегрануляции лейкоцитов и содержит некоторые цитокины, которые могут вызывать ангиогенез и про / противовоспалительные реакции.

Разница между естественным тромбом и PRF состоит в том, что последний более однороден и стабилен, его легко обрабатывать и размещать в указанном месте [31].

В хирургических процедурах PRF может служить резорбируемой мембраной для направляемой регенерации кости (GBR) [22], предотвращая миграцию нежелательных клеток в костный дефект и обеспечивая пространство, которое позволяет иммиграцию остеогенных и ангиогенных клеток и разрешает основной тромб для минерализации [32].Однако нормальная мембрана PRF имеет быструю деградацию (1-2 недели), но если волокна сшиты, она может обеспечить устойчивость к ферментативной деградации и может быть более стабильной во время заживления [23]. Учитывая вышеизложенное, Kawase et al. [23], в исследовании in vitro на мышах, предложили тепловое сжатие PRF-мембраны в случаях с признаками направленной регенерации кости, поскольку эта процедура является менее цитотоксической техникой, которая уменьшает площадь поверхности и пористость, задерживая ее разрушение до 4 недели.

Simonpieri et al. [31] упомянули концепцию «естественной регенерации кости» (NBR), которая включает регенерацию через мембраны PRF как объема кости, так и ткани десны. Те же авторы сообщили об удовлетворительных клинических результатах, связанных с изменением формы всей альвеолярной кости и восстановлением объема десны и периимплантной кости, с достижением адекватных механических и эстетических свойств.

Мембрана PRF показала благоприятные клинические результаты при лечении дефектов пародонта [22], защищая открытые раны от среды ротовой полости, когда шовный материал не может связывать края слизистой оболочки [13,19,22,31], и ускоряя работу твердых и мягких тканей исцеление [19,31,33].В некоторых клинических исследованиях [34,35] мембрана PRF использовалась в качестве единственного материала для трансплантации для увеличения дна гайморовой пазухи, что дало многообещающие результаты.

Другие авторы, включая Тофлера и др. [36], рекомендовали использовать мембрану PRF для закрытия необнаруженной перфорации мембраны пазухи во время остеотомии бокового окна в процедуре подъема гайморовой пазухи.

Мембрана PRF способствует заживлению ран, защищает место операции [33,36], способствует восстановлению мягких тканей; при смешивании с костным трансплантатом он может действовать как «биологический соединитель», который привлекает стволовые клетки, способствует миграции клеток остеопрогениторов к центру трансплантата и обеспечивает неоангиогенез [36].

Кроме того, Choukroun et al. [37] провели исследование, в котором они хотели увидеть потенциал использования PRF в сочетании с лиофилизированным костным аллотрансплантатом с (FDBA) для улучшения регенерации кости при процедуре лифтинга гайморовых пазух. Результаты показали сокращение времени заживления до установки имплантата. С гистологической точки зрения время заживления сократилось вдвое — с 8 до 4 месяцев; однако для подтверждения этих результатов необходимы крупномасштабные исследования [37]. Кроме того, добавление PRF к костному трансплантату может привести к уменьшению объема используемого костного заменителя и, по-видимому, улучшает реваскуляризацию трансплантата, поддерживая ангиогенез [37].Simonpieri et al. [31] предложили использовать смесь PRF с костным трансплантатом, помещать в дефекты кости или, в случае немедленных имплантатов, покрывать его несколькими слоями PRF, отметив хорошие клинические результаты.

Yilmaz et al. [38] гистологически и стереологически сравнили лечебные эффекты β-TCP и PRF, по отдельности и в комбинации, при стандартизированных дефектах костей голеней свиней. Результаты показали, что когда β-TCP и PRF использовались вместе, вновь сформированная кость была значительно больше, чем при использовании обоих по отдельности.Кроме того, PRF может действовать как биологический адгезив, удерживая частицы вместе, облегчая манипуляции с костными трансплантатами [38].

Протокол для приготовления PRF

Протокол пытается накапливать тромбоциты и высвобожденные цитокины в фибриновом сгустке [35].

Протокол PRF требует только центрифугированной крови без добавления антикоагулянта и бычьего тромбина [1]. Затем отбирают образец крови без антикоагулянта в 10-миллилитровые пробирки в стеклянной или покрытой стеклом пластиковой пробирке [1,11,39], затем сразу же центрифугируют при 3000 об / мин в течение 10 минут [1,3,39].

Полученный продукт состоит из следующих трех слоев [1]:

● Самый верхний слой, состоящий из ячеистой плазмы.

● Сгусток PRF посередине.

● Основание красного тельца внизу.

После этого необходимо поместить сгусток PRF в стерильную чашку примерно на 10 минут, чтобы позволить высвободиться надлежащей сыворотке, содержащейся в [1]. Mazor et al. [35] сообщили, что сгусток может быть преобразован в мембрану посредством сжатия между двумя стерильными марлями или специальным инструментом.

Вначале фибриноген концентрируется в верхней части пробирки, прежде чем соответствующий тромбин преобразует его в фибрин [1]. Из-за отсутствия антикоагулянта кровь начинает свертываться, как только она соприкасается с поверхностью стекла. Контакт с поверхностью кремнезема необходим для активации процесса полимеризации сгустка [40]. В этом смысле PRF может быть получен только в сухих стеклянных пробирках или пластиковых пробирках со стеклянным покрытием. Более того, частицы диоксида кремния не представляют риска цитотоксичности по сравнению, например, с бычьим тромбином, используемым для приготовления PRP [40].

Наконец, тромбоциты, по-видимому, массово захватываются фибриновыми сетками [1]. Следовательно, для успешной подготовки PRF, быстрый сбор крови и немедленное центрифугирование до начала каскада свертывания абсолютно необходимы [41]. Быстрое обращение — ключ к достижению клинически пригодного сгустка PRF [1].

показывает горизонтальное наращивание кости в верхнечелюстном гребне богатым тромбоцитами фибрином, смешанным с аллотрансплантатом (Puros®, Cortico-Cancellous Particulate Allograft, Zimmer Dental Inc, Сан-Диего, Калифорния, США).

Клиническое применение во время горизонтальной операции по увеличению кости. A. Сгусток PRF в стерильной марле для выделения сыворотки. Б. Аллотрансплантат, смешанный со сгустком PRF. C. Расположение аллотрансплантата PRF + в альвеолярном гребне для увеличения его ширины. Обратите внимание на слой PRF над костным трансплантатом. D. Окончательный шов. Не было необходимости обнажать мембранный слой PRF, потому что в этом случае можно было связать края слизистой оболочки.

Преимущества использования PRF

Некоторые преимущества описаны в литературе, относящейся к использованию PRF, например:

● Его приготовление — это упрощенный и эффективный метод с центрифугированием в одну стадию, бесплатный и открытый доступ для всех врачей [31,40].

● Получен на основе аутологичного образца крови [19].

● Минимизация манипуляций с кровью [42].

● Не требует добавления внешнего тромбина, потому что полимеризация — это полностью естественный процесс, без риска возникновения иммунологической реакции [1,42].

● Он имеет естественный фибриновый каркас с факторами роста внутри, которые могут сохранять свою активность в течение относительно более длительного периода и эффективно стимулировать регенерацию тканей [24].

● Может использоваться отдельно или в сочетании с костными трансплантатами, в зависимости от цели [31,37].

● Увеличивает скорость заживления пересаженной кости [37,42].

● Это экономичный и быстрый вариант по сравнению с рекомбинантными факторами роста при использовании в сочетании с костными трансплантатами [43].

● Используемый в качестве мембраны, он позволяет избежать хирургической операции на донорском участке и снижает дискомфорт пациента в течение раннего периода заживления раны [44].

● Исследования PRF показывают, что он более эффективен и вызывает меньше разногласий по его окончательным клиническим результатам по сравнению с PRP [31].

Недостатки использования PRF

PRF могут иметь следующие недостатки:

● Окончательное доступное количество невелико, поскольку это аутологичная кровь [19].

● Успех протокола PRF напрямую зависит от обращения, в основном связанного со временем сбора крови и ее передачей в центрифугу [1].

● Необходимость использования пробирки со стеклянным покрытием для достижения полимеризации сгустка [40].

● Возможный отказ от лечения путем пункции, необходимой для взятия крови (Wani 2014).

● Требуется лишь минимальный опыт клинициста для манипуляции PRF [13,31].

Другие клинические применения

В литературе сообщается о некоторых других возможных применениях PRF, таких как:

● Непериодонтальные дефекты кости: уменьшение глубины зондирования и заполнение рентгенологического дефекта [22].

● При локализованном остите 90% уменьшения остита было обнаружено в области хирургического вмешательства на третьих молярах [46].

● Как дополнение к заживлению небной раны после извлечения свободного десневого трансплантата [47].

● В качестве потенциального каркаса в процедурах реваскуляризации пульпы некротизированного незрелого постоянного зуба: поскольку он богат факторами роста, он, по-видимому, усиливает клеточную пролиферацию и дифференцировку, усиливает ангиогенез, действует как матрица для роста тканей и регулирует воспалительную реакцию. [48].

● В нескольких удалениях для сохранения высоты альвеолярного гребня [31].

● Регенерация кости вокруг имплантатов, расположенных непосредственно внутри альвеолярного дефекта [31].

● Реконструкция крупных костных дефектов после онкологических операций [49].

● В пластической хирургии сгустки PRF часто используются непосредственно для заполнения полостей [50] или смешиваются с трансплантатом адипоцитов в липоструктуре [51].

● В виде мембраны он может быть полезен для небольших отологических операций [52,53].

Применение богатого тромбоцитами фибрина в стоматологии: обзор литературы

Реферат

Разработка биоактивных хирургических добавок для регулирования воспаления и увеличения скорости процесса заживления является одной из важнейших задач клинических исследований.В этом смысле богатый тромбоцитами фибрин (PRF) представляется естественной и удовлетворительной альтернативой с благоприятными результатами и низкими рисками. В следующем обзоре делается попытка обобщить соответствующую литературу, касающуюся техники использования PRF, с акцентом на ее приготовление, преимущества и недостатки ее использования в клинических применениях. PRF отдельно или в сочетании с другими биоматериалами, по-видимому, имеет несколько преимуществ и показаний как для медицины, так и для стоматологии, поскольку это минимально инвазивный метод с низким риском и удовлетворительными клиническими результатами.

Ключевые слова: Тромбоциты, фибрин, богатый тромбоцитами фибрин, регенерация кости, хирургия полости рта

Введение

Разработка биоактивных хирургических добавок, которые используются для регуляции воспаления и увеличения скорости процесса заживления [1 ], является одной из самых сложных задач в клинических исследованиях. В этом смысле заживление — сложный процесс, который включает клеточную организацию, химические сигналы и внеклеточный матрикс для восстановления тканей [2].Понимание процесса заживления все еще неполное, но хорошо известно, что тромбоциты играют важную роль как в процессах гемостаза, так и в процессах заживления ран [3].

Регенеративный потенциал тромбоцитов был представлен в 70-х годах [4], когда было обнаружено, что они содержат факторы роста, которые отвечают за увеличение выработки коллагена, митоз клеток, рост кровеносных сосудов, привлечение других клеток, которые мигрируют к месту повреждения. , индукция дифференцировки клеток и др. [5].

Одним из последних нововведений в оральной хирургии является использование концентратов тромбоцитов для in vivo приложений тканевой инженерии: 1) богатая тромбоцитами плазма (PRP) и 2) богатый тромбоцитами фибрин (PRF). Концентраты тромбоцитов представляют собой концентрированную суспензию факторов роста, содержащихся в тромбоцитах, которые действуют как биоактивные хирургические добавки, которые применяются локально для ускорения заживления ран [5].

Whitman et al [6] в 1997 году первыми внедрили использование богатой тромбоцитами плазмы при хирургических вмешательствах в полости рта, сообщив о больших преимуществах, поскольку она увеличивает количество остеопрогениторных клеток в костной ткани хозяина и костном трансплантате.Однако его использование также представляет риск, поскольку бычий тромбин, который используется для обработки PRP, может генерировать антитела к факторам V, XI и тромбину, которые могут вызывать коагулопатии, которые могут угрожать жизни [5].

С другой стороны, PRF был впервые использован в 2001 году Choukroun et al. [7], особенно в челюстно-лицевой хирургии, и в настоящее время рассматривается как концентрат тромбоцитов нового поколения. Он состоит из матрицы аутологичного фибрина [1] и имеет ряд преимуществ перед PRP, включая более легкое приготовление и отсутствие необходимости в химических манипуляциях с кровью, что делает его строго аутологичным препаратом [5].

В следующем обзоре делается попытка обобщить соответствующую литературу, касающуюся техники использования фибрина, обогащенного тромбоцитами (PRF), с акцентом на его получение, преимущества и недостатки его использования в клинических применениях.

Тромбоциты и фибрин

Тромбоциты — вторые по численности тельца в крови [8]. Это цитоплазматические фрагменты, у которых отсутствует ядро, полученное из мегакариоцитов [9,10]. Их продолжительность жизни составляет от 7 до 10 дней [10], а нормальная концентрация в периферической крови составляет 150-450 × 10 9 / л [8].Эти неактивированные тромбоциты представляют собой двояковыпуклые дискоидные структуры в форме линзы с размерами приблизительно 2,0-4,0 на 0,5 мкм и средним объемом 7-11 фл [8].

Тромбоциты образованы периферической областью, которая соответствует фосфолипидной мембране, ряду микротрубочек и очень обширной канальцевой системе, соединяющей поверхность с цитоплазмой. В цитоплазме можно идентифицировать гранулы гликогена, митохондрии, лизосомы, пероксисомы и различные типы включений, включая альфа и плотные гранулы [11].Альфа-гранулы — это крупные макромолекулы, которые составляют 15% от общего объема тромбоцитов [10]. Они содержат специфические для тромбоцитов и неспецифические для тромбоцитов белки (фибриноген, фибронектин, тромбоспондин, факторы роста и др.) [11]. Кроме того, плотные гранулы имеют высокое содержание кальция, неорганического фосфора, АДФ, АТФ и серотонина [11]. Однако наиболее важными элементами тромбоцитов для достижения процессов заживления и восстановления являются лейкоциты и факторы роста, последние — полипептиды, которые участвуют в дифференцировке, пролиферации, миграции и клеточном метаболизме [12].

Факторы роста стимулируют и привлекают стволовые клетки к месту повреждения, способствуя митозу клеток и вызывая ангиогенез и остеогенез [13]. Эти факторы роста после активации тромбоцитами, захваченными фибриновым матриксом, продемонстрировали стимуляцию митогенного ответа клеток надкостницы для достижения заживления кости [14]. Цитокины также высвобождаются из тромбоцитов, они ответственны за модуляцию активации тромбоцитов и пролиферации и дифференцировки лейкоцитов, играя важную роль в иммунологии, в частности, в механизме воспаления [13].

Кроме того, фибрин представляет собой мостиковую молекулу, которая обеспечивает ряд клеточных взаимодействий и обеспечивает временную матрицу, в которой клетки могут пролиферировать, организовывать и выполнять свои функции, главным образом, в участках, пострадавших от повреждения или воспаления [15]. Фибрин обеспечивает матрицу для миграции фибробластов и эндотелиальных клеток, которые участвуют в процессе ангиогенеза и отвечают за заживление новых тканей [3]. Формирование фибриновой сети является результатом превращения растворимого фибриногена — большого гликопротеина — в растворимый фибрин под действием тромбина и фактора XIIIa [16].Этот процесс можно разделить на три стадии: 1) протеолиз фибриногена тромбином; 2) полимеризация мономеров фибрина; 3) стабилизация фибрина фактором XIIIa [17].

Фибрин может иметь множество вариаций в своей структуре из-за различных физиологических ситуаций, таких как концентрация ионов кальция и фибриногена и его качество. Более того, фибрин может изменять свою структуру у пациентов с некоторыми сопутствующими заболеваниями, такими как диабет и нефротический синдром, среди прочих [18].

Фибрин, богатый тромбоцитами

PRF состоит из аутологичного фибринового матрикса, богатого лейкоцитами и тромбоцитами [1,13], состоящего из тетрамолекулярной структуры с цитокинами, тромбоцитами, цитокинами и стволовыми клетками внутри него [11,19] , который действует как биоразлагаемый каркас [20], который способствует развитию микроваскуляризации и способен направлять миграцию эпителиальных клеток к своей поверхности [19,21]. Кроме того, PRF может служить средством переноса клеток, участвующих в регенерации тканей [22], и, по-видимому, имеет устойчивое высвобождение факторов роста [23] в период от 1 до 4 недель, стимулируя среду для заживления ран в значительном количестве. времени [24].Он имеет сложную структуру прочного фибринового матрикса с благоприятными механическими свойствами и медленно ремоделируется, подобно сгустку крови [24]. Некоторые исследования [25-28] продемонстрировали, что PRF является лечебным биоматериалом с большим потенциалом для регенерации костей и мягких тканей без воспалительных реакций и может использоваться отдельно или в сочетании с костными трансплантатами, способствуя гемостазу, росту и созреванию костей. Этот аутологичный матрикс продемонстрировал в исследованиях in vitro большой потенциал для увеличения прикрепления клеток [24] и стимуляции пролиферации и дифференцировки остеобластов [29].Dohan et al. [21,30] заявили, что PRF обладает иммунологическими и антибактериальными свойствами, может приводить к дегрануляции лейкоцитов и содержит некоторые цитокины, которые могут вызывать ангиогенез и про / противовоспалительные реакции.

Разница между естественным тромбом и PRF состоит в том, что последний более однороден и стабилен, его легко обрабатывать и размещать в указанном месте [31].

В хирургических процедурах PRF может служить резорбируемой мембраной для направляемой регенерации кости (GBR) [22], предотвращая миграцию нежелательных клеток в костный дефект и обеспечивая пространство, которое позволяет иммиграцию остеогенных и ангиогенных клеток и разрешает основной тромб для минерализации [32].Однако нормальная мембрана PRF имеет быструю деградацию (1-2 недели), но если волокна сшиты, она может обеспечить устойчивость к ферментативной деградации и может быть более стабильной во время заживления [23]. Учитывая вышеизложенное, Kawase et al. [23], в исследовании in vitro на мышах, предложили тепловое сжатие PRF-мембраны в случаях с признаками направленной регенерации кости, поскольку эта процедура является менее цитотоксической техникой, которая уменьшает площадь поверхности и пористость, задерживая ее разрушение до 4 недели.

Simonpieri et al. [31] упомянули концепцию «естественной регенерации кости» (NBR), которая включает регенерацию через мембраны PRF как объема кости, так и ткани десны. Те же авторы сообщили об удовлетворительных клинических результатах, связанных с изменением формы всей альвеолярной кости и восстановлением объема десны и периимплантной кости, с достижением адекватных механических и эстетических свойств.

Мембрана PRF показала благоприятные клинические результаты при лечении дефектов пародонта [22], защищая открытые раны от среды ротовой полости, когда шовный материал не может связывать края слизистой оболочки [13,19,22,31], и ускоряя работу твердых и мягких тканей исцеление [19,31,33].В некоторых клинических исследованиях [34,35] мембрана PRF использовалась в качестве единственного материала для трансплантации для увеличения дна гайморовой пазухи, что дало многообещающие результаты.

Другие авторы, включая Тофлера и др. [36], рекомендовали использовать мембрану PRF для закрытия необнаруженной перфорации мембраны пазухи во время остеотомии бокового окна в процедуре подъема гайморовой пазухи.

Мембрана PRF способствует заживлению ран, защищает место операции [33,36], способствует восстановлению мягких тканей; при смешивании с костным трансплантатом он может действовать как «биологический соединитель», который привлекает стволовые клетки, способствует миграции клеток остеопрогениторов к центру трансплантата и обеспечивает неоангиогенез [36].

Кроме того, Choukroun et al. [37] провели исследование, в котором они хотели увидеть потенциал использования PRF в сочетании с лиофилизированным костным аллотрансплантатом с (FDBA) для улучшения регенерации кости при процедуре лифтинга гайморовых пазух. Результаты показали сокращение времени заживления до установки имплантата. С гистологической точки зрения время заживления сократилось вдвое — с 8 до 4 месяцев; однако для подтверждения этих результатов необходимы крупномасштабные исследования [37]. Кроме того, добавление PRF к костному трансплантату может привести к уменьшению объема используемого костного заменителя и, по-видимому, улучшает реваскуляризацию трансплантата, поддерживая ангиогенез [37].Simonpieri et al. [31] предложили использовать смесь PRF с костным трансплантатом, помещать в дефекты кости или, в случае немедленных имплантатов, покрывать его несколькими слоями PRF, отметив хорошие клинические результаты.

Yilmaz et al. [38] гистологически и стереологически сравнили лечебные эффекты β-TCP и PRF, по отдельности и в комбинации, при стандартизированных дефектах костей голеней свиней. Результаты показали, что когда β-TCP и PRF использовались вместе, вновь сформированная кость была значительно больше, чем при использовании обоих по отдельности.Кроме того, PRF может действовать как биологический адгезив, удерживая частицы вместе, облегчая манипуляции с костными трансплантатами [38].

Протокол для приготовления PRF

Протокол пытается накапливать тромбоциты и высвобожденные цитокины в фибриновом сгустке [35].

Протокол PRF требует только центрифугированной крови без добавления антикоагулянта и бычьего тромбина [1]. Затем отбирают образец крови без антикоагулянта в 10-миллилитровые пробирки в стеклянной или покрытой стеклом пластиковой пробирке [1,11,39], затем сразу же центрифугируют при 3000 об / мин в течение 10 минут [1,3,39].

Полученный продукт состоит из следующих трех слоев [1]:

● Самый верхний слой, состоящий из ячеистой плазмы.

● Сгусток PRF посередине.

● Основание красного тельца внизу.

После этого необходимо поместить сгусток PRF в стерильную чашку примерно на 10 минут, чтобы позволить высвободиться надлежащей сыворотке, содержащейся в [1]. Mazor et al. [35] сообщили, что сгусток может быть преобразован в мембрану посредством сжатия между двумя стерильными марлями или специальным инструментом.

Вначале фибриноген концентрируется в верхней части пробирки, прежде чем соответствующий тромбин преобразует его в фибрин [1]. Из-за отсутствия антикоагулянта кровь начинает свертываться, как только она соприкасается с поверхностью стекла. Контакт с поверхностью кремнезема необходим для активации процесса полимеризации сгустка [40]. В этом смысле PRF может быть получен только в сухих стеклянных пробирках или пластиковых пробирках со стеклянным покрытием. Более того, частицы диоксида кремния не представляют риска цитотоксичности по сравнению, например, с бычьим тромбином, используемым для приготовления PRP [40].

Наконец, тромбоциты, по-видимому, массово захватываются фибриновыми сетками [1]. Следовательно, для успешной подготовки PRF, быстрый сбор крови и немедленное центрифугирование до начала каскада свертывания абсолютно необходимы [41]. Быстрое обращение — ключ к достижению клинически пригодного сгустка PRF [1].

показывает горизонтальное наращивание кости в верхнечелюстном гребне богатым тромбоцитами фибрином, смешанным с аллотрансплантатом (Puros®, Cortico-Cancellous Particulate Allograft, Zimmer Dental Inc, Сан-Диего, Калифорния, США).

Клиническое применение во время горизонтальной операции по увеличению кости. A. Сгусток PRF в стерильной марле для выделения сыворотки. Б. Аллотрансплантат, смешанный со сгустком PRF. C. Расположение аллотрансплантата PRF + в альвеолярном гребне для увеличения его ширины. Обратите внимание на слой PRF над костным трансплантатом. D. Окончательный шов. Не было необходимости обнажать мембранный слой PRF, потому что в этом случае можно было связать края слизистой оболочки.

Преимущества использования PRF

Некоторые преимущества описаны в литературе, относящейся к использованию PRF, например:

● Его приготовление — это упрощенный и эффективный метод с центрифугированием в одну стадию, бесплатный и открытый доступ для всех врачей [31,40].

● Получен на основе аутологичного образца крови [19].

● Минимизация манипуляций с кровью [42].

● Не требует добавления внешнего тромбина, потому что полимеризация — это полностью естественный процесс, без риска возникновения иммунологической реакции [1,42].

● Он имеет естественный фибриновый каркас с факторами роста внутри, которые могут сохранять свою активность в течение относительно более длительного периода и эффективно стимулировать регенерацию тканей [24].

● Может использоваться отдельно или в сочетании с костными трансплантатами, в зависимости от цели [31,37].

● Увеличивает скорость заживления пересаженной кости [37,42].

● Это экономичный и быстрый вариант по сравнению с рекомбинантными факторами роста при использовании в сочетании с костными трансплантатами [43].

● Используемый в качестве мембраны, он позволяет избежать хирургической операции на донорском участке и снижает дискомфорт пациента в течение раннего периода заживления раны [44].

● Исследования PRF показывают, что он более эффективен и вызывает меньше разногласий по его окончательным клиническим результатам по сравнению с PRP [31].

Недостатки использования PRF

PRF могут иметь следующие недостатки:

● Окончательное доступное количество невелико, поскольку это аутологичная кровь [19].

● Успех протокола PRF напрямую зависит от обращения, в основном связанного со временем сбора крови и ее передачей в центрифугу [1].

● Необходимость использования пробирки со стеклянным покрытием для достижения полимеризации сгустка [40].

● Возможный отказ от лечения путем пункции, необходимой для взятия крови (Wani 2014).

● Требуется лишь минимальный опыт клинициста для манипуляции PRF [13,31].

Другие клинические применения

В литературе сообщается о некоторых других возможных применениях PRF, таких как:

● Непериодонтальные дефекты кости: уменьшение глубины зондирования и заполнение рентгенологического дефекта [22].

● При локализованном остите 90% уменьшения остита было обнаружено в области хирургического вмешательства на третьих молярах [46].

● Как дополнение к заживлению небной раны после извлечения свободного десневого трансплантата [47].

● В качестве потенциального каркаса в процедурах реваскуляризации пульпы некротизированного незрелого постоянного зуба: поскольку он богат факторами роста, он, по-видимому, усиливает клеточную пролиферацию и дифференцировку, усиливает ангиогенез, действует как матрица для роста тканей и регулирует воспалительную реакцию. [48].

● В нескольких удалениях для сохранения высоты альвеолярного гребня [31].

● Регенерация кости вокруг имплантатов, расположенных непосредственно внутри альвеолярного дефекта [31].

● Реконструкция крупных костных дефектов после онкологических операций [49].

● В пластической хирургии сгустки PRF часто используются непосредственно для заполнения полостей [50] или смешиваются с трансплантатом адипоцитов в липоструктуре [51].

● В виде мембраны он может быть полезен для небольших отологических операций [52,53].

Новая и простая техника

J Cutan Aesthet Surg. 2019 июль-сентябрь; 12 (3): 174–178.

Ашиш Джагати

Отделение дерматологии, пгт. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В. С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Раджу Г.Чаудхари

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В. С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Сантошдев П. Ратод

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмадабад, Гуджарат, Индия

Бхушан Мадке

1 Отделение дерматологии, венерологии и лепры, Медицинский колледж Джавахарлала Неру и сельская больница Ачарья Виноба Бхаве, Саванги (Мегхе), Вардха, Махараштра, Индия

Калги Д.Baxi

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Диксит Касундра

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмадабад, Гуджарат, Индия

1 Отделение дерматологии, венерологии и лепры, Медицинский колледж Джавахарлала Неру и сельская больница Ачарья Виноба Бхаве, Саванги (Мегхе), Вардха, Махараштра, Индия

Адрес для корреспонденции: Dr.Раджу Дж. Чаудхари, отделение дерматологии, кабинет № 9, кожное отделение, больница общего профиля Шет В. С., Эллис-Бридж, Палди-роуд, Ахмедабад, Гуджарат, Индия. Электронная почта: [email protected] Авторские права: © 2019 Журнал кожной и эстетической хирургии

Это журнал с открытым доступом, и статьи распространяются в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0, которая позволяет другим делать ремиксы , настраивать и развивать работу в некоммерческих целях при условии, что предоставлен соответствующий кредит и новые разработки лицензируются на идентичных условиях.

Реферат

Введение:

Фибрин, обогащенный тромбоцитами (PRF), сжимается с использованием различных инструментов для создания мембраны из богатого тромбоцитами фибрина (PRFM). Сохранение тромбоцитов и содержания плазмы PRFM зависит от используемого метода сжатия. Чтобы преодолеть ограничения метода компрессии, мы подготовили PRFM на каркасе из коллагенового листа без использования какого-либо компрессионного устройства.

Цели и задача:

Подготовить PRFM без использования какого-либо компрессионного устройства над каркасом из коллагенового листа и оценить его эффективность при хронической длительно незаживающей язве.

Материалы и методы:

PRFM был приготовлен с небольшими изменениями в протоколе Choukron на коллагеновом листе без использования компрессионного устройства. Чтобы изучить его эффективность и воспроизводимость, в исследование были включены 15 пациентов старше 18 лет с хроническими длительно незаживающими язвами по разным причинам более 3 месяцев, а пациенты с активной раневой инфекцией были исключены.

Результатов:

Нам удалось приготовить и воспроизвести PRFM по нашей методике. Он преодолевает ограничения метода компрессии со сравнимой эффективностью с методом компрессии.Результаты, полученные при сравнении на 0, 3 и 6 неделе с помощью парного t-критерия, оказались статистически значимыми ( P <0,0001).

Заключение:

Приготовление PRFM описанным методом легко и воспроизводимо. Использование коллагенового листа синергетически улучшает заживление ран.

Ключевые слова: Коллагеновый лист, компрессионный инструмент, длительно незаживающие язвы, богатая тромбоцитами фибриновая мембрана

Введение

Ross et al. , [1] в 1974 г. описали, что стимулирующая рост активность сыворотки происходит от тромбоцитов, и предложили концепцию фактора роста тромбоцитов.В 2001 году во Франции Choukroun et al. , разработан протокол геля богатого тромбоцитами фибрина (PRF) для накопления тромбоцитов вместе с высвобожденными цитокинами в фибриновом сгустке. [2] Протокол Шукроуна — это центрифугирование естественной крови без какого-либо антикоагулянта. [3] Для изготовления PRF мембраны (PRFM) использовалась влажная или сухая марля для сжатия сгустка PRF. Цитокины тромбоцитов, лейкоцитов и поддерживающей фибриновой мембраны являются факторами, ответственными за терапевтические эффекты PRFM. Медленное, пролонгированное и контролируемое высвобождение цитокинов вместе с фибриновым матриксом, действующим как клей в PRFM, более эффективно, чем неконтролируемое и быстрое высвобождение цитокинов из богатой тромбоцитами плазмы (PRP).[4] Согласно различным гематологическим исследованиям, тромбоциты обнаруживаются в очень меньшем количестве в бесклеточном супернатанте или в основании красных кровяных телец. Гистологический анализ показал, что тромбоциты наиболее широко распределены в нижней части фибринового сгустка, на стыке между красным тромбом и самим PRF-сгустком, поддерживая включение красного сгустка более эффективно, чем верхняя часть фибринового сгустка. . PRFM включает гликозаминогликаны (гепарин и гиалуроновую кислоту) из крови и тромбоцитов.Окрашивание альциановым синим показало, что эти гликемические связи объединены в полимерах фибрина. Цитокины тромбоцитов обладают сильным сродством к гликозаминогликанам, и эти гликозаминогликаны поддерживают миграцию клеток и процессы заживления. [5]

Материалы и методы

Метод приготовления PRFM

В рамках протокола у пациента было собрано примерно 6–10 мл венозной крови с помощью иглы 18 G в стерильном пластиковом вакуутерии для приготовления аутологичного PRFM.Без добавления какого-либо антикоагулянта исходное количество крови было разделено поровну в две пробирки, которые были размещены симметрично вокруг оси ротора для надлежащей балансировки. Затем образец центрифугировали между 2200 и 3000 об / мин в течение 3 минут в зависимости от объема крови. Всего 6 мл крови центрифугировали при 2200 об / мин, 8 мл при 2600 об / мин и 10 мл при 3000 об / мин в лабораторной центрифуге при комнатной температуре 22 ° C с откидным ротором. Тем временем лист марли, пропитанной парафином (Jelonet Manufacturer, Smith & nephew healthcare Limited, Махараштра, Индия), был намазан на стерильную чашку Петри.Поверх этого был распространен стерильный сухой лист коллагена (NeuSkin, Eucare Pharmaceuticals private limited, Тамил Наду, Индия). После центрифугирования отделяли супернатант. Его немедленно и медленно вылили на подготовленную чашку Петри с помощью пипетки и оставили примерно на 20 мин. Лист фибриновой мембраны начинает формироваться примерно через 10 минут и в большинстве случаев завершается через 20 минут. Сразу после заливки супернатант представлял собой прозрачную жидкую желтую жидкость, по мере созревания мембраны она становилась все более желтоватой с желатиновой консистенцией и оседала на желе как таковая, что не капала при наклоне чашки Петри.Эту мембрану вместе с Jelonet и коллагеновым листом накладывали непосредственно на рану в качестве повязки без какого-либо ручного обращения [].

Дизайн исследования

Чтобы оценить эффективность, мы провели открытое проспективное интервенционное исследование. Учеба длилась 3 месяца. Размер выборки исследования был основан на продолжительности, которое проводилось в амбулаторном дерматологическом отделении центра третичной медицинской помощи.

Критерии включения : В исследование были включены пациенты старше 18 лет с хроническими длительно незаживающими язвами более 3 месяцев.Причинами хронической длительно незаживающей язвы, включенных в исследование, были пациенты с вульгарной пузырчаткой с обширными эрозиями, не реагирующими на обычную терапию в течение более 2 недель (с контролируемой активностью заболевания с помощью стандартной терапии), пациенты с признаками любых длительно незаживающих язв по сравнению с атрофическими стриями, трофические язвы. у пациентов с болезнью Хансена и длительно незаживающими язвами ног, вторичными по отношению к заболеванию периферических сосудов.

Критерии исключения : Активная инфекция в области раны, язвы, вторичные по причине инфекционной причины, размер язвы <2 дюймов в диаметре, с тяжелой неконтролируемой системной инфекцией и неконтролируемой активностью заболевания (вульгарная пузырчатка), что подтверждается положительным признаком Никольского, и Пациенты, не пожелавшие дать письменное информированное согласие, были исключены из исследования.

Пациенты были набраны для исследования продолжительностью 3 месяца и наблюдались еженедельно до 6 недель. Исследование началось после одобрения институционального комитета по этике. Были собраны демографические данные пациента, такие как имя, возраст и пол, а также продолжительность язвы, приблизительный размер и история любых сопутствующих заболеваний в карточке случая. Мазок из раны был отправлен на бактериальные, микобактериальные и грибковые культуры. Пациенты были обследованы на исходном уровне на гепатит В и сывороточный вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).

Еженедельная перевязка PRFM в сочетании с коллагеновым листом и белой мягкой марлей, пропитанной парафином, проводилась под окклюзией с соблюдением асептических мер предосторожности. Строгая хирургическая асептика соблюдалась на каждом этапе процедуры. Все остальные текущие методы местного лечения были отменены. Воздействие на рану оценивали фотографически на каждом сеансе, определяя основные параметры здоровой грануляционной ткани, а также уменьшение размеров раны.

Результаты

Всего в исследование было включено 15 пациентов в возрасте от 25 до 60 лет (средний возраст 39 лет).Соотношение мужчин и женщин было 3: 2. Десять случаев произошли из-за язв на ногах, вторичных по отношению к венозной, артериальной или диабетической микроангиопатии, затем два случая из-за длительно незаживающих эрозий вульгарной пузырчатки, два случая из-за проказы и один случай незаживающих язв на фоне атрофических стрий (злоупотребление кортикостероидами). Нижняя нога (вокруг лодыжек и голени) была наиболее частым местом язвы у 66,7% пациентов, за ней следовали тыльная поверхность стоп, большой палец, пятка, грудь и нижняя часть живота (по 6,66%) []. Исходный средний размер язвы на 0 неделе составлял 10.7см 2 . После трех сеансов еженедельной перевязки PRFM средний размер язвы (неделя 3) составил 4,7 см 2 . После 6-недельной перевязки PRFM средний размер язвы (неделя 6) составил 0,66 см2 [] [и]. Результат между 0, 3 и 6 неделями сравнивался с помощью парного теста t . Двустороннее значение P было меньше 0,0001 между 0 и 3 неделями. По общепринятым критериям это различие считается чрезвычайно статистически значимым. Промежуточное значение, использованное в расчетах, составило т = 7.8572, степень свободы (df) = 14 и стандартная ошибка разности = 0,761. Двустороннее значение P было меньше 0,0001 между 0 и 6 неделями в конце исследования. Здесь также по общепринятым критериям это различие считается чрезвычайно статистически значимым. Промежуточное значение, использованное в расчетах, составило t = 8,3769, df = 14 и стандартная ошибка разницы = 1,199.

Таблица 1

Профиль пациентов, продолжительность, локализация и размеры язвы

15
№ пациента. Возраст / пол Продолжительность язвы в месяцах Место язвы Первоначальное измерение в см 2 Измерение через 3 недели в см 2 Измерение через 6 недель в см 2
1. 56 / M 22 Ножка 11 4,6 0
2. 48 / M 15 Нога 5.5 2.2 0
3. 42 / M 10 Нога 12,8 3,2 1,2
4. 35 / M 8 Нижняя часть живота (более striae) 6 2,6 0
5. 28 / M 11 Ножка 22,5 12,2 2,8
6. 60 / M Нога 9 2.4 0,3
7. 32 / M 12 Нога 18 8,6 1,4
8. 25 / M 9 Ножки (головка большой палец) 8 1,8 0,02
9. 28 / F 13 Нога 8,4 3,5 0
10. 35 / F 9 Грудь 18 6.5 0
11. 30 / F 8 Нога 6.5 2.8 0
12. 38 / F 13 Ножки 12 8 1,8
13. 45 / F 7 Нога 9,3 4,3 0
14. 52 / M 10 Ножки ( каблук) 7 3.8 0,8
15. 32 / F 9 Нога 6,6 4,4 1,6

Таблица 2

Количество пациентов
Выпадение 0
Возрастная группа 25–60 лет
Средний возраст, 39,067 лет
Продолжительность язвы (в месяцах) Мин. / Макс., 8/22
Средняя продолжительность, 11.4 мес. ) Мин. / Макс., 1,8 / 12,2
Среднее измерение, 4,727 см 2
Измерение на 6 неделе (в см 2 ) Мин. / Макс., 0 / 2,8
Среднее размер, 0,6613 см 2

Язва обыкновенной пузырчатки.(A) На нулевой неделе. (B) На 6 неделе

Язва голени. (A) На неделе 0. (B) На 6 неделе

Обсуждение

В зависимости от содержания лейкоцитов и фибрина концентрат тромбоцитов подразделяется на следующие четыре категории: (1) обогащенная лейкоцитами PRP, (2) чистая PRP, ( 3) лейкоцитарный PRF и (4) чистый PRF. [6,7] На основе добавления антикоагулянта препараты PRP подразделяются на два поколения. Концентрат тромбоцитов первого поколения включает PRP, а концентрат тромбоцитов второго поколения включает PRF.[8,9]

Choukroun et al. в 2001 году впервые описал PRF для объединения тромбоцитов и высвобождения цитокинов в фибриновый сгусток. [2] PRP имеет более высокую концентрацию тромбоцитов по сравнению с PRF. [10] Тем не менее, PRF имеет более высокую эффективность по сравнению с PRP. Это можно объяснить наличием фибрина, который многократно увеличивает среднюю концентрацию факторов роста по сравнению с традиционной PRP. [11] Исследование Dohan et al. [12] доказал, что по сравнению с PRP более медленное высвобождение фактора роста и цитокинов в PRF дает лучшее заживление.На основании этих результатов в последнее время PRF используется при хронических незаживающих язвах ног. [13,14]

Традиционно для изготовления PRF мембраны использовалась влажная или сухая марля для сжатия сгустка PRF. Однако это сжатие повреждает тромбоциты и выделяет значительное количество ценных факторов роста. Эта озабоченность была подтверждена в исследованиях Su et al. [15] и Burnouf et al. , [16], которые показали, что значительное количество факторов роста, участвующих в регенерации тканей, удаляется путем сдавливания.Этот процесс сдавливания влиял на качество и клиническую эффективность препаратов PRF. [15,16,17]

Сравнивалось

PRP, PRF, приготовленные методом сжатия, и PRFM, приготовленные по нашей методике []. Обычный метод PRP имеет несколько подводных камней, таких как необходимость в бычьем тромбине или антикоагулянте, таком как цитрат натрия, метод двойного вращения для приготовления, который требует немного больше времени и усилий, и относительно повышенный риск коагулопатии по сравнению с два других метода.Более того, использование антикоагулянтов также изменяет характеристики PRP. Большинство этих ловушек было эффективно устранено с помощью матрицы PRF, подготовленной методом сжатия, главный недостаток — производство ограниченного количества.

Таблица 3

Сравнение PRP, PRFM (метод сжатия) и PRFM (наша методика)

9073 8
Переменные / Параметры / Атрибуты Плазма с высоким содержанием тромбоцитов Фибриновая матрица с высоким содержанием тромбоцитов (метод сжатия) Обогащенная тромбоцитами фибриновая мембрана (наша методика)
Использование антикоагулянта Да (бычий тромбин / цитрат натрия / ACDA Не требуется Не требуется
No.от вращения Двойное вращение Одинарное вращение Одинарное вращение
Время, необходимое для приготовления 1-й отжим, 10 мин Только 10 мин Для 3 отжима и период ожидания 20 минут для образования мембраны
2-й отжим, 10 мин
Требуемый параметр 1-й отжим, 1300–1500 об / мин в течение 10 минут 3000 об / мин в течение 10 минут 2200–3000 об / мин (в зависимости от количества крови) в течение 3 и 20 минут периода ожидания для образования мембраны
2-е вращение, 3000 об / мин в течение 10 минут
Обработка Больше Меньше по сравнению с PRP Минимум по сравнению с PRP / PRF
Время высвобождения фактора роста Немедленное высвобождение фактора роста Медленное высвобождение фактора роста Медленное высвобождение фактора роста
Количество конечного продукта Достаточное количество, но i n жидкая форма Меньшее количество Достаточное количество может быть произведено
Терапевтическая проблема Использование бычьего тромбина может иметь фактор Va, может перекрестно реагировать с человеческим фактором Va и может вызывать коагулопатию и эпизоды кровотечения.Недавнее использование цитрата натрия / ACDA снижает эти шансы Нет коагулопатии Нет эпизода кровотечения Нет коагулопатии, нет эпизода кровотечения
Биохимические изменения Использование антикоагулянта может изменить биохимические свойства Биохимические изменения отсутствуют Нет биохимических изменений
Преимущества Достаточное количество терапевтического концентрата тромбоцитов Может использоваться в качестве повязки — Не требуется компрессионного устройства
— Может быть произведено достаточное количество по сравнению с традиционным методом приготовления PRFM
— Использование коллагенового листа синергетически действует как биологическая повязка
Недостатки Инвазивно и болезненно — Необходимость компрессионного устройства
— Большой объем крови, необходимый для покрытия большой эрозии / язвы

PRF использовали в различных формах и получали разными способами, как описано в литературе.Сохранение содержания тромбоцитов и лейкоцитов также зависит от используемых методов компрессии. Чтобы преодолеть ограничения метода компрессии, в этом исследовании для подготовки PRFM использовался коллагеновый лист. Мы успешно подготовили PRFM для всех наших пациентов с использованием коллагенового листа. Преимущества нашей техники перед компрессионной техникой заключаются в следующем: отсутствие необходимости сжимать гель PRF, покрытие больших эрозий и использование коллагенового листа для подготовки PRF улучшает выход тромбоцитов и факторов роста, обеспечивая тем самым более подходящую биологическую повязку для заживления ран.Это недорогой метод. Несмотря на то, что это зависит от оператора, достаточно единообразная PRFM может воспроизводиться у большинства пациентов.

PRFM, приготовленный по нашей методике, показал сопоставимые результаты, аналогичные различным другим исследованиям. [18,19,20]

Ограничение исследования

Гистологический анализ приготовленного PRFM не проводился.

Финансовая поддержка и спонсорство

Нет.

Конфликт интересов

Конфликта интересов нет.

Благодарность

Мы хотели бы выразить нашу благодарность доктору Деванг Рана за его руководство по статистическому анализу.

Ссылки

1. Росс Р., Гломсет Дж., Кария Б., Харкер Л. Тромбоцитозависимый сывороточный фактор, который стимулирует пролиферацию гладкомышечных клеток артерий in vitro . Proc Natl Acad Sci. 1974; 71: 1207–10. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Тоффлер М., Тоскано Н., Хольцкло Д., Корсо М.Д., Дохан Эренфест Д.М. Введение богатого тромбоцитами фибрина (PRF) Шукруна в среду реконструктивной хирургии.J Implant Clin Adv Dent. 2009; 1: 21–30. [Google Scholar] 3. Маркс Р. Э., Карлсон Э. Р., Эйхштадт Р. М., Шиммеле С. Р., Штраус Дж. Э., Джорджфф К. Р.. Плазма, обогащенная тромбоцитами: усиление фактора роста для костных трансплантатов. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 1998. 85: 638–46. [PubMed] [Google Scholar] 4. Dohan DM, Choukroun J, Diss A, Dohan SL, Dohan AJ, Mouhyi J, et al. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF): концентрат тромбоцитов второго поколения. Часть I: технологические концепции и эволюция. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod.2006; 101: e37–44. [PubMed] [Google Scholar] 5. Кларк РА. Фибрин и заживление ран. Ann N Y Acad Sci. 2001; 936: 355–67. [PubMed] [Google Scholar] 6. Павлович В., Чирич М., Йованович В., Стоянович П. Плазма, обогащенная тромбоцитами: краткий обзор некоторых биоактивных компонентов. Open Med (Wars) 2016; 11: 242–7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Белецкий Т., Дохан Эренфест Д.М., Эвертс П.А., Вичковски А. Роль лейкоцитов из L-PRP / L-PRF в заживлении ран и иммунной защите: новые перспективы. Curr Pharm Biotechnol.2012; 13: 1153–62. [PubMed] [Google Scholar] 8. Раджа В.С., Найду Э.М. Богатый тромбоцитами фибрин: эволюция концентрата тромбоцитов второго поколения. Индийский J Dent Res. 2008; 19:42. [PubMed] [Google Scholar] 10. Сучета А., Лакшми П., Бхат Д., Мундинамане Д. Б., Соорья К. В., Бхарвани Г. А.. Концентрация тромбоцитов в концентратах тромбоцитов и регенерация пародонта — устранение двусмысленности. Contemp Clin Dent. 2015; 6: 510. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Ядзава М., Огата Х., Накадзима Т., Мори Т., Ватанабэ Н., Ханда М.Основные исследования клинического применения плазмы, богатой тромбоцитами. Трансплантация клеток. 2003; 12: 509–18. [PubMed] [Google Scholar] 12. Dohan DM, Choukroun J, Diss A, Dohan SL, Dohan AJ, Mouhyi J, et al. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF): концентрат тромбоцитов второго поколения. Часть II: биологические особенности, связанные с тромбоцитами. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2006; 101: e45–50. [PubMed] [Google Scholar] 13. О’Коннелл С.М., Хесслер К., Дардик Х. Аутологичная система фибриновой матрицы Cascade®, богатая тромбоцитами, в лечении хронических язв ног.Adv Wound Care (Нью-Рошель) 2012; 1: 52–5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Steenvoorde P, van Doorn LP, Naves C, Oskam J. Использование аутологичного богатого тромбоцитами фибрина на трудно заживающих ранах. J Уход за раной. 2008; 17: 60–3. [PubMed] [Google Scholar] 15. Su CY, Kuo YP, Tseng YH, Su CH, Burnouf T. In vitro высвобождение факторов роста из богатого тромбоцитами фибрина (PRF): предложение по оптимизации клинического применения PRF. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2009; 108: 56–61.[PubMed] [Google Scholar] 16. Бурноуф Т., Ли Си-Йи, Луо К.В., Куо Ю.П., Чоу М.Л., Ву Ю.В. и др. Высвобождающие фибрин из крови человека: состав и использование для культивирования клеточных линий и первичных клеток человека. Биологические препараты. 2012; 40: 21–30. [PubMed] [Google Scholar] 17. Kobayashi M, Kawase T, Horimizu M, Okuda K, Wolff LF, Yoshie H. Предлагаемый протокол для стандартизированной подготовки мембран PRF для клинического использования. Биологические препараты. 2012; 40: 323–9. [PubMed] [Google Scholar] 18. Стид Д.Л., Гослен Дж. Б., Холлоуэй Г. А., Мэлоун Дж. М., Бант Т. Дж., Вебстер М. В..Рандомизированное проспективное двойное слепое исследование лечения хронических язв диабетической стопы: супернатант тромбоцитов, активированный CT-102, местное применение в сравнении с плацебо. Уход за диабетом. 1992; 15: 1598–604. [PubMed] [Google Scholar] 19. Маццукко Л., Медичи Д., Серра М., Паницца Р., Ривара Г., Ореккья С. и др. Использование собственного геля тромбоцитов для лечения трудно заживающих ран: пилотное исследование. Переливание. 2004; 44: 1013–8. [PubMed] [Google Scholar] 20. О’Коннелл С.М., Импедулия Т., Хесслер К., Ван XJ, Кэрролл Р.Дж., Дардик Х. Аутологический богатый тромбоцитами фибриновый матрикс в качестве клеточной терапии при лечении хронических язв нижних конечностей.Регенерация заживления ран. 2008. 16: 749–56. [PubMed] [Google Scholar]

Новый и простой метод

Дж. Кутан Эстет Сург. 2019 июль-сентябрь; 12 (3): 174–178.

Ашиш Джагати

Отделение дерматологии, пгт. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В. С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Раджу Г. Чаудхари

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Сантошдев П.Rathod

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмадабад, Гуджарат, Индия

Бхушан Мадке

1 Отделение дерматологии, венерологии и лепры, Медицинский колледж Джавахарлала Неру и сельская больница Ачарья Виноба Бхаве, Саванги (Мегхе), Вардха, Махараштра, Индия

Калги Д. Бакси

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Диксит Касундра

Отделение дерматологии, Smt.Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмадабад, Гуджарат, Индия

1 Отделение дерматологии, венерологии и лепры, Медицинский колледж Джавахарлала Неру и сельская больница Ачарья Виноба Бхаве, Саванги (Мегхе), Вардха, Махараштра, Индия

Адрес для корреспонденции: Доктор Раджу Г. Чаудхари, отделение дерматологии, кабинет No.9, Skin OPD, больница общего профиля Шет В. С., мост Эллис, Палди-роуд, Ахмадабад, Гуджарат, Индия. Электронная почта: [email protected] Авторские права: © 2019 Журнал кожной и эстетической хирургии

Это журнал с открытым доступом, и статьи распространяются в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0, которая позволяет другим делать ремиксы , настраивать и развивать работу в некоммерческих целях при условии, что предоставлен соответствующий кредит и новые разработки лицензируются на идентичных условиях.

Реферат

Введение:

Фибрин, обогащенный тромбоцитами (PRF), сжимается с использованием различных инструментов для создания мембраны из богатого тромбоцитами фибрина (PRFM). Сохранение тромбоцитов и содержания плазмы PRFM зависит от используемого метода сжатия. Чтобы преодолеть ограничения метода компрессии, мы подготовили PRFM на каркасе из коллагенового листа без использования какого-либо компрессионного устройства.

Цели и задача:

Подготовить PRFM без использования какого-либо компрессионного устройства над каркасом из коллагенового листа и оценить его эффективность при хронической длительно незаживающей язве.

Материалы и методы:

PRFM был приготовлен с небольшими изменениями в протоколе Choukron на коллагеновом листе без использования компрессионного устройства. Чтобы изучить его эффективность и воспроизводимость, в исследование были включены 15 пациентов старше 18 лет с хроническими длительно незаживающими язвами по разным причинам более 3 месяцев, а пациенты с активной раневой инфекцией были исключены.

Результатов:

Нам удалось приготовить и воспроизвести PRFM по нашей методике. Он преодолевает ограничения метода компрессии со сравнимой эффективностью с методом компрессии.Результаты, полученные при сравнении на 0, 3 и 6 неделе с помощью парного t-критерия, оказались статистически значимыми ( P <0,0001).

Заключение:

Приготовление PRFM описанным методом легко и воспроизводимо. Использование коллагенового листа синергетически улучшает заживление ран.

Ключевые слова: Коллагеновый лист, компрессионный инструмент, длительно незаживающие язвы, богатая тромбоцитами фибриновая мембрана

Введение

Ross et al. , [1] в 1974 г. описали, что стимулирующая рост активность сыворотки происходит от тромбоцитов, и предложили концепцию фактора роста тромбоцитов.В 2001 году во Франции Choukroun et al. , разработан протокол геля богатого тромбоцитами фибрина (PRF) для накопления тромбоцитов вместе с высвобожденными цитокинами в фибриновом сгустке. [2] Протокол Шукроуна — это центрифугирование естественной крови без какого-либо антикоагулянта. [3] Для изготовления PRF мембраны (PRFM) использовалась влажная или сухая марля для сжатия сгустка PRF. Цитокины тромбоцитов, лейкоцитов и поддерживающей фибриновой мембраны являются факторами, ответственными за терапевтические эффекты PRFM. Медленное, пролонгированное и контролируемое высвобождение цитокинов вместе с фибриновым матриксом, действующим как клей в PRFM, более эффективно, чем неконтролируемое и быстрое высвобождение цитокинов из богатой тромбоцитами плазмы (PRP).[4] Согласно различным гематологическим исследованиям, тромбоциты обнаруживаются в очень меньшем количестве в бесклеточном супернатанте или в основании красных кровяных телец. Гистологический анализ показал, что тромбоциты наиболее широко распределены в нижней части фибринового сгустка, на стыке между красным тромбом и самим PRF-сгустком, поддерживая включение красного сгустка более эффективно, чем верхняя часть фибринового сгустка. . PRFM включает гликозаминогликаны (гепарин и гиалуроновую кислоту) из крови и тромбоцитов.Окрашивание альциановым синим показало, что эти гликемические связи объединены в полимерах фибрина. Цитокины тромбоцитов обладают сильным сродством к гликозаминогликанам, и эти гликозаминогликаны поддерживают миграцию клеток и процессы заживления. [5]

Материалы и методы

Метод приготовления PRFM

В рамках протокола у пациента было собрано примерно 6–10 мл венозной крови с помощью иглы 18 G в стерильном пластиковом вакуутерии для приготовления аутологичного PRFM.Без добавления какого-либо антикоагулянта исходное количество крови было разделено поровну в две пробирки, которые были размещены симметрично вокруг оси ротора для надлежащей балансировки. Затем образец центрифугировали между 2200 и 3000 об / мин в течение 3 минут в зависимости от объема крови. Всего 6 мл крови центрифугировали при 2200 об / мин, 8 мл при 2600 об / мин и 10 мл при 3000 об / мин в лабораторной центрифуге при комнатной температуре 22 ° C с откидным ротором. Тем временем лист марли, пропитанной парафином (Jelonet Manufacturer, Smith & nephew healthcare Limited, Махараштра, Индия), был намазан на стерильную чашку Петри.Поверх этого был распространен стерильный сухой лист коллагена (NeuSkin, Eucare Pharmaceuticals private limited, Тамил Наду, Индия). После центрифугирования отделяли супернатант. Его немедленно и медленно вылили на подготовленную чашку Петри с помощью пипетки и оставили примерно на 20 мин. Лист фибриновой мембраны начинает формироваться примерно через 10 минут и в большинстве случаев завершается через 20 минут. Сразу после заливки супернатант представлял собой прозрачную жидкую желтую жидкость, по мере созревания мембраны она становилась все более желтоватой с желатиновой консистенцией и оседала на желе как таковая, что не капала при наклоне чашки Петри.Эту мембрану вместе с Jelonet и коллагеновым листом накладывали непосредственно на рану в качестве повязки без какого-либо ручного обращения [].

Дизайн исследования

Чтобы оценить эффективность, мы провели открытое проспективное интервенционное исследование. Учеба длилась 3 месяца. Размер выборки исследования был основан на продолжительности, которое проводилось в амбулаторном дерматологическом отделении центра третичной медицинской помощи.

Критерии включения : В исследование были включены пациенты старше 18 лет с хроническими длительно незаживающими язвами более 3 месяцев.Причинами хронической длительно незаживающей язвы, включенных в исследование, были пациенты с вульгарной пузырчаткой с обширными эрозиями, не реагирующими на обычную терапию в течение более 2 недель (с контролируемой активностью заболевания с помощью стандартной терапии), пациенты с признаками любых длительно незаживающих язв по сравнению с атрофическими стриями, трофические язвы. у пациентов с болезнью Хансена и длительно незаживающими язвами ног, вторичными по отношению к заболеванию периферических сосудов.

Критерии исключения : Активная инфекция в области раны, язвы, вторичные по причине инфекционной причины, размер язвы <2 дюймов в диаметре, с тяжелой неконтролируемой системной инфекцией и неконтролируемой активностью заболевания (вульгарная пузырчатка), что подтверждается положительным признаком Никольского, и Пациенты, не пожелавшие дать письменное информированное согласие, были исключены из исследования.

Пациенты были набраны для исследования продолжительностью 3 месяца и наблюдались еженедельно до 6 недель. Исследование началось после одобрения институционального комитета по этике. Были собраны демографические данные пациента, такие как имя, возраст и пол, а также продолжительность язвы, приблизительный размер и история любых сопутствующих заболеваний в карточке случая. Мазок из раны был отправлен на бактериальные, микобактериальные и грибковые культуры. Пациенты были обследованы на исходном уровне на гепатит В и сывороточный вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).

Еженедельная перевязка PRFM в сочетании с коллагеновым листом и белой мягкой марлей, пропитанной парафином, проводилась под окклюзией с соблюдением асептических мер предосторожности. Строгая хирургическая асептика соблюдалась на каждом этапе процедуры. Все остальные текущие методы местного лечения были отменены. Воздействие на рану оценивали фотографически на каждом сеансе, определяя основные параметры здоровой грануляционной ткани, а также уменьшение размеров раны.

Результаты

Всего в исследование было включено 15 пациентов в возрасте от 25 до 60 лет (средний возраст 39 лет).Соотношение мужчин и женщин было 3: 2. Десять случаев произошли из-за язв на ногах, вторичных по отношению к венозной, артериальной или диабетической микроангиопатии, затем два случая из-за длительно незаживающих эрозий вульгарной пузырчатки, два случая из-за проказы и один случай незаживающих язв на фоне атрофических стрий (злоупотребление кортикостероидами). Нижняя нога (вокруг лодыжек и голени) была наиболее частым местом язвы у 66,7% пациентов, за ней следовали тыльная поверхность стоп, большой палец, пятка, грудь и нижняя часть живота (по 6,66%) []. Исходный средний размер язвы на 0 неделе составлял 10.7см 2 . После трех сеансов еженедельной перевязки PRFM средний размер язвы (неделя 3) составил 4,7 см 2 . После 6-недельной перевязки PRFM средний размер язвы (неделя 6) составил 0,66 см2 [] [и]. Результат между 0, 3 и 6 неделями сравнивался с помощью парного теста t . Двустороннее значение P было меньше 0,0001 между 0 и 3 неделями. По общепринятым критериям это различие считается чрезвычайно статистически значимым. Промежуточное значение, использованное в расчетах, составило т = 7.8572, степень свободы (df) = 14 и стандартная ошибка разности = 0,761. Двустороннее значение P было меньше 0,0001 между 0 и 6 неделями в конце исследования. Здесь также по общепринятым критериям это различие считается чрезвычайно статистически значимым. Промежуточное значение, использованное в расчетах, составило t = 8,3769, df = 14 и стандартная ошибка разницы = 1,199.

Таблица 1

Профиль пациентов, продолжительность, локализация и размеры язвы

15
№ пациента. Возраст / пол Продолжительность язвы в месяцах Место язвы Первоначальное измерение в см 2 Измерение через 3 недели в см 2 Измерение через 6 недель в см 2
1. 56 / M 22 Ножка 11 4,6 0
2. 48 / M 15 Нога 5.5 2.2 0
3. 42 / M 10 Нога 12,8 3,2 1,2
4. 35 / M 8 Нижняя часть живота (более striae) 6 2,6 0
5. 28 / M 11 Ножка 22,5 12,2 2,8
6. 60 / M Нога 9 2.4 0,3
7. 32 / M 12 Нога 18 8,6 1,4
8. 25 / M 9 Ножки (головка большой палец) 8 1,8 0,02
9. 28 / F 13 Нога 8,4 3,5 0
10. 35 / F 9 Грудь 18 6.5 0
11. 30 / F 8 Нога 6.5 2.8 0
12. 38 / F 13 Ножки 12 8 1,8
13. 45 / F 7 Нога 9,3 4,3 0
14. 52 / M 10 Ножки ( каблук) 7 3.8 0,8
15. 32 / F 9 Нога 6,6 4,4 1,6

Таблица 2

Количество пациентов
Выпадение 0
Возрастная группа 25–60 лет
Средний возраст, 39,067 лет
Продолжительность язвы (в месяцах) Мин. / Макс., 8/22
Средняя продолжительность, 11.4 мес. ) Мин. / Макс., 1,8 / 12,2
Среднее измерение, 4,727 см 2
Измерение на 6 неделе (в см 2 ) Мин. / Макс., 0 / 2,8
Среднее размер, 0,6613 см 2

Язва обыкновенной пузырчатки.(A) На нулевой неделе. (B) На 6 неделе

Язва голени. (A) На неделе 0. (B) На 6 неделе

Обсуждение

В зависимости от содержания лейкоцитов и фибрина концентрат тромбоцитов подразделяется на следующие четыре категории: (1) обогащенная лейкоцитами PRP, (2) чистая PRP, ( 3) лейкоцитарный PRF и (4) чистый PRF. [6,7] На основе добавления антикоагулянта препараты PRP подразделяются на два поколения. Концентрат тромбоцитов первого поколения включает PRP, а концентрат тромбоцитов второго поколения включает PRF.[8,9]

Choukroun et al. в 2001 году впервые описал PRF для объединения тромбоцитов и высвобождения цитокинов в фибриновый сгусток. [2] PRP имеет более высокую концентрацию тромбоцитов по сравнению с PRF. [10] Тем не менее, PRF имеет более высокую эффективность по сравнению с PRP. Это можно объяснить наличием фибрина, который многократно увеличивает среднюю концентрацию факторов роста по сравнению с традиционной PRP. [11] Исследование Dohan et al. [12] доказал, что по сравнению с PRP более медленное высвобождение фактора роста и цитокинов в PRF дает лучшее заживление.На основании этих результатов в последнее время PRF используется при хронических незаживающих язвах ног. [13,14]

Традиционно для изготовления PRF мембраны использовалась влажная или сухая марля для сжатия сгустка PRF. Однако это сжатие повреждает тромбоциты и выделяет значительное количество ценных факторов роста. Эта озабоченность была подтверждена в исследованиях Su et al. [15] и Burnouf et al. , [16], которые показали, что значительное количество факторов роста, участвующих в регенерации тканей, удаляется путем сдавливания.Этот процесс сдавливания влиял на качество и клиническую эффективность препаратов PRF. [15,16,17]

Сравнивалось

PRP, PRF, приготовленные методом сжатия, и PRFM, приготовленные по нашей методике []. Обычный метод PRP имеет несколько подводных камней, таких как необходимость в бычьем тромбине или антикоагулянте, таком как цитрат натрия, метод двойного вращения для приготовления, который требует немного больше времени и усилий, и относительно повышенный риск коагулопатии по сравнению с два других метода.Более того, использование антикоагулянтов также изменяет характеристики PRP. Большинство этих ловушек было эффективно устранено с помощью матрицы PRF, подготовленной методом сжатия, главный недостаток — производство ограниченного количества.

Таблица 3

Сравнение PRP, PRFM (метод сжатия) и PRFM (наша методика)

9073 8
Переменные / Параметры / Атрибуты Плазма с высоким содержанием тромбоцитов Фибриновая матрица с высоким содержанием тромбоцитов (метод сжатия) Обогащенная тромбоцитами фибриновая мембрана (наша методика)
Использование антикоагулянта Да (бычий тромбин / цитрат натрия / ACDA Не требуется Не требуется
No.от вращения Двойное вращение Одинарное вращение Одинарное вращение
Время, необходимое для приготовления 1-й отжим, 10 мин Только 10 мин Для 3 отжима и период ожидания 20 минут для образования мембраны
2-й отжим, 10 мин
Требуемый параметр 1-й отжим, 1300–1500 об / мин в течение 10 минут 3000 об / мин в течение 10 минут 2200–3000 об / мин (в зависимости от количества крови) в течение 3 и 20 минут периода ожидания для образования мембраны
2-е вращение, 3000 об / мин в течение 10 минут
Обработка Больше Меньше по сравнению с PRP Минимум по сравнению с PRP / PRF
Время высвобождения фактора роста Немедленное высвобождение фактора роста Медленное высвобождение фактора роста Медленное высвобождение фактора роста
Количество конечного продукта Достаточное количество, но i n жидкая форма Меньшее количество Достаточное количество может быть произведено
Терапевтическая проблема Использование бычьего тромбина может иметь фактор Va, может перекрестно реагировать с человеческим фактором Va и может вызывать коагулопатию и эпизоды кровотечения.Недавнее использование цитрата натрия / ACDA снижает эти шансы Нет коагулопатии Нет эпизода кровотечения Нет коагулопатии, нет эпизода кровотечения
Биохимические изменения Использование антикоагулянта может изменить биохимические свойства Биохимические изменения отсутствуют Нет биохимических изменений
Преимущества Достаточное количество терапевтического концентрата тромбоцитов Может использоваться в качестве повязки — Не требуется компрессионного устройства
— Может быть произведено достаточное количество по сравнению с традиционным методом приготовления PRFM
— Использование коллагенового листа синергетически действует как биологическая повязка
Недостатки Инвазивно и болезненно — Необходимость компрессионного устройства
— Большой объем крови, необходимый для покрытия большой эрозии / язвы

PRF использовали в различных формах и получали разными способами, как описано в литературе.Сохранение содержания тромбоцитов и лейкоцитов также зависит от используемых методов компрессии. Чтобы преодолеть ограничения метода компрессии, в этом исследовании для подготовки PRFM использовался коллагеновый лист. Мы успешно подготовили PRFM для всех наших пациентов с использованием коллагенового листа. Преимущества нашей техники перед компрессионной техникой заключаются в следующем: отсутствие необходимости сжимать гель PRF, покрытие больших эрозий и использование коллагенового листа для подготовки PRF улучшает выход тромбоцитов и факторов роста, обеспечивая тем самым более подходящую биологическую повязку для заживления ран.Это недорогой метод. Несмотря на то, что это зависит от оператора, достаточно единообразная PRFM может воспроизводиться у большинства пациентов.

PRFM, приготовленный по нашей методике, показал сопоставимые результаты, аналогичные различным другим исследованиям. [18,19,20]

Ограничение исследования

Гистологический анализ приготовленного PRFM не проводился.

Финансовая поддержка и спонсорство

Нет.

Конфликт интересов

Конфликта интересов нет.

Благодарность

Мы хотели бы выразить нашу благодарность доктору Деванг Рана за его руководство по статистическому анализу.

Ссылки

1. Росс Р., Гломсет Дж., Кария Б., Харкер Л. Тромбоцитозависимый сывороточный фактор, который стимулирует пролиферацию гладкомышечных клеток артерий in vitro . Proc Natl Acad Sci. 1974; 71: 1207–10. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Тоффлер М., Тоскано Н., Хольцкло Д., Корсо М.Д., Дохан Эренфест Д.М. Введение богатого тромбоцитами фибрина (PRF) Шукруна в среду реконструктивной хирургии.J Implant Clin Adv Dent. 2009; 1: 21–30. [Google Scholar] 3. Маркс Р. Э., Карлсон Э. Р., Эйхштадт Р. М., Шиммеле С. Р., Штраус Дж. Э., Джорджфф К. Р.. Плазма, обогащенная тромбоцитами: усиление фактора роста для костных трансплантатов. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 1998. 85: 638–46. [PubMed] [Google Scholar] 4. Dohan DM, Choukroun J, Diss A, Dohan SL, Dohan AJ, Mouhyi J, et al. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF): концентрат тромбоцитов второго поколения. Часть I: технологические концепции и эволюция. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod.2006; 101: e37–44. [PubMed] [Google Scholar] 5. Кларк РА. Фибрин и заживление ран. Ann N Y Acad Sci. 2001; 936: 355–67. [PubMed] [Google Scholar] 6. Павлович В., Чирич М., Йованович В., Стоянович П. Плазма, обогащенная тромбоцитами: краткий обзор некоторых биоактивных компонентов. Open Med (Wars) 2016; 11: 242–7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Белецкий Т., Дохан Эренфест Д.М., Эвертс П.А., Вичковски А. Роль лейкоцитов из L-PRP / L-PRF в заживлении ран и иммунной защите: новые перспективы. Curr Pharm Biotechnol.2012; 13: 1153–62. [PubMed] [Google Scholar] 8. Раджа В.С., Найду Э.М. Богатый тромбоцитами фибрин: эволюция концентрата тромбоцитов второго поколения. Индийский J Dent Res. 2008; 19:42. [PubMed] [Google Scholar] 10. Сучета А., Лакшми П., Бхат Д., Мундинамане Д. Б., Соорья К. В., Бхарвани Г. А.. Концентрация тромбоцитов в концентратах тромбоцитов и регенерация пародонта — устранение двусмысленности. Contemp Clin Dent. 2015; 6: 510. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Ядзава М., Огата Х., Накадзима Т., Мори Т., Ватанабэ Н., Ханда М.Основные исследования клинического применения плазмы, богатой тромбоцитами. Трансплантация клеток. 2003; 12: 509–18. [PubMed] [Google Scholar] 12. Dohan DM, Choukroun J, Diss A, Dohan SL, Dohan AJ, Mouhyi J, et al. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF): концентрат тромбоцитов второго поколения. Часть II: биологические особенности, связанные с тромбоцитами. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2006; 101: e45–50. [PubMed] [Google Scholar] 13. О’Коннелл С.М., Хесслер К., Дардик Х. Аутологичная система фибриновой матрицы Cascade®, богатая тромбоцитами, в лечении хронических язв ног.Adv Wound Care (Нью-Рошель) 2012; 1: 52–5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Steenvoorde P, van Doorn LP, Naves C, Oskam J. Использование аутологичного богатого тромбоцитами фибрина на трудно заживающих ранах. J Уход за раной. 2008; 17: 60–3. [PubMed] [Google Scholar] 15. Su CY, Kuo YP, Tseng YH, Su CH, Burnouf T. In vitro высвобождение факторов роста из богатого тромбоцитами фибрина (PRF): предложение по оптимизации клинического применения PRF. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2009; 108: 56–61.[PubMed] [Google Scholar] 16. Бурноуф Т., Ли Си-Йи, Луо К.В., Куо Ю.П., Чоу М.Л., Ву Ю.В. и др. Высвобождающие фибрин из крови человека: состав и использование для культивирования клеточных линий и первичных клеток человека. Биологические препараты. 2012; 40: 21–30. [PubMed] [Google Scholar] 17. Kobayashi M, Kawase T, Horimizu M, Okuda K, Wolff LF, Yoshie H. Предлагаемый протокол для стандартизированной подготовки мембран PRF для клинического использования. Биологические препараты. 2012; 40: 323–9. [PubMed] [Google Scholar] 18. Стид Д.Л., Гослен Дж. Б., Холлоуэй Г. А., Мэлоун Дж. М., Бант Т. Дж., Вебстер М. В..Рандомизированное проспективное двойное слепое исследование лечения хронических язв диабетической стопы: супернатант тромбоцитов, активированный CT-102, местное применение в сравнении с плацебо. Уход за диабетом. 1992; 15: 1598–604. [PubMed] [Google Scholar] 19. Маццукко Л., Медичи Д., Серра М., Паницца Р., Ривара Г., Ореккья С. и др. Использование собственного геля тромбоцитов для лечения трудно заживающих ран: пилотное исследование. Переливание. 2004; 44: 1013–8. [PubMed] [Google Scholar] 20. О’Коннелл С.М., Импедулия Т., Хесслер К., Ван XJ, Кэрролл Р.Дж., Дардик Х. Аутологический богатый тромбоцитами фибриновый матрикс в качестве клеточной терапии при лечении хронических язв нижних конечностей.Регенерация заживления ран. 2008. 16: 749–56. [PubMed] [Google Scholar]

Новый и простой метод

Дж. Кутан Эстет Сург. 2019 июль-сентябрь; 12 (3): 174–178.

Ашиш Джагати

Отделение дерматологии, пгт. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В. С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Раджу Г. Чаудхари

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Сантошдев П.Rathod

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмадабад, Гуджарат, Индия

Бхушан Мадке

1 Отделение дерматологии, венерологии и лепры, Медицинский колледж Джавахарлала Неру и сельская больница Ачарья Виноба Бхаве, Саванги (Мегхе), Вардха, Махараштра, Индия

Калги Д. Бакси

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Диксит Касундра

Отделение дерматологии, Smt.Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмедабад, Гуджарат, Индия

Отделение дерматологии, Smt. Муниципальный медицинский колледж НХЛ, больница общего профиля Шет В.С., Ахмадабад, Гуджарат, Индия

1 Отделение дерматологии, венерологии и лепры, Медицинский колледж Джавахарлала Неру и сельская больница Ачарья Виноба Бхаве, Саванги (Мегхе), Вардха, Махараштра, Индия

Адрес для корреспонденции: Доктор Раджу Г. Чаудхари, отделение дерматологии, кабинет No.9, Skin OPD, больница общего профиля Шет В. С., мост Эллис, Палди-роуд, Ахмадабад, Гуджарат, Индия. Электронная почта: [email protected] Авторские права: © 2019 Журнал кожной и эстетической хирургии

Это журнал с открытым доступом, и статьи распространяются в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0, которая позволяет другим делать ремиксы , настраивать и развивать работу в некоммерческих целях при условии, что предоставлен соответствующий кредит и новые разработки лицензируются на идентичных условиях.

Реферат

Введение:

Фибрин, обогащенный тромбоцитами (PRF), сжимается с использованием различных инструментов для создания мембраны из богатого тромбоцитами фибрина (PRFM). Сохранение тромбоцитов и содержания плазмы PRFM зависит от используемого метода сжатия. Чтобы преодолеть ограничения метода компрессии, мы подготовили PRFM на каркасе из коллагенового листа без использования какого-либо компрессионного устройства.

Цели и задача:

Подготовить PRFM без использования какого-либо компрессионного устройства над каркасом из коллагенового листа и оценить его эффективность при хронической длительно незаживающей язве.

Материалы и методы:

PRFM был приготовлен с небольшими изменениями в протоколе Choukron на коллагеновом листе без использования компрессионного устройства. Чтобы изучить его эффективность и воспроизводимость, в исследование были включены 15 пациентов старше 18 лет с хроническими длительно незаживающими язвами по разным причинам более 3 месяцев, а пациенты с активной раневой инфекцией были исключены.

Результатов:

Нам удалось приготовить и воспроизвести PRFM по нашей методике. Он преодолевает ограничения метода компрессии со сравнимой эффективностью с методом компрессии.Результаты, полученные при сравнении на 0, 3 и 6 неделе с помощью парного t-критерия, оказались статистически значимыми ( P <0,0001).

Заключение:

Приготовление PRFM описанным методом легко и воспроизводимо. Использование коллагенового листа синергетически улучшает заживление ран.

Ключевые слова: Коллагеновый лист, компрессионный инструмент, длительно незаживающие язвы, богатая тромбоцитами фибриновая мембрана

Введение

Ross et al. , [1] в 1974 г. описали, что стимулирующая рост активность сыворотки происходит от тромбоцитов, и предложили концепцию фактора роста тромбоцитов.В 2001 году во Франции Choukroun et al. , разработан протокол геля богатого тромбоцитами фибрина (PRF) для накопления тромбоцитов вместе с высвобожденными цитокинами в фибриновом сгустке. [2] Протокол Шукроуна — это центрифугирование естественной крови без какого-либо антикоагулянта. [3] Для изготовления PRF мембраны (PRFM) использовалась влажная или сухая марля для сжатия сгустка PRF. Цитокины тромбоцитов, лейкоцитов и поддерживающей фибриновой мембраны являются факторами, ответственными за терапевтические эффекты PRFM. Медленное, пролонгированное и контролируемое высвобождение цитокинов вместе с фибриновым матриксом, действующим как клей в PRFM, более эффективно, чем неконтролируемое и быстрое высвобождение цитокинов из богатой тромбоцитами плазмы (PRP).[4] Согласно различным гематологическим исследованиям, тромбоциты обнаруживаются в очень меньшем количестве в бесклеточном супернатанте или в основании красных кровяных телец. Гистологический анализ показал, что тромбоциты наиболее широко распределены в нижней части фибринового сгустка, на стыке между красным тромбом и самим PRF-сгустком, поддерживая включение красного сгустка более эффективно, чем верхняя часть фибринового сгустка. . PRFM включает гликозаминогликаны (гепарин и гиалуроновую кислоту) из крови и тромбоцитов.Окрашивание альциановым синим показало, что эти гликемические связи объединены в полимерах фибрина. Цитокины тромбоцитов обладают сильным сродством к гликозаминогликанам, и эти гликозаминогликаны поддерживают миграцию клеток и процессы заживления. [5]

Материалы и методы

Метод приготовления PRFM

В рамках протокола у пациента было собрано примерно 6–10 мл венозной крови с помощью иглы 18 G в стерильном пластиковом вакуутерии для приготовления аутологичного PRFM.Без добавления какого-либо антикоагулянта исходное количество крови было разделено поровну в две пробирки, которые были размещены симметрично вокруг оси ротора для надлежащей балансировки. Затем образец центрифугировали между 2200 и 3000 об / мин в течение 3 минут в зависимости от объема крови. Всего 6 мл крови центрифугировали при 2200 об / мин, 8 мл при 2600 об / мин и 10 мл при 3000 об / мин в лабораторной центрифуге при комнатной температуре 22 ° C с откидным ротором. Тем временем лист марли, пропитанной парафином (Jelonet Manufacturer, Smith & nephew healthcare Limited, Махараштра, Индия), был намазан на стерильную чашку Петри.Поверх этого был распространен стерильный сухой лист коллагена (NeuSkin, Eucare Pharmaceuticals private limited, Тамил Наду, Индия). После центрифугирования отделяли супернатант. Его немедленно и медленно вылили на подготовленную чашку Петри с помощью пипетки и оставили примерно на 20 мин. Лист фибриновой мембраны начинает формироваться примерно через 10 минут и в большинстве случаев завершается через 20 минут. Сразу после заливки супернатант представлял собой прозрачную жидкую желтую жидкость, по мере созревания мембраны она становилась все более желтоватой с желатиновой консистенцией и оседала на желе как таковая, что не капала при наклоне чашки Петри.Эту мембрану вместе с Jelonet и коллагеновым листом накладывали непосредственно на рану в качестве повязки без какого-либо ручного обращения [].

Дизайн исследования

Чтобы оценить эффективность, мы провели открытое проспективное интервенционное исследование. Учеба длилась 3 месяца. Размер выборки исследования был основан на продолжительности, которое проводилось в амбулаторном дерматологическом отделении центра третичной медицинской помощи.

Критерии включения : В исследование были включены пациенты старше 18 лет с хроническими длительно незаживающими язвами более 3 месяцев.Причинами хронической длительно незаживающей язвы, включенных в исследование, были пациенты с вульгарной пузырчаткой с обширными эрозиями, не реагирующими на обычную терапию в течение более 2 недель (с контролируемой активностью заболевания с помощью стандартной терапии), пациенты с признаками любых длительно незаживающих язв по сравнению с атрофическими стриями, трофические язвы. у пациентов с болезнью Хансена и длительно незаживающими язвами ног, вторичными по отношению к заболеванию периферических сосудов.

Критерии исключения : Активная инфекция в области раны, язвы, вторичные по причине инфекционной причины, размер язвы <2 дюймов в диаметре, с тяжелой неконтролируемой системной инфекцией и неконтролируемой активностью заболевания (вульгарная пузырчатка), что подтверждается положительным признаком Никольского, и Пациенты, не пожелавшие дать письменное информированное согласие, были исключены из исследования.

Пациенты были набраны для исследования продолжительностью 3 месяца и наблюдались еженедельно до 6 недель. Исследование началось после одобрения институционального комитета по этике. Были собраны демографические данные пациента, такие как имя, возраст и пол, а также продолжительность язвы, приблизительный размер и история любых сопутствующих заболеваний в карточке случая. Мазок из раны был отправлен на бактериальные, микобактериальные и грибковые культуры. Пациенты были обследованы на исходном уровне на гепатит В и сывороточный вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).

Еженедельная перевязка PRFM в сочетании с коллагеновым листом и белой мягкой марлей, пропитанной парафином, проводилась под окклюзией с соблюдением асептических мер предосторожности. Строгая хирургическая асептика соблюдалась на каждом этапе процедуры. Все остальные текущие методы местного лечения были отменены. Воздействие на рану оценивали фотографически на каждом сеансе, определяя основные параметры здоровой грануляционной ткани, а также уменьшение размеров раны.

Результаты

Всего в исследование было включено 15 пациентов в возрасте от 25 до 60 лет (средний возраст 39 лет).Соотношение мужчин и женщин было 3: 2. Десять случаев произошли из-за язв на ногах, вторичных по отношению к венозной, артериальной или диабетической микроангиопатии, затем два случая из-за длительно незаживающих эрозий вульгарной пузырчатки, два случая из-за проказы и один случай незаживающих язв на фоне атрофических стрий (злоупотребление кортикостероидами). Нижняя нога (вокруг лодыжек и голени) была наиболее частым местом язвы у 66,7% пациентов, за ней следовали тыльная поверхность стоп, большой палец, пятка, грудь и нижняя часть живота (по 6,66%) []. Исходный средний размер язвы на 0 неделе составлял 10.7см 2 . После трех сеансов еженедельной перевязки PRFM средний размер язвы (неделя 3) составил 4,7 см 2 . После 6-недельной перевязки PRFM средний размер язвы (неделя 6) составил 0,66 см2 [] [и]. Результат между 0, 3 и 6 неделями сравнивался с помощью парного теста t . Двустороннее значение P было меньше 0,0001 между 0 и 3 неделями. По общепринятым критериям это различие считается чрезвычайно статистически значимым. Промежуточное значение, использованное в расчетах, составило т = 7.8572, степень свободы (df) = 14 и стандартная ошибка разности = 0,761. Двустороннее значение P было меньше 0,0001 между 0 и 6 неделями в конце исследования. Здесь также по общепринятым критериям это различие считается чрезвычайно статистически значимым. Промежуточное значение, использованное в расчетах, составило t = 8,3769, df = 14 и стандартная ошибка разницы = 1,199.

Таблица 1

Профиль пациентов, продолжительность, локализация и размеры язвы

15
№ пациента. Возраст / пол Продолжительность язвы в месяцах Место язвы Первоначальное измерение в см 2 Измерение через 3 недели в см 2 Измерение через 6 недель в см 2
1. 56 / M 22 Ножка 11 4,6 0
2. 48 / M 15 Нога 5.5 2.2 0
3. 42 / M 10 Нога 12,8 3,2 1,2
4. 35 / M 8 Нижняя часть живота (более striae) 6 2,6 0
5. 28 / M 11 Ножка 22,5 12,2 2,8
6. 60 / M Нога 9 2.4 0,3
7. 32 / M 12 Нога 18 8,6 1,4
8. 25 / M 9 Ножки (головка большой палец) 8 1,8 0,02
9. 28 / F 13 Нога 8,4 3,5 0
10. 35 / F 9 Грудь 18 6.5 0
11. 30 / F 8 Нога 6.5 2.8 0
12. 38 / F 13 Ножки 12 8 1,8
13. 45 / F 7 Нога 9,3 4,3 0
14. 52 / M 10 Ножки ( каблук) 7 3.8 0,8
15. 32 / F 9 Нога 6,6 4,4 1,6

Таблица 2

Количество пациентов
Выпадение 0
Возрастная группа 25–60 лет
Средний возраст, 39,067 лет
Продолжительность язвы (в месяцах) Мин. / Макс., 8/22
Средняя продолжительность, 11.4 мес. ) Мин. / Макс., 1,8 / 12,2
Среднее измерение, 4,727 см 2
Измерение на 6 неделе (в см 2 ) Мин. / Макс., 0 / 2,8
Среднее размер, 0,6613 см 2

Язва обыкновенной пузырчатки.(A) На нулевой неделе. (B) На 6 неделе

Язва голени. (A) На неделе 0. (B) На 6 неделе

Обсуждение

В зависимости от содержания лейкоцитов и фибрина концентрат тромбоцитов подразделяется на следующие четыре категории: (1) обогащенная лейкоцитами PRP, (2) чистая PRP, ( 3) лейкоцитарный PRF и (4) чистый PRF. [6,7] На основе добавления антикоагулянта препараты PRP подразделяются на два поколения. Концентрат тромбоцитов первого поколения включает PRP, а концентрат тромбоцитов второго поколения включает PRF.[8,9]

Choukroun et al. в 2001 году впервые описал PRF для объединения тромбоцитов и высвобождения цитокинов в фибриновый сгусток. [2] PRP имеет более высокую концентрацию тромбоцитов по сравнению с PRF. [10] Тем не менее, PRF имеет более высокую эффективность по сравнению с PRP. Это можно объяснить наличием фибрина, который многократно увеличивает среднюю концентрацию факторов роста по сравнению с традиционной PRP. [11] Исследование Dohan et al. [12] доказал, что по сравнению с PRP более медленное высвобождение фактора роста и цитокинов в PRF дает лучшее заживление.На основании этих результатов в последнее время PRF используется при хронических незаживающих язвах ног. [13,14]

Традиционно для изготовления PRF мембраны использовалась влажная или сухая марля для сжатия сгустка PRF. Однако это сжатие повреждает тромбоциты и выделяет значительное количество ценных факторов роста. Эта озабоченность была подтверждена в исследованиях Su et al. [15] и Burnouf et al. , [16], которые показали, что значительное количество факторов роста, участвующих в регенерации тканей, удаляется путем сдавливания.Этот процесс сдавливания влиял на качество и клиническую эффективность препаратов PRF. [15,16,17]

Сравнивалось

PRP, PRF, приготовленные методом сжатия, и PRFM, приготовленные по нашей методике []. Обычный метод PRP имеет несколько подводных камней, таких как необходимость в бычьем тромбине или антикоагулянте, таком как цитрат натрия, метод двойного вращения для приготовления, который требует немного больше времени и усилий, и относительно повышенный риск коагулопатии по сравнению с два других метода.Более того, использование антикоагулянтов также изменяет характеристики PRP. Большинство этих ловушек было эффективно устранено с помощью матрицы PRF, подготовленной методом сжатия, главный недостаток — производство ограниченного количества.

Таблица 3

Сравнение PRP, PRFM (метод сжатия) и PRFM (наша методика)

9073 8
Переменные / Параметры / Атрибуты Плазма с высоким содержанием тромбоцитов Фибриновая матрица с высоким содержанием тромбоцитов (метод сжатия) Обогащенная тромбоцитами фибриновая мембрана (наша методика)
Использование антикоагулянта Да (бычий тромбин / цитрат натрия / ACDA Не требуется Не требуется
No.от вращения Двойное вращение Одинарное вращение Одинарное вращение
Время, необходимое для приготовления 1-й отжим, 10 мин Только 10 мин Для 3 отжима и период ожидания 20 минут для образования мембраны
2-й отжим, 10 мин
Требуемый параметр 1-й отжим, 1300–1500 об / мин в течение 10 минут 3000 об / мин в течение 10 минут 2200–3000 об / мин (в зависимости от количества крови) в течение 3 и 20 минут периода ожидания для образования мембраны
2-е вращение, 3000 об / мин в течение 10 минут
Обработка Больше Меньше по сравнению с PRP Минимум по сравнению с PRP / PRF
Время высвобождения фактора роста Немедленное высвобождение фактора роста Медленное высвобождение фактора роста Медленное высвобождение фактора роста
Количество конечного продукта Достаточное количество, но i n жидкая форма Меньшее количество Достаточное количество может быть произведено
Терапевтическая проблема Использование бычьего тромбина может иметь фактор Va, может перекрестно реагировать с человеческим фактором Va и может вызывать коагулопатию и эпизоды кровотечения.Недавнее использование цитрата натрия / ACDA снижает эти шансы Нет коагулопатии Нет эпизода кровотечения Нет коагулопатии, нет эпизода кровотечения
Биохимические изменения Использование антикоагулянта может изменить биохимические свойства Биохимические изменения отсутствуют Нет биохимических изменений
Преимущества Достаточное количество терапевтического концентрата тромбоцитов Может использоваться в качестве повязки — Не требуется компрессионного устройства
— Может быть произведено достаточное количество по сравнению с традиционным методом приготовления PRFM
— Использование коллагенового листа синергетически действует как биологическая повязка
Недостатки Инвазивно и болезненно — Необходимость компрессионного устройства
— Большой объем крови, необходимый для покрытия большой эрозии / язвы

PRF использовали в различных формах и получали разными способами, как описано в литературе.Сохранение содержания тромбоцитов и лейкоцитов также зависит от используемых методов компрессии. Чтобы преодолеть ограничения метода компрессии, в этом исследовании для подготовки PRFM использовался коллагеновый лист. Мы успешно подготовили PRFM для всех наших пациентов с использованием коллагенового листа. Преимущества нашей техники перед компрессионной техникой заключаются в следующем: отсутствие необходимости сжимать гель PRF, покрытие больших эрозий и использование коллагенового листа для подготовки PRF улучшает выход тромбоцитов и факторов роста, обеспечивая тем самым более подходящую биологическую повязку для заживления ран.Это недорогой метод. Несмотря на то, что это зависит от оператора, достаточно единообразная PRFM может воспроизводиться у большинства пациентов.

PRFM, приготовленный по нашей методике, показал сопоставимые результаты, аналогичные различным другим исследованиям. [18,19,20]

Ограничение исследования

Гистологический анализ приготовленного PRFM не проводился.

Финансовая поддержка и спонсорство

Нет.

Конфликт интересов

Конфликта интересов нет.

Благодарность

Мы хотели бы выразить нашу благодарность доктору Деванг Рана за его руководство по статистическому анализу.

Ссылки

1. Росс Р., Гломсет Дж., Кария Б., Харкер Л. Тромбоцитозависимый сывороточный фактор, который стимулирует пролиферацию гладкомышечных клеток артерий in vitro . Proc Natl Acad Sci. 1974; 71: 1207–10. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Тоффлер М., Тоскано Н., Хольцкло Д., Корсо М.Д., Дохан Эренфест Д.М. Введение богатого тромбоцитами фибрина (PRF) Шукруна в среду реконструктивной хирургии.J Implant Clin Adv Dent. 2009; 1: 21–30. [Google Scholar] 3. Маркс Р. Э., Карлсон Э. Р., Эйхштадт Р. М., Шиммеле С. Р., Штраус Дж. Э., Джорджфф К. Р.. Плазма, обогащенная тромбоцитами: усиление фактора роста для костных трансплантатов. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 1998. 85: 638–46. [PubMed] [Google Scholar] 4. Dohan DM, Choukroun J, Diss A, Dohan SL, Dohan AJ, Mouhyi J, et al. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF): концентрат тромбоцитов второго поколения. Часть I: технологические концепции и эволюция. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod.2006; 101: e37–44. [PubMed] [Google Scholar] 5. Кларк РА. Фибрин и заживление ран. Ann N Y Acad Sci. 2001; 936: 355–67. [PubMed] [Google Scholar] 6. Павлович В., Чирич М., Йованович В., Стоянович П. Плазма, обогащенная тромбоцитами: краткий обзор некоторых биоактивных компонентов. Open Med (Wars) 2016; 11: 242–7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Белецкий Т., Дохан Эренфест Д.М., Эвертс П.А., Вичковски А. Роль лейкоцитов из L-PRP / L-PRF в заживлении ран и иммунной защите: новые перспективы. Curr Pharm Biotechnol.2012; 13: 1153–62. [PubMed] [Google Scholar] 8. Раджа В.С., Найду Э.М. Богатый тромбоцитами фибрин: эволюция концентрата тромбоцитов второго поколения. Индийский J Dent Res. 2008; 19:42. [PubMed] [Google Scholar] 10. Сучета А., Лакшми П., Бхат Д., Мундинамане Д. Б., Соорья К. В., Бхарвани Г. А.. Концентрация тромбоцитов в концентратах тромбоцитов и регенерация пародонта — устранение двусмысленности. Contemp Clin Dent. 2015; 6: 510. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Ядзава М., Огата Х., Накадзима Т., Мори Т., Ватанабэ Н., Ханда М.Основные исследования клинического применения плазмы, богатой тромбоцитами. Трансплантация клеток. 2003; 12: 509–18. [PubMed] [Google Scholar] 12. Dohan DM, Choukroun J, Diss A, Dohan SL, Dohan AJ, Mouhyi J, et al. Богатый тромбоцитами фибрин (PRF): концентрат тромбоцитов второго поколения. Часть II: биологические особенности, связанные с тромбоцитами. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2006; 101: e45–50. [PubMed] [Google Scholar] 13. О’Коннелл С.М., Хесслер К., Дардик Х. Аутологичная система фибриновой матрицы Cascade®, богатая тромбоцитами, в лечении хронических язв ног.Adv Wound Care (Нью-Рошель) 2012; 1: 52–5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Steenvoorde P, van Doorn LP, Naves C, Oskam J. Использование аутологичного богатого тромбоцитами фибрина на трудно заживающих ранах. J Уход за раной. 2008; 17: 60–3. [PubMed] [Google Scholar] 15. Su CY, Kuo YP, Tseng YH, Su CH, Burnouf T. In vitro высвобождение факторов роста из богатого тромбоцитами фибрина (PRF): предложение по оптимизации клинического применения PRF. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 2009; 108: 56–61.[PubMed] [Google Scholar] 16. Бурноуф Т., Ли Си-Йи, Луо К.В., Куо Ю.П., Чоу М.Л., Ву Ю.В. и др. Высвобождающие фибрин из крови человека: состав и использование для культивирования клеточных линий и первичных клеток человека. Биологические препараты. 2012; 40: 21–30. [PubMed] [Google Scholar] 17. Kobayashi M, Kawase T, Horimizu M, Okuda K, Wolff LF, Yoshie H. Предлагаемый протокол для стандартизированной подготовки мембран PRF для клинического использования. Биологические препараты. 2012; 40: 323–9. [PubMed] [Google Scholar] 18. Стид Д.Л., Гослен Дж.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *