Эндожи 2: ЭндоЖи №2 — препарат для выявления устья корневых каналов и их расширения (жидкость 15 мл) — Медицинский портал Pitprice.ru

Содержание

ЭндоЖи №2 жидкость для для выявления устья каналов и их расширения ВладМиВа/Эндожи №2

Название:

Артикул:

Текст:

Выберите категорию:
Все СТОМАТОЛОГИЯ » Каталоги производителей » ТОВАР НЕДЕЛИ в МАКСИДЕНТ » АКЦИИ для СТОМАТОЛОГОВ / 100 АКЦИЙ от МАКСИДЕНТ » Комплекты оборудования по спец ценам » НОВИНКИ сайта МАКСИДЕНТ » Товары с ограниченным сроком годности » Ортодонтия » Стоматологические материалы »» Адгезивы и Бондинги »» Артикуляционная бумага и спрей »» Вспомогательные средства »» Гели протравки »» Детская стоматология »» Защитные средства »» Костные материалы / Остеопластические материалы »» Клампы и Бринкеры,Рамки,Щипцы,Пробойник, »» Коффердам , Раббердам , Клампы »» Лечебные препараты »» Лицевые дуги,артикуляторы,аппараты для определения окклюзии »» Матрицы,клинья,штрипсы »» Материал для восстановления культи зуба »» Насадки смешивающие,пистолеты »» Одноразовые средства »»» Бахилы »»» Валики »»» Маски и респираторы »»» Полотенца »»» Простыни »»» Перчатки »»» Салфетки,фартуки »»» Пылесосы »»» Слюноотсосы »»» Чехлы »»» Стерильные изделия »»» Халаты »» Ортопедия »»» Материалы для фиксации »»» Слепочные материалы »»» Материалы для ремонта керамики »»» Материалы для временных коронок »»» Материалы для регистрации прикуса »»» Пластмассы »»» Материалы для восстановления культи »» Отбеливание »» Пломбировочные материалы »»» Пломбировочные материалы наборы »»» Пломбировочные материалы(не в наборах) »» Полировка »» Профилактика »» Пластины, пленки и заготовки полимерные для термоформирования »» Ретракция десны »» Трейнеры,капы для зубов »» Хирургия »»» Костные материалы »»» Щипцы »»» Элеваторы »»» Люксаторы DIRECTA »»» Люксаторы »»» Инструменты костные »» Шинирование »» Штифты эндоканальные »» Шовный материал »» Эндодонтия » Имплантологам »» Имплантаты »»» Имплантационная система MIS »»» Имплантационная система Anthogyr Франция »»» Имплантационная система Hi-Tec (ХайТек) »» Инструменты для имплантологии »»» Инструменты для имплантологии HLW Германия »»» Инструменты других производителей »» Зеркала для фотографирования »» Костные материалы »» Шовный материал » Инструменты »» Боры,подставки для боров »» Гладилки и штопферы »» Диски,фрезы »» Долота,остеотомы »» Иглодержатели »» Инструмент для работы с коронками »» Инструменты для терапии »» Зажимы,корцанги,цапки для белья »» Зеркала и ручки для зеркал »» Зеркала для фотографирования »» Зонды, плаггеры, спредеры, эксплореры »» Крючки хирургические »» Коронкосниматели,мотосниматели »» Кусачки костные »» Кюреты и скейлеры пародонтологические »» Лезвия для скальпелей »» Лотки для инструмента »» Ложки костные »» Ложки кюретажные »» Ложки слепочные »» Люксаторы DIRECTA »» Люксаторы »» Молотки, долота, остеотомы »» Наборы для трахеотомии »» Ножницы хирургические прямые и изогнутые »» Пинцеты стоматологические,хирургические,анатомические »» Распаторы »» Ретракторы и роторасширители »» Ручки для скальпелей »» ФАБРИ инструменты »» Щипцы »» Шприцы карпульные,интралигаментарные и иглы »» Шпатели »» Элеваторы »» Экскаваторы »» Прочие инструменты для стоматологов и техников »» Экрадент Стоматологические ИНСТРУМЕНТЫ » Дезинфекция и Стерилизация »» Дезсредства »» Журналы и книги учета »» Контейнеры для дезинфекции »» Контроль стерилизации / Индикаторы »»» Индикаторы химические »»» Индикаторы биологические »» Контроль дезинфекции »»» Контроль паровоздушной дезинфекции »» Контроль условий хранения и транспортирования МИБП »» Контроль продуктов питания »» Коробки стерилизационные »» Определение кислотности растворов/рН »» Предстерилизационная очистка » Рентгензащита » ОБОРУДОВАНИЕ »» 3D сканеры и CAD/CAM системы »» Автоклавы »» Амальгамосмесители »» Аппараты для диагностики и дезинфекции »» Аппарат для смазки и чистки наконечников »» Аппарат для заполнения корневых каналов зуба разогретой гуттаперчей »» Аппараты для диагностики кариеса »» Аппараты общего назначения »» Аппараты пескоструйные »» Аппараты ультразвуковые,скалеры,насадки »» Аппараты хирургические »» Апекслокаторы »» Аспирационные системы и помпы »» Бинокуляры и лупы »» Бормашины зуботехнические,Микромоторы »» Встраиваемое оборудование »»» Моторы щеточные (коллекторные) »»» Моторы безщеточные (коллекторные) »»» БЛОКИ УПРАВЛЕНИЯ КОЛЛЕКТОРНЫМИ микроэлектродвигателями (комплект в установку) »»» БЛОКИ УПРАВЛЕНИЯ КОЛЛЕКТОРНЫМИ микроэлектродвигателями(комплект в установку) »»» Разное встраив. оборудование »» Гелиолампы,Лампы полимеризационные »» Гипсоотстойники »» Дефибрилляторы »» Диатермокоагуляторы »» Дистилляторы,деминерализаторы »» Запасные части к оборудованию »» Интраоральные камеры »» Ирригаторы и щетки »» Кабели,загубники,насадки и прочее »» Камеры для стерилизации »» Компрессоры »» Кресло стоматологическое »» Лазеры »» Лампы для отбеливания »» Микроскопы »» Моюще-дезинфицирующие аппараты »» Наконечники,микромоторы,переходники »»» Наконечники,микромоторы,переходники »»» Наконечники прямые »»» Спрей для наконечников,смазки »» Негатоскопы »» Облучатели,рециркуляторы »» Обтурация канала »» Ортопантомографы »» Ортодонтическое оборудование »» Параллелометр »» Печь для разогрева композита »» Реанимационное оборудование для стоматологии »» Рентгеновское оборудование »»» Портативные рентген аппараты »»» Радиовизиографы »»» Дентальные рентген аппараты »»» Панорамные рентген аппараты »»» Сканеры рентгенографических пластин и Проявочные машины »»» Разное для рентгенологии »» Светильники,осветители стоматологические »» Система SAF »» Скалеры / Скейлеры ,насадки и наконечники к ним »»» Насадки для скалера »» Стерилизаторы / Сухожары »» Стулья стоматологические »» Тележки универсальные »» Ультразвуковые ванны/Мойки ультразвуковые/Ванночки/ »» Упаковочные машины »» Установки стоматологические »» Утилизаторы и Деструкторы игл »» Физиотерапевтические аппараты для стоматологии »» Физиодиспенсеры »» Холодильники фармацевтические »» ЭЛЕКТРООДОНТОДИАГНОСТИКА,Электроодонтотестеры,Электроодонтометр »» Эндомоторы »» ElectronicBite-система подсветки » Зуботехнические материалы,инструменты и оборудование »» Расходные материалы для лабораторий »»» Воска »»» Гипсы »»» Десневые маски »»» Диски,полиры, фильцы »»» Зубы пластмассовые »»» Кисти, палитры »»» Керамика »»» Клей, лаки,разделительные,изоляционные средства »»» КРУГИ прорезные,шлифовальные »»» Материалы для изготовления коронок »»» Пластмассы зуботехнические »»» Cиликон для дублирования »»» Сплавы »»» Паковочные массы »»» Прочие Материалы для техников »» Артикуляторы и окклюдаторы и лицевые дуги »» Блок с микромотором встраиваемый в стом. установку »» Боксы,вытяжки для зуботехнической лаборатории »» Вакуумформеры »» Вакуумные смесители »» Весы »» Вибростолики »» Воскотопки »» Гипсоотстойники »» Горелки газовые и спиртовые »» Зуботехнические прессы »» Инструменты для техников »» ИНСТРУМЕНТЫ И ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ РАБОТЫ С ВОСКОМ »» Комбинированные устройства »» Лабораторные столы »» Литейные установки,все для литейной лаборатории »» Материалы для CAD/CAM-системы »» Мебель для зуботехнической лаборатории »»» Стул зубного техника »» Микромоторы,Бормашины зуботехнические »»» Микромоторы высокой мощности (до 230 Ватт) безщёточные бормашины »»» Микромоторы обычной мощности (до 40 Ватт) бормашины »»» Микромоторы повышенной мощности (до 100 Ватт) щёточные бормашины »» Муфельные печи »» Наконечники »»» Наконечники-микромоторы бесщёточные »»» Наконечники-микромоторы щёточные »» Оборудование для изготовления моделей »» Отсасывающие системы »» Пайка Сварка »» Параллелометр »» Пароструйные аппараты »» Педали включения / выключения »» Педали плавного регулирования »» Переходники »» Пескоструйные аппараты »» Печи для обжига металлокерамики »» Печи Электромуфельные и Сушильные »» Полимеризаторы »» Рабочее место шлифовки и полировки (СТОИМОСТЬ ШЛИФМОТОРА ЗАВИСИТ ОТ ЦЕНЫ ПОСТАВЩИКА И В ЦЕНУ ПРАЙСА »» Система изготовления зубных протезов методом гальванопластики AGC »» Триммеры »» ТЕХНИКА ТЕРМОФОРМИРОВАНИЯ »» Устройства нагрева »» Фрезера,сверлильные станки »» Шлифмотор и принадлежности »» Электрошпатели »» Товары для 3D печати » Мебель »» Стулья »» Мебель металлическая »» Мебель из ЛДСП »»» Столы, надстройки, тумбы из ЛДСП »»» Шкафы, стеллажи, антресоли »»» Кушетки из ЛДСП »» Ширмы, тележки, прочее »» Кушетки массажные и принадлежности »» Мебель для зуботехнической лаборатории »»» Столы гипсовочные »»» Столы зубного техника / Столы зуботехнические » Книги / Литература / Библиотека / Стом. издания / Медкнига / Стоматология Специальная медицина / Ме » Для студентов стоматологов » Товары общего назначения »» Демонстрационные модели »» Разное »» Все для офиса,склада и дома »» Вспомогательные средства »» Аптечки разные » Запчасти к оборудованию МЕДИЦИНА и КОСМЕТОЛОГИЯ » АКЦИИ для медцентров » Расходные материалы и инструменты »» Бумажная продукция »»» Пакеты гигиенические »»» Покрытие на унитаз »»» Полотенца для рук »»» Полотенца для уборки »»» Простыни »»» Салфетки для лица »»» Салфетки для протирания »»» Салфетки для рук »»» Салфетки цветные »»» Туалетная бумага »» Бумага регистрационная,электроды,мундштуки,загубники,кабели »»» Для анализатора »»» Для УЗИ »»» Для ФМ »»» Для ЭКГ »»» Для ЭЭГ »»» Кабели,электроды »»» Прочее »» Бумага регистрационная »» Инструменты мц »»» Гинекологические зеркала и наборы »»» Емкости для стерилизации »»» Емкости прочие »»» Зажимы,корцанги,цапки для белья »»» Зеркала »»» Зонды »»» Иглы »»»» Акупунктурные »»»» Биопсийные »»»» для Мезотерапии »»»» Игла-бабочка »»»» Инъекционные »»»» Ланцеты »»»» Спинальная »»»» Хирургические »»» Иглодержатели »»» Кюретки »»» Лезвия для скальпелей »»» Лотки и маты »»» Ножницы,ножи »»» Пинцеты »»» Прочие инструменты »»» Распаторы »»» Ручки для скальпелей »»» Скарификаторы »»» Скальпели и Лезвия »»» мундштуки »»» загубники »»» кабели »»» Зажимы »»» корцанги »»» цапки для белья »»» Катетеры »»» Ножницы »»» ножи »»» Шприцы »» Изделия из резины, силикона, латекса »» Лаборатория »»» Дозаторы и наконечники »»» Изделия из резины, силикона, латекса »»» Контейнеры »»» Пробирки вакуумные »»» Пробирки лабораторные — пластик »»» Пробирки цилиндрические(стекло/пластик) »»» Пробирки лабораторные — стекло »»» Пробирки Моноветт »»» Пробирки центрифужные — стекло »»» Прочее »»» Пробирки центрифужные — пластик »»» Пробирки вакуумные Вакутайнер »»» Реагенты для гем. анализаторов »»» Реактивы для лабораторных исследований »»» Стекло »»» Штативы »» Одноразовые средства »»» Бахилы »»» Воротнички »»» Головные уборы »»» Защита глаз »»» Коврики »»» Коврики »»» Комплекты одежды для процедур нестерильные »»» Комплекты одежды для процедур стерильные »»» Маски одноразовые и респираторы »»» Носки »»» Одежда для процедур »»» Пеньюары »»» Перчатки »»»» Держатели для перчаток »»»» Нестерильные перчатки »»»»» Виниловые »»»»» Нитриловые »»»»» Прочие перчатки »»»»» Смотровые »»»»» Хирургические »»»» Стерильные перчатки »»»»» Нитриловые стерильные »»»»» Прочие стерильные перчатки »»»»» Нитриловые стерильные »»»»» Смотровые стерильные перчатки »»»»» Хирургические стерильные перчатки »»» Полотенца »»» Простыни »»»» Простыни нестерильные »»»» Простыни стерильные »»» Разделители пальцев »»» Салфетки и фартуки »»» Трусы »»» Чехлы »»» Фольга »»» Халаты »»» Фартуки »»» Тапочки »»» Шапочки »» Перевязка »»» Салфетки ранозаживляющие »»» Салфетки инъекционные »»» Марля »»» Клеенка »»» Вата стерильная и нестерильная »»» Пластырь бактерицидный »»» Пластырь фиксирующий »»» Салфетки для перевязки »»» Бинты нестерильные »»» Бинты стерильные »»» Бинты гипсовые »»» Бинты трубчатые »» Продукция по уходу за ребенком »» Пленка и Химия »»» Пленка для Маммографии »»» Пленка зеленая »»» Пленка синяя »»» Прочее Пленки и Химия »» Прочее (расходники) »»» Аптечки »»» Коврики антибактериальные »»» Мочеприемники »»» Мундштуки »»» Освежители воздуха TORK »»» Трубки и воздуховоды »»» Разное (расходники) »» Расходный материал для оборудования »» разное (расходники) »» Средства гигиены »» Тесты »»» Тест-полоки на мочу »»» Прочие тест-полоски »»» Тесты дыхания на алкоголь »»» Тест-полоски на дезинфицирующие средства »»» Тест-полоски на кровь »» Фартуки нестерильные »» Уборочный инвентарь »»» Аксессуары »»» Тряпки,Салфетки »»» Тележки »»» МОП »» Упаковочный материал »»» Бумага крепированная »»» Бумага креповая »»» Бумага оберточная »»» Лента индикаторная »»» Пакеты (сумки) пылевлагозащитные »»» Пакеты бумажные »»» Пакеты ВЛАГОПРОЧНЫЕ »»» Пакеты КРАФТ/Крафт-пакеты »»» Пакеты КРАФТ ГЕКОМЕД »»» Пакеты объемные бумага/пленка »»» Пакеты плоские простые бумага/пленка »»» Пакеты плоские самозапечатывающие бумага/пленка »»» Пакеты с замком »»» Пакеты усиленные (бумага/пленка) »»» Рулоны объемные »»» Рулоны плоские »» Утилизация »»» Емкости класса А »»» Емкости класса Б »»» Контейнеры класса Б »»» Корзины для мусора »»» Мешки класс А »»» Мешки класса Б »»» Мешки класса В »»» Мешки класса Г »»» Прочее(Утилизация) »»» Тележки (Утилизация) »» Гели »» Шовный материал »» Система для растворов »» Дезинсекция » Стерилизация и Дезинфекция »» Дезинфицирующие средства »» Дезинфекция и гигиена кожи и рук »» Дезсредства для дезинфицирующих и моющих машин »» Дозатор локтевой »» Журналы и книги учета »» Емкости класса В »» Индикаторы »»» Биологические индикаторы »»» Дезиконты »»» Журналы регистрации »»» Интесты »»» Медисы »»» Прочие »»» Стериконты »»» Стеритесты »»» Фарматесты »» Контейнеры для дезинфекции »» Камеры дезинфекционные »» Комплект для раздачи лекарств »» Коробки стерилизационные »» Лампочки бактерицидные »» Моюще-дезинфицирующие аппараты »» Оборудование для приготовления дезрастворов »» Облучатель-рециркуляторы бактерицидные »» Обеззараживания медицинских отходов »» Стерилизаторы воздушные »» Стерилизаторы паровые »» Стерилизаторы воздушные с охлаждением »» Тест — полоски »» Ультразвуковая моечная установка »» Утилизация медицинских отходов »» Устройства термосваривающие упаковочные »» Чистящие и моющие средства »» Шкаф для сушки и хранения медицинских изделий »» Шкафы суховоздушные » Оборудование для клиник и учреждений »» Оборудование СБОР клиникам »» Автоклавы »» Аквадистилляторы »» Акушерство и гинекология »» Аппараты для педикюра со встроенным пылесосом »» Аппараты сшивающие хирургические »» Аппараты общего назначения »» Аппараты УЗИ и сканеры »» Аппараты а-ивл/влил, ингаляционного наркоза анпсп »» Вакуумные массажеры »» Весы »» Внутрикостные пистолеты »» Водяные бани »» Гинекологическое оборудование »» Диагностическое оборудование »» Дефибрилляторы »» Дерматовенерологическое Оборудование »» Дозаторы шприцевые и насосы инфузионные »» Закаточное оборудование »» Измерительные приборы »»» Гигрометры »»» Доп. устройства для дезсредств »»» Прочее / измерит. приборы »»» Секундомеры »»» Весы »»» Термометры »»»» Термометры ртутные и безртутные »»»» Термометры инфракрасные »»»» Термометры электронные »»» Тонометры »»»» Тонометры автоматические »»»» Тонометры механические »»»» Тонометры полуавтоматические »»»» Манжеты для тономеров »» Кардиологическое оборудование »» Камеры для стерилизации »» Камертоны »» Кольпоскопы »» Коагуляторы »» Косметологическое оборудование »» Кислородное оборудование »» Кресла инвалидные »» Криотехника »» Лабораторное оборудование »»» Анализаторы »»»» Экспресс-анализаторы »»» Встряхиватели »»» Лабораторное оборудование НВ »»» Прочее лабораторное оборудование »»» Термостаты,встряхиватели,шейкеры »»» Центрифуги »» Лампы »» Логопедический кабинет / Кабинет логопеда »» ЛОР оборудование »»» Ларингоскопы »»»» Продукция фирмы KaWe (Германия) »»»»» Рукояти »»»»» Клинки изогутые »»»»» Клинки прямые »»»»» Доп.Опции »»»»» Ларингоскопы для трудной интубации »»» ЛОР оборудование »» Лупы и Бинокуляры »» Массажное оборудование »» Матрацы и подушки противопролежневые »» Маникюрное оборудование »» Микроскопы »» Мониторы прикроватные »» Нагревательные плиты »» Неврология »» Неонатология »» Негатоскопы »» Оборудование разное »» Реабилитационное Оборудование »»» Костыли,трости,ходунки »»» Кресла-коляски инвалидные »»» Матрацы и подушки противопролежневые »»» Столики прикроватные »» Оборудование для медкабинета в школе »» Облучатели,рециркуляторы »» Операционные столы »» Отоскопы »»» Отоскопы лампочные »»» Отоскопы с фиброооптикой »» Отсасыватели »» Офтальмологическое оборудование »» Парикмахерское оборудование »» Педикюрное оборудование »» Пульсоксиметры »» Реанимационное оборудование для клиник »»» Дозаторы и насосы »»» Шприцевые дозаторы-инфузионные насосы »»» Мониторы »» Рентген »» Ростомеры »» Стерилизаторы / Сухожары »» Светильники медицинские »» СПА SPA-оборудование »» Стерилизаторы »» Тележка-каталка, приемное устройство для скорой помощи »» Тележки универсальные »» Ультрафиолетовые лампы »» Ультразвуковые ванны/Мойки ультразвуковые/Ванночки/ »» Урологическое оборудование »» Упаковочные машины,Запечатывающие машины »» Утилизаторы и Деструкторы игл »» Центрифуги »» Физиотерапевтическое Оборудование »»» Электромагнитные поля »»» Ультразвуковая терапия »»» Лазерная терапия »»» Магнитотерапия »»» Прочее физиотерапевтическое оборудование »»» Электрические токи »»» Ингаляторы »»» Теплолечение »»» Светолечение »»» для массажа аппараты »»» Распылители »» Фетальные допплеры »» Фонендоскопы,стетоскопы,тонометры,Динамометры »» Холодильники фармацевтические »» Школа.Медицинский кабинет в школе »» Электроды »» Эндоскопия и лапароскопия Оборудование » Все для парикмахерских и салонов красоты »» Расходники для парикмахерских »»» Аксессуары для парикмахерских »»» Коврики »»» Носки »»» Тапочки »»» Средства для волос »»» Одежда для процедур »»» Комплекты для процедур »»» Коврики »»» Защита глаз »»» Головные уборы »»» Воротнички »»» Бахилы »»» Салфетки »»» Фартуки »»» Халаты »»» Фольга »»» Чехлы »»» Трусы »»» Разделители пальцев »»» Простыни »»» Полотенца »»» Перчатки »»» Пеньюары »» Оборудование Парикмахерское »»» Кресла Парикмахерские »»» Мойки Парикмахерские »» Маникюрные инструменты »» Принадлежности для депиляции »» Парафинотерапия »» для СПА, массажа и сауны »» Для солярия »» Для маникюра и педикюра »» Для косметологии и визажа »» Для восковой депиляции » Мебель »» Мебель металлическая »» Мебель металлическая для клиник »» Ширмы, тележки, прочее »» Мебель из ЛДСП »»» Столы, надстройки, тумбы из ЛДСП »»» Шкафы, стеллажи, антресоли »»» Кушетки из ЛДСП »» Кушетки массажные »»» Стационарные кушетки »» Мебель Диакомс Россия »»» Массажные комплекты »»» Столики медицинские »»» Шкафы медицинские »»» Тележки »»» Столы перевязочные »»» Кресла массажные »»» Кресла гинекологические »»» Кровати акушерские »»» Кровати медицинские »»» Штативы медицинские »»» Банкетки »»» Антресоли »»» Кресла донорские »»» Ширмы »»» Ростомеры,весы »»» Разное »» Штативы медицинские »» Кровати »» Кушетки »» Прочая мебель »» Столы »» Стулья »» Тумбы »» Шкафы »» Мебель для акушерства и гинекологии » Рентгензащита и оборудование » Все для офиса,склада и дома » Разное . ЛИЦЕНЗИРОВАНИЕ КЛИНИК » Лицензирование клиники-что это? и какие этапы вас ожидают ? » Стандарты оснащения клиник -Стоматология,Зуботехническая лаборатория » для Лицензирования клиник / медцентры / салоны красоты / парикмахерских АРЕНДА ОБОРУДОВАНИЯ ДЛЯ ЛИЦЕНЗИРОВАНИЯ КРАСОТА и ЗДОРОВЬЕ » Asiakiss-косметические маски » Уход за зубами »» Отбеливание домашнее »» Трейнеры,капы для зубов »» Ирригаторы и щетки » Уход за лицом » Уход за телом »» Средства от запаха и пота » Уход за волосами » Для визажа » Для солярия » Разное .. ВЕТЕРЕНАРИЯ » Оборудование для ветеринарных клиник »» Анестезиологическое оборудование »» Ветеринарные мониторы пациента »» Ветеринарные электрокардиографы »» Ветеринарные столы для УЗИ и кардио процедур »» Ветеринарные УЗИ сканеры »» Ветеринарные отоскопы, стетоскопы и тонометры »» Весы ветеринарные »» Дезинфекция и стерилизация »» Кислородные концентраторы »» Лампа Вуда »» Носилки-тележки для перемещения животных »» Намордники и сумки для обследования животных »» Оборудование для фиксации животного и термолежаки »» Рентген оборудование для ветеринарии »» Светильники хирургические »» Столы для крупных животных »» Столы хирургические ветеринарные »» Станки ветеринарные операционные »» Стоматологическое оборудование для ветеринарии »»» Скалеры ультразвуковые ветеринарные »»» Портативные стоматологические установки »»» Рентген стоматологический »»» Инструмент для ветеринарии стоматологический »» Термометры »» Физиотерапевтические аппараты для животных »» Холодильное оборудование »» Шприцевые дозаторы и деструкторы игл »» Электрокоагуляторы »» Эндоскопическое оборудование » Ветеринария АРЕНДА выставочного оборудования Все для офиса,склада и дома » Создание сайта для клиник от МАКСИДЕНТ » Бахилы » Перчатки » Товары общего назначения » Оборудование для офиса ПОДАРКИ и СУВЕНИРЫ » Пано и Фигурки из керамики Продажа б/у оборудования для медицины и стоматологии Пломбировочные материалы и цементы

Производитель:
Все3A MEDES (Корея)3M ESPE3M Unitek США3Shape ДанияAALBA DENT INC. СШАAB Ardent ШвецияAdvanced Sterilization ProductsAGILE industriesAitecsAjax (Китай)AmannGirrbachAmazing White СШАAmtech ВеликобританияANDERS DENTALAngelus БразилияAnsell Medical МалайзияAntaeosAnthogyr (Франция)Anthogyr ФранцияAnthos ИталияApexmed Апексмед Интернэшнл Б.В. / НидерландыApoza ТайваньAquajetAquapick КореяARDent, ШвецияARIA di ODONTOIATRIA S.r.l. (Италия)ArkonaARKONA АрконаArtiglio (Италия)Asa Dental S.p.a.Asa Dental ИталияAsiakiss КореяAspinaB.Braun ГерманияBambach АвстралияBaolai Medical КитайBaush ГерманияBayer ГерманияBego ГЕРМАНИЯBenovy МалайзияBeromed GmbH Hospital Products Германия (т.м. «BEROCAN»)Beyond СШАBien-Air ШвейцарияBINDERBionetBisco СШАBisicoBJM LAB ИзраильBK Giulini ГерманияBlossom МалайзияBMT (Чехия)Borer ШвейцарияC.E.J. Dental (США)CandulorCardiolineCARL ZEISS (Германия)Carlo De Giorgi ИталияCastellini, ИталияCattani (Италия)Cattani ИталияCDG КитайChemische Fabrik Dr. Weigert GmbH & Co. KG (Германия)Chirana Medical СловакияColtene ШвейцарияColumbia Dentoform СШАCominox ИталияCOSSHINYF EnamelCoswell SPACovidien СШАCOXO Medical Instrument Co., Lt КитайCrosstex СШАCSN ИталияD-Tec, ШвецияDaiei Dental (Япония)DARTA РоссияDeepak СШАDeguDent (Германия)DENKEN KDF (Япония)Densim СловакияDenstar (Корея)Dental TechnologiesDental X ИталияDentalfilm ИталияDentalHiTecDentamerica Inc.Dentech Corporation, ЯпонияDENTKIST Южная КореяDentLight СШАDentsply (США)Dentsply Maillefer SironaDentstar АнглияDentstar, Южная КореяDeppeler ШвейцарияDERMAGRIP МалайзияDetax ГерманияDetes КитайDexcowin КореяDexisDezodent (Германия)DiaDentDiamondbrite (США – Мексика)DigiMed Ю. КореяDigiMed Южная КореяDiplomat Dental (Словакия)Discom КитайDiscus DentalDispodent КитайDispodent КореяDMETEC КореяDMG ГерманияDonfeelDr. Hinz DentalDr. Schumacher GmbH ГерманияDreve Dentamid GmbHDSLightPost РоссияDURR Dental AG ГерманияDynaFlexEASTRICH (Тайвань)Eastrich Enterprise (Тайвань)Edan InstrumentsEdarredo (Италия)EdelweissEdenta ШвейцарияEKOM СловакияElma ГерманияElma, ГерманияEluan JYK, КитайEMS ШвейцарияEnamel ИталияEschenbach ГерманияEschenbach Германияchenbach ГерманияEuro Type КитайEuronda ИталияEVE ГерманияFaro ИталияFengdan КитайFGM БразилияFimet ФинляндияFONA Dental s.r.o. СШАFONA ИталияFONA КитайForum ИзраильGC ЯпонияGC ЯпонияGeistlich Pharma AGGelato (США)Gendex ГерманияGendex СШАGenie ИталияGenoray КореяGERMIPHENE CORPORATIONGILIGA (Тайвань)GlasSpanGold MillGood Doctors КореяH. Nordin ШвейцарияH.Nordin (Швейцария)H.Nordin ШвейцарияHager & Werken ГерманияHager Werken ГерманияHaier (Китай)Hallim КитайHapicaHarald NordinHEINE ГерманияHeliomed Handelsges.m.b.H, АвстрияHELM-PLAINHigenic ШвейцарияHLW ГерманияHM КитайHong Ke, КитайHoricoHRS КореяHu-FriedyHUM GmbH, ГерманияHumanChemieHumanChemie ГерманияHumanray КореяI.C. Lerсher ГерманияIcanClave КитайINTEGRAL MedicalINTEGRAL Medical Китай (т.м. «INTEGRAL»)InterdentItena ФранцияITERUM-Dental Implants&Equipment LTD (Израиль)Ivoclar Vivadent AG ЛихтенштейнJ. Morita ЯпонияJNB КитайJonson&JonsonJotaKAGAYAKIKaVo (Германия)KaVo ГерманияKaweKD Medical GMBH ГерманияKENDA ЛихтенштейнKerr Hawe СШАKeystone IndustriesKeystone СШАKodak Dental SystemsKohler Medizintechnik ГерманияKomet® ГерманияKulzer ГерманияKuraray Noritake ЯпонияKWI (Тайвань)LAMBDA S.p.A., ИталияLascod ИталияLegrin КитайLeica ГерманияLEIKOLeoneLerсher ГерманияLIXIN Jiangyin Diamond ToolsLM ФинляндияLuerLuxsutures (Люксембург)M. SCHILLING GmbH ГерманияMagic ИталияMagnolia CattaniMajor (Италия)Major ИталияMani ЯпонияMATECH (США)MDT ИзраильMEDERENMedicNRG ИзраильMegadenta ГерманияMegasonex, СШАMeisinger ГерманияMELAG ГерманияMEMMERTMercury (Китай)META Biomed КореяMetraxMGF ИталияMICERIUMMicro Mega ФранцияMicroNX КореяMilestone Scientific (США)MindrayMiradentMIS ИзраильMitsubishi ЯпонияMobilico КитайMOCOM ИталияMonitex ТайваньMr.Curette (МСТ), Южная КореяMRCMuller-Omicron (Германия)Muller-Omicron ГерманияMVS In Motion (Бельгия)MyRay ИталияNAIS БолгарияNanning Baolai КитайNew Life RadiologyNewmed S.r.l. ИталияNICNIHONSHIKA KINZOKU (Япония)NiksyNiksy КитайNINGBO HI-TECH UNICMED IMP&EXP CO, LTD, КитайNipro КореяNissin ЯпонияNopa instruments, ГерманияNordiska DentalNoritake ЯпонияNSK Nakanishi Inc. ЯпонияOlidentOMEC (Италия)Omec, ИталияOMNIDENT ГерманияOMS ИталияOp-d-op СШАOrangedentalOrangedental ГерманияOrangeinstrumentsOrascoptic/Surgical Acuity d/b/aOrix HF ИталияOrmco СШАOro Clean Chemie ШвейцарияOrtho-TainOwandy s.a.s. ФранцияP&T Medical (Китай)P&T Medical КитайPanasonicParkell, СШАPaul Hartmann ГерманияPD ШвейцарияPhilipsPhilips НидерландыPHYSIO CONTROLPi dental (Венгрия)Pierrot ИспанияPlanmeca Oy ФинляндияPoliTec, ГерманияPoly Medicure Limited Индия (т.м. «POLYFLON FEP»)Polydentia ШвейцарияPolywaxPOSDION (Ю. Корея)Poskom КореяPremier СШАPresiDENTPresident Dental GmbHPrime-Dent СШАProCare МалайзияProgeny СШАPROMISEE DENTAL (Китай)R-TestReDent Nova (Израиль)Redent Nova ИзраильRemeza (Белоруссия)Renfert ГерманияRESORBA ГерманияRiester GmbH ГерманияRoder DentalinstrumenteRoeko ГерманияRonvigRoson Medical Instruments КитайRTDRUNYESS-Denti (Ю. Корея)Sabana ГерманияSaeshin Ю. КореяSaeyang Microtech CO., LTD, Южная КореяSAFSafe&Care МалайзияSalli (Финляндия)Sapphire ГерманияSarstedt AG, ГерманияSatelec Sas Acteon Group Division ФранцияScheftner ГерманияScheu Dental ГерманияSCHICK DENTAL ГерманияSchick Technologies Inc. СШАSchiller ШвейцарияSCHULER, ГерманияSchulke & Mayr ГерманияSchutz ГерманияSchwert ГерманияSciCan (Канада)SDI ШвецияSDS ТайваньSecaSempercare МалайзияSeptodont ФранцияSF Medical Products GmbH ГерманияSFM Hospital ProductsSHANGHAI SHEEN MEDICAL INSTRUMENT Co..,LtdSherbetShine АвстрияSHINING 3DShofu ЯпонияSiger КитайSilfradent (Италия)SironaSirona Dentsply Maillefer SironaSLASHSMT(Корея)Soderex ФинляндияSoltec ИталияSONG YOUNG (Тайвань)Song Young ТайваньSonotraxSony Corporanion ЯпонияSpident КореяSpofaDental KerrSS White СШАSteelco ИталияStern Weber (Италия)Stomadent SK СловакияSultanSuni Imaging Microsystems,Inc. СШАSunViv МалайзияSure Cord КореяSURU International Pvt. Ltd. Индия (т.м. «SURUWAY»)Suzhou Zhen Wu Medical Sutures & Suture Needles Factory КитайSwiDella КитайSybronEndo (США)Tau Steril ИталияTau Steril, ИталияTechnodent, АргентинаTecno-Gaz (Италия)TePeTokuyama Dental ЯпонияTork ШвецияTroge Medical GmbH ГерманияTuttnauer Company LTD ИзраильUgin (Франция)ULABUltradent СШАVatech Ю.КореяVDW ГерманияVeranaVERICOM КореяVERIDENTVita (Германия)Vita, ГерманияVoco ГерманияVogt Medical GmbH ГерманияVRK LabW&H DentalWerk АвстрияWaismed-PerSysMedicalWaterpikWebCamera КитайWelch AllynСШАWerther S.P.AWerther ИталияWiedoo (Китай)Wieland (Германия)Wieland, ГерманияWoodpecker DTE КитайWoodpecker КитайWoson КитайWu Wei КитайWuerWei КитайWuerWei, КитайYDM ЯпонияYeti (Германия)Yeti, ГерманияYMARDA КитайYOUJOY КитайYuyao Jintai Machine Factory (Китай)ZEISS ГерманияZeitun ИорданияZhermack ИталияZhermapoZollАванта РоссияАверон (Россия)Аверон РоссияАгри КазаньАксионАксион РоссияАльтонАРМЕДАэролайф (Россия)БелоруссияБиоссБозон РоссияБразилияВалентаВеликобританияВита-Пул РоссияВладМиВаВладмива (Россия)ВладМиВа РоссияВоко Voco ГерманияВормаВоронеж ДентисГеософт ДентГерманияГигиена Мед РоссияДанияДента-М, Струм БелоруссияДентсплай DentsplyДжи Си GC ЯпонияДиакомс РоссияЕлатомский ПЗ, ЕлатьмаЕлатомский ПЗ,ЕлатьмаЖасмин-МедИвокляр IvoclarИзраильИкадент РоссияИндияИнститут развития инновационной стоматологииИнтермедапатит РоссияИспанияИталияИтена Itena ФранцияКазаньКазань КМИЗКанадаКасимовский Приборный Завод (Россия)КитайКореяКристи РоссияКристидент РоссияКронт РоссияЛатвияМedical ECONETМалайзияМалайзия Karex Industries SDN BHDМедполимер РоссияМексикаМЕТА КореяМИЗ-Ворсма (Россия)Можайский МИЗ РоссияМониторНавтекс РоссияНидерландыНидерланды Rovers Medical Devices B.VОмега-Дент РоссияОрганик Фармасьютикалз ОООПакистанПозис РоссияПолистом РоссияПольшаРадуга РоссииРазноеРоссииРоссияРоссия ЭкрадентРоссия-Израиль-ГеософтСербияСерпухов «ВХ-Тайфун»Сибмединструмент РоссияСканерСловакияСмоленское СКТБ СПУ (Россия)Сонис РоссияСпектрум Интернэшнл, Инк., СШАСтомаСтома (Украина)Стома УкраинаСтома ХарьковСтомадент РоссияСтомахимСтрумСШАТайваньТайвань ROLENCEТехноДент РоссияТЗМОИТМТТор ВМТОР ВМ РоссияУкраинаФинляндияФорма Углич РоссияФранцияЦелит ВоронежШвейцарияШульц Германия Mani SchutzЭстэйд-Сервисгруп РоссияЮжная КореяЮЮ МедикалЮЮ Медикал КитайЯпония

Новинка:
Вседанет

Спецпредложение:
Вседанет

Результатов на странице: 5203550658095

Найти

ЭндоЖи №2 (Endozhy, Владмива), жидкость 15мл

ЭндоЖи №2 (Endozhy, Владмива), жидкость 15мл
Описание:
Жидкость для выявления устья каналов и их расширения.

Комплектация: жидкость 15мл

Состав и свойства:
Содержит смесь калиевой и натриевой солей ЭДТА (17%) и центимониум бромид — поверхностно-активный антисептик, обеспечивающий пенообразование, быстрое проникновение препарата в микроканальца и предотвращающий оседание дентинных опилок, что облегчает их извлечение из канала.

Производитель

Владмива

Характеристики
Активное вещество	ЭДТА
Действие	Бактерицидное; Расширение каналов; Очистка каналов
Консистенция	Жидкость

Реестр зарегистрированных медицинских изделий

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ
ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
(РОСЗДРАВНАДЗОР)

РЕГИСТРАЦИОННОЕ УДОСТОВЕРЕНИЕ
НА МЕДИЦИНСКОЕ ИЗДЕЛИЕ

от 27.09.2017 № ФСР 2010/08613

На медицинское изделие

Комплект жидкостей для обработки корневых каналов зубов «ЭндоЖи» по ТУ 9391-041-45814830-2001 в составе: — жидкость «ЭндоЖи № 1» (для высушивания и обезжиривания каналов зубов) — 1 фл., — жидкость «ЭндоЖи № 2» (для расширения и выявления устья каналов зубов) — 1 фл., — жидкость «ЭндоЖи № 3» (для антисептической обработки каналов зубов) — 1 фл., — жидкость «ЭндоЖи № 4» (вяжущее средство при обработке корневых каналов) — 1 фл.

Настоящее регистрационное удостоверение выдано

АО «ОЭЗ «ВладМиВа», 308023, Россия, г. Белгород, ул. Студенческая, д. 52

Производитель

АО «ОЭЗ «ВладМиВа», 308023, Россия, г. Белгород, ул. Студенческая, д. 19

Место производства медицинского изделия

308023, Россия, г. Белгород, ул. Студенческая, д. 52

Номер регистрационного досье № ФСР 2010/08613

Вид медицинского изделия: 101770

Класс потенциального риска применения медицинского изделия: 1

Код Общероссийского классификатора продукции для
медицинского изделия: 32.50.50.000

Приказом Росздравнадзора от 27.09.2017. № ________

Допущено к обращению на территории Российской Федерации.

Руководитель Федеральной службы
По надзору в сфере здравоохранения
Ф.И.О

(печать)

_подпись_

Участие митохондриальной нуклеазы EndoG в регуляции пролиферации клеток посредством контроля активных форм кислорода

Основные моменты

•: Снижение экспрессии митохондриальной нуклеазы EndoG индуцирует продукцию ROS.
•: Дефицит EndoG препятствует пролиферации клеток через ROS-зависимую передачу сигналов.
•: Повышение ROS в EndoG-дефицитных клетках ограничивает активность оси Akt / Gsk3 / циклин.
•: Humanin поддерживает пролиферацию, несмотря на высокие уровни ROS, вызванные дефицитом Endog.
•: Дефицит Romo-1 снижает пролиферацию клеток независимо от EndoG и ROS.

Abstract

Апоптотическая нуклеаза EndoG участвует в репликации митохондриальной ДНК. Предыдущие результаты показали, что, помимо регуляции гипертрофии кардиомиоцитов, EndoG может участвовать в пролиферации клеток. Здесь, используя in vivo и модели клеточных культур, мы исследовали роль EndoG в пролиферации клеток.Генетическая делеция Endog как in vivo , так и в культивируемых клетках или Endog , подавление in vitro индуцировала дефект пролиферации клеток грызунов и человека со склонностью клеток к накоплению в фазе клеточного цикла G ₁ и увеличенное производство активных форм кислорода (АФК). Дефект пролиферации клеток возник при снижении активности оси AKT / PKB-GSK-3β-циклин D и был устранен добавлением поглотителей ROS. Дефицит EndoG не влиял ни на экспрессию детоксифицирующих АФК ферментов, ни на экспрессию комплексов цепи переноса электронов и скорость потребления кислорода.Добавление микропептида Humanin к EndoG-дефицитным клеткам восстанавливало фосфорилирование и пролиферацию AKT без снижения уровней ROS. Таким образом, наши результаты показывают, что EndoG важен для пролиферации клеток посредством контроля ROS и что Humanin может восстанавливать деление клеток в EndoG-дефицитных клетках и противодействовать эффектам ROS на фосфорилирование AKT.

Ключевые слова

EndoG

Клеточная пролиферация

Митохондрии

Активные формы кислорода

Передача сигналов клеток

Humanin

Romo1

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Цитирующие статьи

анти-ENDOG антитела | Поликлональные антитела к эндонуклеазе G кролика-NP_004426.2

NP_004426.2

[Другие продукты]

NCBI GenBank Нуклеотид №

[Другие продукты]

UniProt, первичный доступ №

[Другие продукты]

Вторичный регистрационный номер UniProt

UniProt Соответствующий номер доступа №

NCBI Официальное полное имя

эндонуклеаза G, митохондриальная

Официальный синоним NCBI Полные имена

эндонуклеаза G

Информация о белках NCBI

эндонуклеаза G, митохондриальная; эндо G; митохондриальная эндонуклеаза G

Название протеина UniProt

Эндонуклеаза G, митохондриальная

Синонимы UniProt Имена генов

Имя записи UniProt

NUCG_HUMAN

Меры предосторожности

Все продукты MyBioSource предназначены для научных лабораторных исследований и не предназначены для диагностического, терапевтического, профилактического или in vivo использования.Совершая покупку, вы прямо заявляете и гарантируете MyBioSource, что вы будете надлежащим образом тестировать и использовать любые Продукты, приобретенные у MyBioSource, в соответствии с отраслевыми стандартами. MyBioSource и его авторизованные дистрибьюторы оставляют за собой право отказать в обработке любого заказа, если мы обоснованно полагаем, что предполагаемое использование будет выходить за рамки наших приемлемых руководящих принципов.

Заявление об ограничении ответственности

Несмотря на то, что были предприняты все усилия для обеспечения точности информации, представленной в этом техническом описании, MyBioSource не несет ответственности за любые упущения или ошибки, содержащиеся в нем.MyBioSource оставляет за собой право вносить изменения в эту таблицу в любое время без предварительного уведомления.

Заказчик обязан сообщать MyBioSource о проблемах с производительностью продукта в течение 30 дней с момента получения продукта. Пожалуйста, посетите нашу страницу с положениями и условиями для получения дополнительной информации.

Продукты, связанные с антителами к ENDOG

Пути, связанные с антителом к ENDOG

Заболевания, связанные с антителами к ENDOG

Органы / ткани, связанные с антителом против ENDOG

EndoG-антитело [7F2G10] — Кат.№ PM-4583

Моноклональное моноклональное антитело

Характеристики
ВИДЫ-ХОЗЯИН:	Мышь
ВИДЫ РЕАКТИВНОСТИ:	Человек, Крыса
ИММУНОГЕН:	Рекомбинантный белок, соответствующий аминокислотам 51–140 человеческого EndoG.
ИСПЫТАННЫЕ ПРИЛОЖЕНИЯ:	ELISA, WB
ПРИМЕНЕНИЕ:	EndoG можно использовать для обнаружения EndoG с помощью вестерн-блоттинга при 5-10 мкг / мл. Подтвержденные антитела: вестерн-блоттинг в человеческих образцах. Все остальные приложения и виды еще не проверены.
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ КОНТРОЛЬ:	1) Кат. № 1211 — Лизат клеток HepG2
	2) Кат. № 95-103 — Рекомбинантный белок EndoG

Свойства
ОЧИСТКА:	Моноклональные антитела EndoG представляют собой очищенный белок А.
КЛОНАЛЬНОСТЬ:	Моноклональный
ИЗОТИП:	IgG1
КОНЬЮГАТ:	Неконъюгированный
	ФИЗИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ	ФИЗИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ	Поставляется в PBS, содержащем 0.02% азид натрия.
КОНЦЕНТРАЦИЯ:	1 мг / мл
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ:	Моноклональные антитела EndoG можно хранить при -20 ° C, стабильно в течение одного года.

PRO.:

Дополнительная информация
ОФИЦИАЛЬНЫЙ СИМВОЛ:	ENDOG
АЛЬТЕРНАТИВНЫЕ НАЗВАНИЯ:	Антитело EndoG [7F2G10]: Endo G
НОМЕР ДОСТУПА:	Q14249
24638471
ИДЕНТИФИКАТОР ГЕНА:	2021
ПРИМЕЧАНИЕ ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ:	Оптимальные разведения для каждого применения определяются исследователем.

Предпосылки и ссылки
ИСТОРИЯ:	Моноклональное антитело EndoG: Фрагментация ядерной ДНК является признаком апоптотической гибели клетки. Активность каспазы и нуклеазы участвует во фрагментации ДНК.Активированная каспазой дезоксирибонуклеаза (CAD), также называемая фактором фрагментации ДНК (DFF40), является одной из таких нуклеаз и способна индуцировать фрагментацию ДНК и конденсацию хроматина после расщепления каспазой-3 ее ингибитора ICAD / DFF45. Также существует независимая от каспазы и CAD фрагментация ДНК. Недавние исследования показали, что другая нуклеаза, эндонуклеаза G (EndoG), специфически активируется апоптотическими стимулами и способна вызывать нуклеосомную фрагментацию ДНК независимо от каспазы и DFF / CAD.EndoG — это митохондрион-специфическая нуклеаза, которая перемещается в ядро и расщепляет ДНК хроматина во время апоптоза. Гомолог EndoG млекопитающих является первым митохондриальным белком, идентифицированным как участвующий в апоптозе у C. elegans . EndoG также расщепляет ДНК in vitro.
ССЫЛКИ:	1) Li LY, Luo X, Wang X. Эндонуклеаза G представляет собой апоптотическую ДНКазу при высвобождении из митохондрий. Nature 2001; 412: 95-9.
	2) Пэрриш Дж., Ли Л., Клотц К. и др.Митохондриальная эндонуклеаза G важна для апоптоза C. elegans. Nature 2001; 412: 90-4	3) Хенгартнер МО. Апоптоз. Разрушители ДНК. Nature 2001; 412: 27, 29.	4) Widlak P, Li LY, Wang X и др. Действие рекомбинантной апоптотической эндонуклеазы G человека на голую ДНК и субстраты хроматина: взаимодействие с экзонуклеазой и ДНКазой I. J. Biol. Chem. 2001; 276: 48404-9.

АНТИТЕЛЫ ТОЛЬКО ДЛЯ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Для получения дополнительной информации посетите страницу условий и положений ProSci.

эндог, экзог, что это? — statsmodels

statsmodels использует endog и exog в качестве имен данных, наблюдаемые переменные, которые используются в задаче оценки. Другие имена, которые часто используются в различных статистических пакетах или учебниках, для например,

эндог	экзог
л	x
y переменная	x переменная
левая сторона (LHS)	правая сторона (RHS)
зависимая переменная	независимая переменная
регресс и	регрессоров
исход	дизайн
переменная ответа	объясняющая переменная

Использование довольно часто зависит от предметной области и модели; однако мы выбрали использовать почти исключительно endog и exog .Мнемонический намек на то, чтобы сохранить двоих Отдельные термины заключаются в том, что exogenous имеет в своем имени символ «x», как в x-переменной.

x и y — однобуквенные имена, которые иногда используются для временных переменные и сами по себе не информативны. Чтобы избежать однобуквенных имен, мы решили использовать описательные имена и остановились на endog и exog . Поскольку это подвергалось критике, это может измениться в будущем.

Фон

Некоторые неофициальные определения терминов:

эндогенный : вызванный факторами внутри системы

экзогенные : вызванные факторами вне системы

Эндогенные переменные обозначают переменные в экономической / эконометрической модели которые объясняются или предсказываются этой моделью. http://stats.oecd.org/glossary/detail.asp?ID=794

Экзогенные переменные обозначают переменные, которые появляются в экономическая / эконометрическая модель, но не объясняются этой моделью (т.е. принято как дано моделью). http://stats.oecd.org/glossary/detail.asp?ID=890

В эконометрике и статистике термины определены более формально, и используются разные определения экзогенности (слабая, сильная, строгая) в зависимости от на модели. Использование в статистических моделях в качестве имен переменных не всегда может быть интерпретируется в формальном смысле, но пытается следовать тому же принципу.

В простейшей форме модель связывает наблюдаемую переменную y с другим набором переменных x в некоторой линейной или нелинейной форме

 y = f (x, beta) + шум
у = х * бета + шум

Однако, чтобы иметь статистическую модель, нам нужны дополнительные предположения о свойства независимых переменных x и шума. Единый стандарт предположение для многих базовых моделей состоит в том, что x не коррелирует с шумом. В более общем определении x, будучи экзогенным, означает, что нам не нужно рассмотрите, как были сгенерированы объясняющие переменные в x, будь то намеренно или путем случайной выборки из некоторого базового распределения, когда мы хотим оценить эффект или влияние, которое x оказывает на y, или проверить гипотезу об этом эффекте.

Другими словами, y — эндогенный для нашей модели, x — экзогенный для нашей модели. для оценки.

В качестве примера предположим, что вы проводите эксперимент и для второго сеанса некоторые предметы больше не доступны. Уместно ли исключение для выводов, сделанных вами для эксперимента? Другими словами, можем ли мы рассматривать решение об отказе от обучения как экзогенное для нашей проблема.

Пользователь должен знать (или обращаться к учебнику, чтобы узнать), что лежащие в основе статистические допущения для моделей.Например, exog в OLS может иметь зависимые переменные с запаздыванием, если член ошибки или шума независимо распределены во времени (или некоррелированы во времени). Однако если члены ошибки автокоррелированы, тогда OLS не имеет хорошей статистической properties (несовместимо), и правильной моделью будет ARMAX. statsmodels имеет функции для регрессионной диагностики, чтобы проверить, оправданы предположения или нет.

Проапоптотический белок BNIP3 взаимодействует с VDAC, индуцируя митохондриальное высвобождение эндонуклеазы G

Abstract

BNIP3 — это проапоптотический белок, который индуцирует гибель клеток через митохондриально-опосредованный путь.Ранее мы сообщали, что митохондриальная локализация BNIP3 и транслокация EndoG из митохондрий в ядро являются критическими этапами пути BNIP3. Однако неясно, как BNIP3 взаимодействует с митохондриями. Здесь мы показываем, что экспрессия BNIP3 приводит к высвобождению митохондрий и ядерной транслокации EndoG. Инкубация рекомбинантного белка GST-BNIP3 со свежевыделенными митохондриями привела к интеграции BNIP3 в митохондрии, снижению уровней EndoG в митохондриях и присутствию EndoG в супернатанте, который был способен расщеплять ДНК хроматина.Коиммунопреципитация и масс-спектрометрический анализ показывают, что BNIP3 взаимодействует с потенциал-зависимым анионным каналом (VDAC) для увеличения вероятности открытия пор митохондриальной проницаемости (ПП) и индуцирования митохондриального высвобождения EndoG. Блокирование VDAC антителом к VDAC в значительной степени устраняет митохондриальную локализацию BNIP3 и предотвращает высвобождение EndoG. Вместе данные идентифицируют VDAC как взаимодействующего партнера BNIP3 и поддерживают эндонуклеазу G как медиатор пути BNIP3.

Образец цитирования: Zhang X, Bian X, Kong J (2014) Проапоптотический белок BNIP3 взаимодействует с VDAC, индуцируя митохондриальный выброс эндонуклеазы G. PLoS ONE 9 (12): e113642. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0113642

Редактор: Даолин Тан, Университет Питтсбурга, Соединенные Штаты Америки

Поступило: 1 августа 2014 г .; Одобрена: 27 октября 2014 г .; Опубликован: 1 декабря 2014 г.

Авторские права: © 2014 Zhang et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Авторы подтверждают, что все данные, лежащие в основе результатов, полностью доступны без ограничений. Все соответствующие данные находятся в документе.

Финансирование: Проект был поддержан Канадской сетью по инсульту, Советом по исследованиям в области здравоохранения Манитобы и Канадскими институтами исследований в области здравоохранения.X. Чжан получил стипендию от Совета по стипендиям Китая. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

BNIP3 (Bcl-2 / аденовирус E1B 19 кДа белок, взаимодействующий с белком 3, также известный как NIP3) является членом подсемейства Bcl-2 митохондриальных белков, вызывающих смерть [1].Благодаря функциональному HIF-1-чувствительному элементу (HRE), BNIP3 высоко экспрессируется при гипоксических и ишемических состояниях [2] и, как было показано, играет роль в патогенезе многих нейродегенеративных и сердечно-сосудистых заболеваний [3]. Потеря экспрессии BNIP3 способствует химиорезистентности раковых клеток [4]. Этот белок из 194 аминокислот имеет 4 домена: домен PEST, который нацелен на деградацию BNIP3, предполагаемый домен 3 гомологии Bcl-2 (Bh4), который гомологичен другим членам семейства Bcl-2, консервативный домен CD и домен C -концевой трансмембранный домен (TM).В отличие от других членов семейства Bcl-2, домен TM скорее, чем домен Bh4 в BNIP3, необходим для его димеризации, митохондриальной локализации и активности индукции гибели [5], [6]. BNIP3-индуцированная гибель клеток характеризуется быстрым открытием пор митохондриальной проницаемости (ПП), глубокой митохондриальной дисфункцией и расщеплением хроматиновой ДНК, но, по-видимому, не зависит от активности каспаз [6], [7]. Ранее мы сообщали, что путь BNIP3 включает высвобождение митохондрий и ядерную транслокацию эндонуклеазы G (EndoG) [8], [9].Однако неясно, как BNIP3 взаимодействует с митохондриями. Здесь мы показываем, что BNIP3 взаимодействует с потенциал-зависимым анионным каналом (VDAC), чтобы непосредственно индуцировать митохондриальный выброс и ядерную транслокацию EndoG. Наши данные идентифицируют VDAC как взаимодействующего партнера BNIP3 и предоставляют прямые доказательства того, что EndoG является медиатором пути гибели клеток BNIP3.

Материалы и методы

Трансфекция клеток и иммуноцитохимия

SH-SY5Y клеток нейробластомы человека поддерживали в модифицированной по Дульбекко среде Игла / F-12 (1-1) с добавлением 100 единиц / мл пенициллина, 100 мкг / мл стрептомицина и 10% фетальной бычьей сыворотки.Через 24 ч культивирования клетки временно трансфицировали плазмидой pcDNA3-hBNIP3, которая несла полную длину гена BNIP3 человека с помощью LipofectAMINE 2000 (Invitrogen, Burlington, Ontario). Клетки, трансфицированные плазмидой pcDNA3-hBNIP3ΔTM, несущей дисфункциональную форму BNIP3 из-за делеции трансмембранного домена, использовали в качестве контроля. Обе плазмиды были подарком покойного доктора А.Х. Гринберга [10]. Через 24 часа после трансфекции клетки собирали для иммуноцитохимии, как описано ранее [9], [11].

Производство рекомбинантных белков

кДНК BNIP3 и BNIP3ΔTM крысы получали с помощью ОТ-ПЦР с использованием следующих праймеров: смысловой 5 ‘–GGATCCATGTCGCAGAGCGGGGAGGA- 3’ как для BNIP3, так и для BNIP3ΔTM, и антисмысловой 5 ‘–GAATTCTCAAAAAGGTACTACTAGNATGGAA для BNIP3 и 3’ -GAATTCTAAAAAGGTACTACTAGNATGGAA и 5 ‘-GAATTCTCAAAAGGTACTACTAGNATGGAA для 5’-GAATTCACAAAAGGTACTACTAGNATGGAA и 5 ‘-GAATTCACAAAAGGTACTACTAGNATGGAA для 5’ Продукты RT-PCR клонировали в вектор pGEM-T (Promega) в соответствии с протоколом производителя. После переваривания рекомбинантной плазмиды с помощью BamHI и EcoRI полученные фрагменты очищали и вставляли в расщепленный BamHI-EcoRI вектор экспрессии pGEX-2T (Amersham Pharmacia Biotech) для создания рекомбинантных плазмид BNIP3 и BNIP3ΔTM.Рекомбинантные плазмиды GST-Bcl-2, GST-hBid и GST-tBid были щедрыми подарками от доктора Кайны [12], доктора Юаня [13] и доктора Корсмейера [14] соответственно. Все конструкции были подтверждены секвенированием ДНК. Затем 100 мл свежей культуральной среды LB инокулировали 1,0 мл BL21DE3 каждого бактериального трансфектанта и энергично встряхивали (180 об / мин) при 37 ° C, пока культура не достигла экспоненциальной фазы (OD 0,5–0,8, около 3 часов). Чтобы вызвать продукцию слитых белков, к BL21DE3 добавляли изопропил-b-D-тиогалактопиранозид (IPTG, конечная концентрация 1 мМ).Бактериальные культуры осаждали и лизировали реагентом для экстракции бактериального белка (B-PER, Pierce, Rockford, IL). Экспрессированные белки выделяли в растворимой бактериальной фракции и очищали с помощью Glutatione Sepharose 4B (Amersham Biosciences) в соответствии с протоколом производителя.

Выделение митохондрий и инкубация с рекомбинантными белками

Взрослых крыс Sprague Dawley подвергали глубокой анестезии смесью изофлуран / пропиленгликоль (1 мл смеси на 500 мл пространства колпака, SOP A003 Университета Манитобы по уходу за животными).Все выполненные процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными Университета Манитобы, стандарты которого соответствуют рекомендациям Канадского совета по уходу за животными (CCAC). Затем получали свежую ткань печени и гомогенизировали в ледяном буфере для изоляции, содержащем 225 мМ маннита, 75 мМ сахарозы, 5 мМ Hepes и 1 мг / мл бычьего сывороточного альбумина (pH 7,4). После центрифугирования при 600 g в течение 10 минут при 4 ° C для удаления интактных клеток и ядер сырые митохондрии осаждали из супернатанта центрифугированием при 12000 g в течение 10 минут при 4 ° C и дополнительно очищали в градиенте Перколла, как описано ранее [15 ].Осадок митохондрий ресуспендировали в буфере бесклеточной системы (CFS) (10 мМ HEPES-NaOH, pH 7,4, 220 мМ маннит, 68 мМ сахароза, 2 мМ NaCl, 2,5 мМ KH ₂ PO ₄, 0,5 мМ EGTA, 2 мМ MgCl ₂, 5 мМ пируват, 0,1 мМ PMSF, 1 мМ дитиотреитол), хранили на льду и использовали в течение 1 часа после приготовления. Митохондриальный эквивалент 100 мкг белков инкубировали при 37 ° C в 100 мкл буфера CFS в течение 60 мин с различными рекомбинантными белками. Образцы были разделены на фракции митохондрий и надосадочной жидкости центрифугированием при 20000 g в течение 10 мин при 4 ° C для дальнейшего анализа.

Коиммунопреципитация

После инкубации с GST-BNIP3 или без него митохондрии ресуспендировали в 1 мл неденатурирующего буфера для лизиса (1% Triton X-100, 50 мМ Tris-Cl, 300 мМ NaCl, 5 мМ EDTA, добавление 10 мМ йодацетамида, 1 мМ PMSF, 2 мкг / мл лейпетпина, pH 7,4) на льду в течение 30 мин и центрифугировали при 12000 g в течение 10 мин при 4 ° C. В экспериментах с блокированием антителом VDAC 0,3 мг / мл антитела против VDAC / порина (Abcam, ab34726) добавляли к образцам митохондрий за 30 минут до GST-BNIP3.Супернатанты инкубировали с моноклональным антителом BNIP3 (1-1000, Университет Манитобы) или антителом VDAC (1-500, Cell Signaling, Danvers, MA) при встряхивании в течение 2 часов на льду. Затем к каждому образцу добавляли 150 мкл сефарозы 4B и инкубировали в течение ночи при 4 ° C с осторожным встряхиванием. Иммунные комплексы осаждали гранулами агарозы с протеином А (Invitrogen). После трехкратного промывания в 1 мл неденатурирующего буфера для лизиса осадок ресуспендировали в буфере для образцов, и белки разделяли с помощью SDS-PAGE (10% гель) и анализировали с помощью масс-спектрометрии и вестерн-блоттинга с антителами к BNIP3 (1-1000 ) и VDAC (1∶500, Cell Signaling, Danvers, MA), как описано ранее [5].Полосы вестерн-блоттинга определяли количественно с использованием программного обеспечения NIH ImageJ.

Идентификация белков с помощью масс-спектрометрии

После окрашивания кумасси бриллиантовым синим полосы белка в гелях SDS-PAGE вырезали и расщепляли в геле трипсином. После центрифугирования супернатанты, содержащие триптические пептиды, использовали для масс-спектрометрии, выполняемой Центром протеомики и системной биологии Манитобы, Виннипег, Канада.

Выделение ядер HEK293 и измерение фрагментации ДНК

Экспоненциально растущие клетки HEK293 собирали центрифугированием в течение 5 минут при 200 g.Клетки промывали холодным PBS и покачивали на льду в течение 20 минут в буфере NB (10 мМ HEPES-NaOH pH 7,5, 10 мМ KCl, 1,5 мМ MgCl ₂, 1 мМ DTT, 0,1 мМ PMSF). Клетки раскачивали 20 раз, и гомогенат смешивали с двойным объемом сахарозной подушки в полном буфере NB (NB + 30% сахароза) и центрифугировали при 500 г в течение 6 мин при 4 ° C. Осадок ядер промывали и ресуспендировали в буфере CFS. Для изучения фрагментации ДНК 10 ⁶ HEK293 ядер в 5 мкл буфера CFS смешивали с 25 мкл митохондриального супернатанта и инкубировали в течение 2 ч при 37 ° C.Затем ядра лизировали в буфере TE (50 мМ Трис-HCl pH 8,0, 10 мМ EDTA) с 0,5% SDS и 0,5 мг / мл протеиназы K в течение 4 часов при 37 ° C. Белки экстрагировали фенолом, забуференным ТЕ, и ДНК осаждали двумя объемами EtOH и 1/10 объема 4 М NaCl путем инкубации в течение ночи при 72 ° C. Образцы ДНК ресуспендировали в ТЕ и наносили на горизонтальный 1,8% агарозный гель.

Обнаружение высвобождения кальцеина из митохондрий

Митохондрии (100 мкг) суспендированы в 100 мкл буфера, содержащего (2 мМ HEPES, pH 7.5, 0,25 М сахарозы, 10 мМ сукцината, 1 мМ фосфата калия) инкубировали с различными рекомбинантными белками в течение 30 мин при 37 ° C. Затем добавляли кальцеин-AM (молекулярные зонды, конечная концентрация 5 мкМ) и инкубировали еще 30 мин. После промывания интенсивности флуоресценции кальцеина измеряли на микропланшетном ридере VICTOR ³ 1420 Mulitlabel (Perkin Elmer Life Sciences) при длине волны возбуждения 485 нм и длине волны испускания 525 нм. Высвобождение кальцеина рассчитывали как процент кальцеина, вышедшего из митохондрий.

Результаты

BNIP3 индуцирует транслокацию EndoG

Чтобы проверить, индуцирует ли экспрессия BNIP3 транслокацию EndoG, клетки нейробластомы человека SH-SY5Y трансфицировали плазмидой pcDNA3-huBNIP3, кодирующей полную длину BNIP3 человека. Иммуногистохимический анализ показал, что большинство (82%) клеток, экспрессирующих BNIP3, имели ядерное присутствие EndoG (рис. 1A). В контрольных экспериментах транслокация EndoG была обнаружена в 12% клеток, трансфицированных усеченной формой BNIP3 (pcDNA3-huBNIP3ΔTM).BNIP3-индуцированная транслокация EndoG была дополнительно подтверждена вестерн-блоттингом (рис. 1 B и C). В этих экспериментах митохондрии и ядра выделяли из клеток через 24 часа после трансфекции плазмидами pcDNA3-huBNIP3 или pcDNA3-huBNIP3ΔTM и подвергали иммуноблоттингу антителом EndoG. Как показано на Фигуре 1B, уровни EndoG в митохондриях клеток, экспрессирующих BNIP3, были значительно снижены (p <0,01) по сравнению как с контролем, так и с клетками, экспрессирующими BNIP3ΔTM. Между тем, уровни EndoG в ядрах увеличились в 12 раз в клетках, трансфицированных BNIP3 (рис. 1C, p <0.01). В клетках, экспрессирующих BNIP3ΔTM, были обнаружены только фоновые уровни ядерного EndoG.

Рисунок 1. Экспрессия BNIP3 приводит к транслокации EndoG.

A, клетки нейробластомы человека SH-SY5Y, трансфицированные плазмидами полноразмерного BNIP3 или мутантного BNIP3ΔTM, были иммуномечены антителами к BNIP3 и EndoG и окрашены Hoechst 33342. Большинство клеток, экспрессирующих BNIP3 (82%), показали ядерную транслокацию. EndoG, в то время как только 12% клеток, экспрессирующих BNIP3ΔTM, демонстрировали транслокацию EndoG.B и C, вестерн-блоттинг EndoG в митохондриальных и ядерных образцах, полученных из клеток SH-SY5Y, трансфицированных указанными плазмидами. Показанные результаты представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для объединенных данных 4 независимых экспериментов. **, р <0,01.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0113642.g001

BNIP3 индуцирует митохондриальное высвобождение EndoG в изолированных митохондриях

Из-за сложности клеточных событий транслокация EndoG в BNIP3-экспрессирующие клетки может быть вызвана факторами косвенно или независимо от BNIP3.Чтобы исключить такую возможность, мы применили подход in vitro с использованием изолированных митохондрий. Мы создали рекомбинантные белки GST-BNIP3, GST-BNIP3ΔTM, GST-Bcl-2 и GST-tBid и изолировали митохондрии из печени крыс. Поскольку известно, что кальций является фактором, вызывающим переход митохондриальной проницаемости (MPT) [16], мы инкубировали свежевыделенные митохондрии с рекомбинантными белками в течение 1 часа при 37 ° C в буфере без кальция, как описано ранее [17]. Затем образцы были разделены на фракции митохондрий и надосадочной жидкости и подвергнуты вестерн-блоттингу с использованием антител к EndoG, BNIP3, AIF, Cox IV и HSP60.Как и ожидалось, активные белки GST-BNIP3 с прогнозируемой молекулярной массой около 45 кДа имели тенденцию к образованию диммеров. Димерная форма GST-BNIP3 (90 кДа) была обнаружена в основном в митохондриальной фракции (рис. 2А). Уровни EndoG в митохондриях были значительно снижены (p <0,05) при инкубации с 0,5 мкМ GST-BNIP3. Усеченный Bid (tBid), который, как известно, вызывает митохондриальное высвобождение EndoG [17], использовался в качестве положительного контроля. Наблюдалось умеренное снижение EndoG в митохондриях, обработанных 50 нМ GST-BNIP3.Между тем, высокие уровни EndoG были обнаружены в митохондриальных супернатантах, обработанных BNIP3 и tBid (рис. 2B). В контроле высвобождение EndoG не обнаруживалось в митохондриях, обработанных Bcl-2 или неактивной формой BNIP3, в которой отсутствовал функциональный трансмембранный домен. Когда митохондрии предварительно инкубировали с Bcl-2 в течение 30 минут перед BNIP3, в супернатанте были обнаружены только фоновые уровни EndoG, что позволяет предположить, что индуцированное BNIP3 высвобождение EndoG митохондриями может быть ингибировано Bcl-2.Чтобы подтвердить присутствие EndoG в обработанных BNIP3 митохондриальных супернатантах, полосы белка вырезали и расщепляли в геле трипсином с последующей масс-спектрометрией. Был идентифицирован триптический пептид (YGLPGVAQLR), совпадающий с аминокислотами 64-73 крысиного EndoG (рис. 2С).

Рисунок 2. BNIP3-индуцированное высвобождение EndoG митохондриями.

Свежевыделенные митохондрии инкубировали с указанными рекомбинантными белками в течение 1 ч, а затем разделяли на митохондриальную и супернатантную фракции.В группе, обработанной как Bcl-2, так и BNIP3, оба использовались в концентрации 0,5 мкМ. A и B, вестерн-блоттинг-анализ BNIP3 и EndoG во фракциях митохондрий и надосадочной жидкости. Контроль загрузки выполняли с помощью антител Cox IV и HSP60. Показанные результаты представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для объединенных данных трех независимых экспериментов. ΔTM ^#, = BNIP3ΔTM; *, р <0,05; **, р <0,01. C, аминокислотная последовательность EndoG. Триптический пептид, идентифицированный из образцов супернатанта путем массового снятия отпечатков пальцев, выделен жирным шрифтом и подчеркнут.D, Вестерн-блоттинг цитохрома c и AIF. Оба не были обнаружены в образцах супернатанта.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0113642.g002

Для проверки ферментативной активности высвободившегося EndoG свежевыделенные ядра инкубировали с митохондриальными супернатантами. Анализ ДНК-лестницы показал, что расщепление ДНК хроматина было обнаружено в ядерных образцах, инкубированных с супернатантами, приготовленными из обработанных GST-BNIP3- и GST-tBid митохондрий, но не из Bcl-2- и hBid (полноразмерный Bid человека, который неактивен) -обработанные митохондрии и необработанный контроль (рис. 3).Предварительная обработка митохондрий Bcl-2 в значительной степени устраняла нуклеазную активность обработанного BNIP3 митохондриального супернатанта. Это соответствует результатам, что высвобождение эндонуклеазы G было предотвращено в митохондриях, предварительно обработанных Bcl-2 (рис. 2).

Рис. 3. EndoG, высвобождаемый из изолированных митохондрий после индукции BNIP3, является ферментативно активным.

Свежевыделенные митохондрии инкубировали с различными рекомбинантными белками в течение 1 ч при 37 ° C. Супернатанты собирали и инкубировали с ядрами HEK293 в течение 2 ч при 37 ° C.Образцы ДНК загружали в горизонтальный 1,8% -ный агарозный гель для анализа ступенчатого ДНК. Показано репрезентативное изображение, выбранное из трех независимых экспериментов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0113642.g003

BNIP3 вызывает открытие пор митохондриальной проницаемости (ПП), взаимодействуя с VDAC

Чтобы проверить влияние BNIP3 на поры РТ митохондрий, измеряли высвобождение кальцеина митохондриями. Сложный эфир кальцеина-AM представляет собой проникающий через мембрану флуоресцентный зонд, который свободно входит в митохондрии, но не может выйти, кроме как через открытые поры PT после метаболизма эстеразами [18].Значительное высвобождение кальцеина было обнаружено в митохондриях, обработанных BNIP3 и tBid, по сравнению с обработанными Bcl-2 и необработанными митохондриями (рис. 4A). Предварительная обработка Bcl-2 заметно снижала вызванное BNIP3 высвобождение кальцеина.

Рисунок 4. BNIP3 вызывает MPT, взаимодействуя с VDAC.

A, МПТ, индуцированная BNIP3. Высвобождение кальцеина было представлено как процент кальцеина, ускользнувшего из митохондрий в течение 30-минутной инкубации. **, p <0,01 по сравнению с контролем. B. Ингибирование пор PT снижает вызванное BNIP3 высвобождение EndoG.Циклоспорин A (2 мкМ) добавляли к митохондриям в буфере CFS за 10 мин до белка BNIP3-GST в различных конечных концентрациях, как указано. BNIP3, CoxIV и EndoG во фракциях митохондрий и супернатантов определяли с помощью вестерн-блоттинга. C. Распределение EndoG определяли путем анализа общей интенсивности полос EndoG. D. Идентификация VDAC как взаимодействующего партнера BNIP3. После инкубации митохондрий с BNIP3 взаимодействующие белки BNIP3 осаждали антителом BNIP3 и анализировали с помощью масс-спектрометрии.Аминокислотная последовательность VDAC с триптическим пептидом, идентифицированным из иммунопреципитатов, выделена жирным шрифтом и подчеркнута. E Вестерн-блоттинг показывает взаимодействие между BNIP3 и VDAC. а) Уровни GST-BNIP3 в митохондриальной фракции после инкубации митохондрий-BNIP3, определенные с помощью вестерн-блоттинга. б) После коиммунопреципитации с антителом BNIP3 иммуноблоттинг с антителом VDAC выявляет присутствие VDAC в иммунопреципитатах BNIP3. c) BNIP3 присутствовал в осадках, когда антитело VDAC использовали для совместной иммунопреципитации.Показаны образцы из трех независимых экспериментов. Лизаты клеток без обработки BNIP3 использовали в качестве контролей.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0113642.g004

Было показано, что члены семейства Bcl-2 взаимодействуют с компонентами митохондриальных пор PT, вызывая митохондриальную дисфункцию и селективное высвобождение митохондриальных белков [19] , [20]. Чтобы определить участие пор PT в BNIP3-индуцированном высвобождении EndoG, циклоспорин A, ингибитор митохондриальных пор PT, был добавлен в инкубацию за 10 минут до BNIP3-GST.Ингибирование пор PT снижает индуцированное BNIP3 высвобождение EndoG на 60% через 1 час инкубации (рис. 4, B и C). Результат ясно указывает на то, что высвобождение EndoG происходит, по крайней мере, в первую очередь через поры PT. Чтобы понять, как BNIP3 взаимодействует с митохондриями, мы инкубировали митохондрии с белком GST-BNIP3 и провели эксперименты по коиммунопреципитации с использованием нашего очищенного моноклонального антитела BNIP3 для удаления белков, взаимодействующих с BNIP3. С помощью масс-спектрометрии мы идентифицировали триптический пептид, который соответствует аминокислотам с 257 по 266 потенциал-зависимого анионного канала (VDAC) (рис. 4D).Присутствие VDAC в белках, взаимодействующих с BNIP3, было дополнительно подтверждено вестерн-блоттингом с использованием специфического антитела VDAC (рис. 4E, b). Как и ожидалось, BNIP3 был обнаружен в преципитатах, когда антитело VDAC использовалось для коиммунопреципитации (рис. 4E, c).

Блокирование VDAC антителом против VDAC предотвращает вызванное BNIP3 высвобождение EndoG

Чтобы проверить, требуется ли активность VDAC для индуцированной BNIP3 гибели клеток, митохондрии (1 мг / мл) инкубировали с 0.3 мг / мл антитела против VDAC (Abcam ab34726) или нормального кроличьего IgG в контроле в течение 30 мин перед добавлением GST-BNIP3. Как показано на рисунке 5, блокирование VDAC нейтрализующим антителом отменяет интеграцию BNIP3 в митохондрии и значительно снижает высвобождение EndoG из митохондрий. Совместная иммунопреципитация с нашим антителом BNIP3 дополнительно подтвердила, что антитело VDAC действительно блокирует взаимодействие BNIP3 с VDAC.

Рис. 5. Блокирование VDAC устраняет вызванное BNIP3 высвобождение EndoG митохондриями.

A, Митохондрии (1 мг / мл) инкубировали с рекомбинантным GST-BNIP3 в присутствии 0,3 мг / мл антитела против VDAC или нормального кроличьего IgG в контроле. Инкубацию с транквилизированным BNIP3 (BNIP3ΔTM) использовали в качестве контроля. Образцы были разделены на фракции митохондрий и надосадочной жидкости центрифугированием. а). Блокирование VDAC предотвращает интеграцию BNIP3 в митохондрии. б) Анализ EndoG из супернатанта показал, что уровни EndoG, высвобождаемые из митохондрий, были снижены блокированием антителом VDAC.c) Совместная иммунопреципитация с антителом BNIP3 для удаления белков, взаимодействующих с BNIP3, показала, что блокирование VDAC отменяет интеграцию BNIP3 с митохондриями. B. Количественная оценка интеграции BNIP3 с митохондриями и митохондриального высвобождения EndoG, на которое влияет блокирование антител к VDAC. Показанные результаты представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для объединенных данных трех независимых экспериментов. **, р <0,01.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0113642.g005

Обсуждение

Характерно для апоптоза нуклеосомная фрагментация ДНК — это каспазозависимое событие и является результатом активации фактора фрагментации ДНК, дезоксирибонуклеазы, активируемой каспазой [21].BNIP3-индуцированная гибель клеток включает расщепление ДНК, но, по-видимому, не зависит от активности каспаз [7], [9], [22]. Следовательно, задействованы другие нуклеазы-кандидаты. EndoG — одна из таких нуклеаз, способных расщеплять ДНК хроматина независимо от активности каспаз [17]. Он связан с такими заболеваниями, как гипертрофия сердца и болезнь Паркинсона [23], [24]. EndoG кодируется в ядре, синтезируется как пропептид в цитоплазме и импортируется в митохондрии посредством процесса, опосредованного его амино-концевой последовательностью, нацеленной на митохондрии.Этот сигнальный пептид отщепляется при попадании в митохондрии, и, таким образом, митохондриальный EndoG является зрелым и активным [25]. Предыдущее исследование продемонстрировало, что Endo G является преобладающей митохондриальной ДНКазой, поскольку нейтрализующие антитела к Endo G полностью блокируют деградацию ДНК митохондриальными нуклеазами in vitro [17]. Мы ранее наблюдали участие EndoG в BNIP3-индуцированной гибели клеток на моделях гипоксии и церебральной ишемии [8], [9], [26]. В настоящем исследовании мы обнаружили, что форсированная экспрессия BNIP3 вызывает высвобождение митохондрий и ядерную транслокацию EndoG.Инкубация рекомбинантного белка GST-BNIP3 со свежевыделенными митохондриями привела к интеграции BNIP3 в митохондрии, снижению уровней EndoG в митохондриях и присутствию EndoG в митохондриальном супернатанте, способном расщеплять ДНК хроматина. Хотя митохондрии содержат другую нуклеазу (эндонуклеаза G-подобная 1, EXOG), тот факт, что в качестве субстратов мы использовали ядра HEK293, свидетельствует о том, что обнаруженная нами нуклеазная активность была в основном от EndoG, поскольку только EndoG расщепляет двухцепочечную ДНК, а эндонуклеаза G-подобная 1 ( EXOG), как известно, предпочтительно расщепляет одноцепочечную ДНК [27].Из этих данных мы заключаем, что BNIP3 непосредственно индуцирует митохондриальное высвобождение EndoG. Интересно, что митохондриальные белки, индуцирующие апоптоз, фактор (AIF) и цитохром c не были обнаружены в митохондриальных супернатантах, обработанных BNIP3 и BNIP3ΔTM. Это согласуется с предыдущим наблюдением на клеточных культурах [7], предполагающим, что BNIP3 может избирательно индуцировать митохондриальное высвобождение EndoG и что AIF и цитохром c могут не участвовать в пути BNIP3.

Митохондриальное высвобождение апоптотических белков часто происходит через открытие пор митохондриального РТ [28].Кальций — известный важный индуктор перехода митохондриальной проницаемости (MPT). MPT также может быть кальций-независимым процессом, как было показано ранее [17], [29]. Предыдущие исследования на клеточных культурах показали, что экспрессия BNIP3 увеличивает вероятность открытия митохондриальных пор PT [7]. В наших экспериментах мы наблюдали, что BNIP3 способен индуцировать MPT в среде без кальция, предполагая, что вызванная BNIP3 MPT не зависит от кальция. Наши данные также подтверждают, что индуцированное BNIP3 высвобождение EndoG митохондриями не зависит от кальция и что MPT, индуцированный BNIP3, отличается от индуцированного кальцием MPT, потому что последний, как было показано, вызывает высвобождение цитохрома c [16].

Одним из критических событий пути гибели клеток BNIP3 является его взаимодействие с митохондриями, вызывающее высвобождение белков митохондриями [7], [9], [10]. В отличие от многих белков, вызывающих смерть, BNIP3 не имеет функционального «внутриклеточного» домена, что позволяет предположить, что BNIP3 нуждается во взаимодействующем партнере для его индуцирующей гибель активности. Путем коиммунопреципитации и масс-спектрометрического анализа мы предоставляем первое свидетельство того, что BNIP3 взаимодействует с потенциал-зависимым анионным каналом (VDAC), увеличивая вероятность открытия пор митохондриальной проницаемости (ПП) и индуцируя высвобождение митохондриями EndoG.Блокирование VDAC антителом к VDAC способно устранить митохондриальную локализацию BNIP3 и предотвратить высвобождение EndoG. В совокупности данные предполагают, что VDAC является взаимодействующим партнером BNIP3. Необходимы дальнейшие фармакологические и генетические эксперименты, чтобы продемонстрировать, является ли VDAC функционально необходимым для BNIP3-индуцированного высвобождения EndoG.

Таким образом, настоящее исследование предоставляет доказательства того, что BNIP3 взаимодействует с VDAC, чтобы индуцировать митохондриальное высвобождение EndoG. Результаты идентифицируют VDAC как взаимодействующего партнера BNIP3 и подтверждают, что EndoG является медиатором BNIP3-индуцированного пути гибели клеток.Дальнейшие эксперименты с животными или клетками, нокаутированными по EndoG, позволят определить, является ли EndoG функционально необходимым для пути BNIP3.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: JK. Провел эксперименты: XZ. Проанализированы данные: XZ XB JK. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты для анализа: JK XB. Написал бумагу: XZ XB JK.

Ссылки

1. Бойд Дж. М., Мальстром С., Субраманиан Т., Венкатеш Л. К., Шапер У. и др. (1994) Белки аденовируса E1B 19 кДа и Bcl-2 взаимодействуют с общим набором клеточных белков.. Ячейка 79: 341–351.
2. Bruick RK (2000) Экспрессия гена, кодирующего проапоптотический белок Nip3, индуцируется гипоксией. . Proc Natl Acad Sci USA 97: 9082–9087.
3. Бертон Т.Р., Гибсон С.Б. (2009) Роль BNIP3 члена семейства Bcl-2 в гибели и заболеваниях клеток: NIPping по пятам за гибелью клеток. . Разница в клеточной смерти 16: 515–523.
4. Эркан М., Клифф Дж., Эспозито И., Гизе Т., Кеттерер К. и др. (2005) Потеря экспрессии BNIP3 является поздним событием при раке поджелудочной железы, способствующим химиорезистентности и ухудшению прогноза.. Онкоген 24: 4421–4432.
5. Ли К, Гуань Т., Чен Х, Ли В., Цай Кью и др. (2013) BNIP3 опосредует премиелинизирующую гибель клеток олигодендроцитов при гипоксии и ишемии. . J Neurochem 127: 426–433.
6. Рэй Р., Чен Дж., Ванде Велде С., Цизо Дж., Парк Дж. Х. и др. (2000) BNIP3 гетеродимеризуется с Bcl-2 / Bcl-X (L) и вызывает гибель клеток независимо от домена 3 (Bh4) гомологии Bcl-2 как в митохондриальных, так и в немитохондриальных участках. . J Biol Chem 275: 1439–1448.
7.Ванде Велде С., Цизо Дж., Дубик Д., Алимонти Дж., Браун Т. и др. (2000) BNIP3 и генетический контроль некрозоподобной гибели клеток через поры перехода митохондриальной проницаемости. . Mol Cell Biol 20: 5454–5468.
8. Чжао С.Т., Чен М., Ли С.Дж., Чжан М.Х., Ли Б.Х. и др. (2009) Митохондриальная активация BNIP3 предшествует транслокации эндонуклеазы G в результате гибели нейронов гиппокампа после кислородно-глюкозной депривации. . BMC Neurosci 10: 113.
9. Zhang Z, Yang X, Zhang S, Ma X, Kong J (2007) Активизация BNIP3 и транслокация EndoG в отсроченной гибели нейронов при инсульте и гипоксии.. Ход 38: 1606–1613.
10. Чен Дж., Рэй Р., Дубик Д., Ши Л., Цизо Дж. И др. (1997) E1B 19K / Bcl-2-связывающий белок Nip3 представляет собой димерный митохондриальный белок, активирующий апоптоз. . J. Exp Med 186: 1975–1983.
11. Zhang S, Zhang Z, Sandhu G, Ma X, Yang X и др. (2007) Доказательства индуцированной окислительным стрессом экспрессии BNIP3 при нейротоксичности бета-амилоида. . Brain Res 1138: 221–230.
12. Tomicic MT, Kaina B (2001) Белок Bcl-2 хомяка расщепляется in vitro и в клетках каспазой-9 и каспазой-3.. Biochem Biophys Res Commun 281: 404-408.
13. Li H, Zhu H, Xu CJ, Yuan J (1998) Расщепление BID каспазой 8 опосредует повреждение митохондрий в Fas-пути апоптоза. . Ячейка 94: 491–501.
14. Gross A, McDonnell JM, Korsmeyer SJ (1999) Члены семейства BCL-2 и митохондрии в апоптозе. . Genes Dev 13: 1899–1911.
15. Rajapakse N, Shimizu K, Payne M, Busija D (2001) Выделение и характеристика интактных митохондрий из мозга новорожденных крыс.. Brain Res Brain Res Protoc 8: 176–183.
16. Брустовецкий Н., Брустовецкий Т., Джеммерсон Р., Дубинский Дж. М. (2002) Вызванное кальцием высвобождение цитохрома с из митохондрий ЦНС связано с переходом проницаемости и разрывом внешней мембраны. . Журнал Neurochem 80: 207–218.
17. Li LY, Luo X, Wang X (2001) Эндонуклеаза G представляет собой апоптотическую ДНКазу при высвобождении из митохондрий. Природа. 412: 95–99.
18. Бернарди П. (1999) Митохондриальный транспорт катионов: каналы, обменники и переход проницаемости.. Physiol Rev 79: 1127–1155.
19. Ростовцева Т.К., Антонссон Б., Сузуки М., Юле Р.Дж., Коломбини М. и др. (2004) Bid, но не Bax, регулирует каналы VDAC. . J Biol Chem 279: 13575–13583.
20. Ши И, Чен Дж, Вен Ч, Чен Р., Чжэн И и др. (2003) Идентификация сайта контакта белок-белок и способа взаимодействия человеческого VDAC1 с белками семейства Bcl-2. . Biochem Biophys Res Commun 305: 989–996.
21. Лю X, Zou H, Slaughter C, Wang X (1997) DFF, гетеродимерный белок, который функционирует ниже каспазы-3, чтобы вызвать фрагментацию ДНК во время апоптоза.. Ячейка 89: 175–184.
22. Cizeau J, Ray R, Chen G, Gietz RD, Greenberg AH (2000) Ортолог C. elegans ceBNIP3 взаимодействует с CED-9 и CED-3, но убивает посредством Bh4- и независимого от каспазы механизма. . Онкоген 19: 5453–5463.
23. McDermott-Roe C, Ye J, Ahmed R, Sun XM, Serafin A, et al. (2011) Эндонуклеаза G — новый фактор, определяющий гипертрофию сердца и функцию митохондрий. . Природа 478: 114–118.
24. Буттнер С., Хаберниг Л., Броскамп Ф., Рули Д., Фогтл Ф. Н. и др.(2013) Эндонуклеаза G опосредует цитотоксичность альфа-синуклеина при болезни Паркинсона. . EMBO J 32: 3041–3054.
25. Schafer P, Scholz SR, Gimadutdinow O, Cymerman IA, Bujnicki JM, et al. (2004) Структурная и функциональная характеристика митохондриальной EndoG, сахарной неспецифической нуклеазы, которая играет важную роль во время апоптоза. . J Mol Biol 338: 217–228.
26. Чжан Дж., Йе Дж., Альтафадж А., Кардона М., Бахи Н. и др. (2011) EndoG связывает индуцированное Bnip3 повреждение митохондрий и независимую от каспаз фрагментацию ДНК в ишемических кардиомиоцитах.. PloS one 6: e17998.
27. Cymerman IA, Chung I, Beckmann BM, Bujnicki JM, Meiss G (2008) EXOG, новый паралог эндонуклеазы G у высших эукариот. . Исследование нуклеиновых кислот 36: 1369–1379.
28. Crompton M (1999) Пора перехода митохондриальной проницаемости и ее роль в гибели клеток. Biochem J. 341 (Pt 2): 233–249.
29. Урен Р. Т., Девсон Дж., Бонзон С., Литгоу Т., Ньюмейер Д. Д. и др. (2005) Митохондриальное высвобождение проапоптотических белков: электростатические взаимодействия могут удерживать цитохром с, но не Smac / DIABLO, на митохондриальных мембранах.. J Biol Chem 280: 2266–2274.

Picroside II оказывает нейропротекторный эффект, ингибируя проницаемость mPTP и высвобождение EndoG после церебральной ишемии / реперфузионной травмы у крыс

Alvira CM, Umesh A, Husted C, Ying L, Hou Y, Lyu SC, Cornfield DN (2012) Voltage- Взаимодействие зависимого анионного канала-2 с синтазой оксида азота усиливает продукцию оксида азота эндотелиальными клетками легочной артерии. Am J Respir Cell Mol Biol 47 (5): 669–678. https: // doi.org / 10.1165 / rcmb.2011-0436OC

CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

Arnoult D, Gaume B, Karbowski M, Sharpe JC, Cecconi F, Youle RJ (2003) Митохондриальное высвобождение AIF и EndoG требует активации каспазы после Bax / Bak-опосредованной пермеабилизации. EMBO J 22 (17): 4385–4399. https://doi.org/10.1093/emboj/cdg423

CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

Азарашвили Т., Крестинина О., Бабурина Ю., Одинокова И., Акатов В., Белецкий И., Пападопулос В. (2016) Влияние пептида CRAC, VLNYYVW, на открытие mPTP в митохондриях мозга и печени крыс.Int J Mol Sci 17 (12). https://doi.org/10.3390/ijms17122096

Baines CP (2009) Пора перехода митохондриальной проницаемости и ишемия-реперфузия. Basic Res Cardiol 104 (2): 181–188. https://doi.org/10.1007/s00395-009-0004-8

CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый

Ben-Hail D, Shoshan-Barmatz V (2016) Ингибиторы транспорта анионов, взаимодействующие с VDAC1, ингибируют олигомеризацию и апоптоз VDAC1.Biochim Biophys Acta 1863 (7 Pt a): 1612–1623. https://doi.org/10.1016/j.bbamcr.2016.04.002